Возможно, вы сменили регион при заполнении корзины.
Часть товаров из корзины будет перемещена в статус отложенных
и не сможет быть оформлена для заказа, если вы продолжите работу в данном регионе
Наборы для выделения и очистки нуклеиновых кислот на спин-колонках и магнитных частицах
В наборах diaGene используется свойство нуклеиновых кислот (НК) связываться с диоксидом кремния в присутствии хаотропных агентов — одноатомных спиртов или солей гуанидина. При этом формируется солевой мостик из положительно заряженных групп между диоксидом кремния и цепочкой ДНК или РНК. Если молекулы диоксида прикреплены к жёсткой подложке — можно сорбировать на них НК из раствора, отмыть от примесей с помощью смеси спирта и солевого раствора, а затем элюировать чистый препарат водой или буфером с низкой ионной силой. В качестве подложки, на которой находятся молекулы диоксида кремния, в наборах diaGene используются мембраны спин-колонок или магнитные частицы.
Спин-колонки удобны для выделения НК вручную при небольшом потоке образцов (до 25 в день), когда требуется максимальный выход и чистота препарата.
Магнитные частицы удобны при больших потоках образцов (до нескольких сотен в день), так как дают возможность автоматизации процесса выделения.
Наборы diaGene на спин-колонках Стоимость одного выделения — от 34 руб.
Наборы diaGene на спин-колонках предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических образцов: бактериальных и животных клеток, цельной крови, плазмы и буккального эпителия, растений, пищевых продуктов, сперматозоидов, слюны, FFPE-препаратов, сухих пятен крови, животных тканей; для очистки фрагментов ДНК после ПЦР и других ферментативных реакций или для экстракции ДНК после разделения фрагментов в агарозном геле. Емкость спин-колонки – 25 мг нуклеиновой кислоты.
Полученные препараты НК обладают высокой степенью чистоты, при этом количество и качество ДНК или РНК сопоставимо с таковыми при использовании аналогичных наборов зарубежных производителей, а себестоимость выделения ниже. Все протоколы просты без фенол-хлороформной экстракции и переосаждения спиртом. В составе наборов есть все необходимые буферы, спин-колонки, специальные пробирки для сбора фильтрата при центрифугировании.
Набор предназначен для выделения геномной ДНК из бактериальных культур. Выделение ДНК начинается с лизиса бактериальных клеток в присутствии РНКазы и протеиназы К. Затем лизат наносится на спин-колонку diaGene с силикагелевым сорбентом. Очистка ДНК на спин-колонках начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.
Сорбент позволяет выделять до 20 мкг свободной от примесей ДНК длиной 5-50 тысяч пар нуклеотидов.
Набор предназначен для выделения ДНК из гистологических препаратов, фиксированных в формалине и залитых парафином. Выделение ДНК начинается с растворения и удаления парафина. Затем образцы лизируются в присутствии протеиназы К, и лизат наносится на спин-колонку. ДНК избирательно связывается с фильтром колонки в присутствии хаотропной соли. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР.
Набор предназначен для выделения геномной ДНК из образцов животных тканей массой от 20 до 100 мкг. Очистка ДНК происходит за счёт её связывания с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата. Выход ДНК зависит от типа ткани и может составлять до 10 мкг.
Набор предназначен для выделения ДНК из культур животных клеток. Выделение ДНК начинается с лизиса клеток, очистка нуклеиновой кислоты происходит за счёт связывания ДНК с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата. Выход ДНК зависит от типа и количества клеток, поэтому надо учитывать, что ёмкость колонок — до 20 мкг нуклеиновой кислоты.
Выделение ДНК из пищевых продуктов и сырья начинается с гомогенизации образцов. Гомогенизацию можно проводить как вручную, так и с помощью автоматических мельниц или гомогенизаторов. Гомогенат инкубируется с протеиназой К и освобождается от большей части углеводов. Затем происходит очистка ДНК на спин-колонках. ДНК избирательно связывается с фильтром колонки в присутствии хаотропной соли. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР.
Сорбент позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК.
Очистка ДНК на спин-колонках diaGene начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.
Сорбент позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК.
Наборы предназначены для выделения геномной ДНК из зелёных частей растений. Параллельно с геномной ДНК растения происходит выделение геномной бактериальной и вирусной ДНК, что удобно при анализе инфицированности растения.
Очистка ДНК на микроколонках diaGene начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.
Сорбент позволяет выделять до 15 мкг геномной ДНК.
Все реагенты хранятся при комнатной температуре (+15-25 °С).
Набор предназначен для выделения ДНК из слюны. Очистка ДНК происходит за счёт её связывания с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР.
Набор предназначен для выделения геномной ДНК из сперматозоидов. Очистка ДНК происходит за счёт её связывания с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата, пригодного для большинства молекулярно-биологических манипуляций, например, ПЦР. Все реагенты, кроме раствора Протеиназы К, могут храниться при комнатной температуре. Раствор Протеиназы К необходимо хранить при -20 °С.
Набор предназначен для выделения ДНК из сухих пятен крови на FTA-картах, на бумаге и некоторых видах ткани (хлопчатобумажная и шерстяная).
Пятна крови обрабатываются буфером с протеиназой К, полученный лизат наносится на спин-колонку. Очистка ДНК на спин-колонках diaGene происходит за счёт избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей. С колонки элюируется чистый препарат ДНК. Ёмкость колонки составляет до 25 мкг ДНК, но в конечном итоге зависит от количества примесей в наносимом на колонку лизате.
Методика рассчитана на выделение ДНК из 100 мкл цельной крови, стабилизированной ЭДТА. Объём образца может варьировать от 50 до 200 мкл. При этом объёмы Буфера LBB, Протеиназы К и Раствора для сорбции должны быть изменены пропорционально.
Набор предназначен для выделения геномной ДНК из широкого спектра биологических образцов животного происхождения. Очистка ДНК происходит за счёт связывания нуклеиновой кислоты с сорбентом колонок diaGene. Связанная ДНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата. Выход ДНК зависит от типа биологического материала; ёмкость сорбента составляет до 25 мкг.
Полученные образцы готовы для постановки ПЦР, секвенирования, рестрикции, лигирования и прочих реакций. Образцы могут быть использованы либо немедленно, либо в течение месяца при хранении на -20 °С. Для длительного хранения рекомендуется поместить образцы ДНК на -86 °С или добавить к ним 3 объёма 96% этанола и хранить при -20 °С.
Данный набор предназначен для выделения геномной ДНК из:
Набор предназначен для выделения до 25 мкг плазмидной ДНК длиной до 20 т.п.н. из 3-5 мл бактериальной культуры. Очистка ДНК на колонках diaGene происходит за счёт избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.
Выход ДНК зависит от ряда факторов: копийности плазмиды, условий роста, объёма культуры и т.д.
Не рекомендуется использовать для выделения плазмид длиной свыше 50 тысяч пар нуклеотидов, а также для получения препарата плазмидной ДНК для трансфекции эукариотических клеток.
Набор предназначен для выделения тотальной РНК из культуры животных клеток. Выделение РНК начинается с лизиса клеток, при этом ядра, содержащие геномную ДНК, остаются интактными. Очистка нуклеиновой кислоты происходит за счёт связывания РНК с сорбентом колонок diaGene. Связанная РНК отмывается от примесей и элюируется в виде чистого препарата. Выход РНК зависит от типа и количества клеток, поэтому надо учитывать, что ёмкость колонок — до 20 мкг.
Набор предназначен для выделения РНК из плазмы крови. Полученные образцы РНК готовы для постановки ОТ-ПЦР и других реакций. Образцы могут быть использованы немедленно или в течение года после переосаждения РНК этанолом и хранения при -20 °С или -70 °С.
Набор предназначен для очистки ДНК из реакционных смесей: после ПЦР, лигирования, рестрикции и т.д. Очистка ДНК происходит за счёт избирательного связывания с сорбентом колонок diaGene.
Буферы Y и Z содержат в своем составе индикатор кислотности. При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу буферов, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл 3М ацетата Na (pH 5.0). Буфер Y предназначен для очистки ДНК от низкомолекулярных примесей - солей и нуклеотидтрифосфатов. Буфер Z предназначен для удаления из образца не только низкомолекулярных соединений, но и коротких фрагментов ДНК (до 100 нуклеотидов), например, ПЦР-праймеров.
Набор предназначен для очистки ДНК из реакционных смесей после ПЦР, лигирования, рестрикции и т.д. Очистка ДНК происходит за счёт избирательного связывания с сорбентом колонок на основе диоксида кремния. Фрагменты двцхцепочечной ДНК длиной свыше 50 п.н. сорбируются на мембрану колонки в присутствии хаотропного агента, а примеси (нуклеотидтрифосфаты, одноцепочечные олигонуклеотиды, соли и т.д.) оказываются в проскоке. Чистая ДНК элюируется буфером или деионизованной водой.
Ёмкость колонки составляет до 25 мкг ДНК, но зависит от состава наносимого на колонку препарата и от длины фрагментов ДНК.
Буфер Y содержит в своем составе индикатор кислотности. Эффективность сорбции ДНК зависит от рН (связывание ДНК с сорбентом происходит при рН < 7.5). При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера Y, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл 3М ацетата Na (pH 5.0).
Набор предназначен для элюции и очистки фрагментов ДНК из легкоплавкого агарозного геля после электрофоретического разделения. С помощью набора можно элюировать ДНК из ТАЕ- или ТВЕ-геля, процесс прост и занимает не более 15-20 минут. После отмывки от примесей чистый препарат ДНК элюируется с колонки.
Полученный препарат ДНК может использоваться для рестриктазного расщепления, лигирования, секвенирования и др.
Ёмкость колонки diaGene составляет до 25 мкг ДНК.
Буфер для сорбции М содержит в своем составе индикатор кислотности. Эффективность сорбции ДНК зависит от рН (связывание ДНК с сорбентом происходит при рН < 7,5). При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу
буфера М цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл 3М ацетата Na (pH 5,0).
В основе наборов на магнитных частицах лежит тот же принцип взаимодействия НК с диоксидом кремния в присутствии хаотропного агента, только диоксид кремния нанесён не на фильтр колонки, а на поверхность металлических частиц. Наборы на основе магнитных частиц удобны при одновременном выделении НК из большого количества образцов (до 96). Наборы diaGene на магнитных частицах предлагаются в двух форматах — на 96 или 384 выделения, могут быть использованы для выделения ДНК и РНК как вручную, так и с автоматическими станциями KingFisher, Thermo.
Силикатный магносорбент для выделения ДНК/РНК на магнитном штативе (сепараторе).
Состав: суспензия микрогранул силикагеля, содержащих парамагнитные нанокристаллы магнетита /маггемита, в солевом растворе (0,5 М NaCl, 0,05 % NaN₃).
Цвет
коричневый
Концентрация
весовая — 5%, объёмная ~ 50%
pH раствора
меньше 7,5
Средний размер частиц
0,94 мкм
Упаковка
стеклянный флакон с герметично завинчивающейся крышкой
Срок годности
1 год
Условия хранения
в неповреждённой упаковке при температуре 0…30 °С (не замораживать)
Узнать цену
Экстра-миксы и наборы для ПЦР, diaGene
Экстра-миксы diaGene — это готовые 2х смеси для ПЦР; содержат в одной пробирке все необходимые для постановки ПЦР компоненты (кроме матрицы и праймеров): термофильную ДНК-полимеразу, буфер, dNTP.
В состав некоторых экстра-миксов входит инертный краситель, интеркалирующий краситель SYBR Green I, пассивный краситель ROX и т.д.
Преимущество экстра-миксов diaGene:
сокращается время на подготовку реакции;
снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в однотипных экспериментах;
снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
Наборы для ПЦР diaGene — комплекты отдельных пробирок, содержащих необходимые компоненты для постановки ПЦР (кроме матрицы и праймеров): термофильную ДНК-полимеразу (Taq-полимеразу с «горячим стартом», Pfu-полимеразу), буфер для ПЦР, смесь dNTP и другие.
В состав наборов могут быть включены несколько различных буферов, а также раствор Mg²⁺, которые обеспечивают повышение производительности и дают возможность подбора оптимальных условий для амплификации сложных и GC-богатых последовательностей.
Набор для амплификации длинных фрагментов содержит смесь ДНК-полимераз — Taq и Pfu, что повышает точность синтеза ДНК. Для удобства анализа ПЦР-продуктов с помощью электрофореза в наборы может быть включён буфер для нанесения на гель.
В состав набора для ОТ-ПЦР кроме буфера, Taq-полимеразы и трифосфатов, входят обратная транскриптаза и праймеры для синтеза кДНК — случайный и олиго(дТ).
Экстра-миксы и наборы для проведения стандартной ПЦР с HS-Taq
ПЦР с “горячим” стартом, высокопроизводительная и обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью, наработка ПЦР-продуктов для ТА-клонирования, ОТ-ПЦР.
Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start расширенный содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу, три реакционных буфера (10× ПЦР буфер, 5× Green буфер и 5× GC буфер), а также другие компоненты, необходимые для проведения ПЦР (за исключением матрицы ДНК и праймеров).
HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём инкубации в течение 5 мин при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.
10× ПЦР буфер оптимизирован для проведения большинства видов ПЦР, в том числе для проведения ПЦР в режиме реального времени с интеркалирующими красителями или флуоресцентными зондами. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.
5× Green буфер содержит маркерные красители (сине-зелёный и желтый) и добавки, увеличивающие плотность раствора, для удобного нанесения на гель. Предназначен для стандартной ПЦР с оценкой выхода продуктов по конечной точке (методом разделения продуктов в геле). Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.
5× GC буфер предназначен для амплификации участков ДНК, богатых GC и/или имеющих сложную пространственную структуру. Буфер химически стабилен, содержит вещества, меняющие температуру отжига праймеров и характеристики плавления матрицы.
В состав всех буферов входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Все буферы в условиях разбавления до 1× (однократного) содержат 1,5 мМ MgCl2. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl2 и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры". 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.
Состав набора
Компонент
Кат. #
1959.0500
1959.2500
HS-Taq DNA-полимераза, 5 ед. акт./ мкл*
1 × 100 мкл
2 × 250 мкл
10× ПЦР буфер
1 × 1.5 мл
3 × 1.8 мл
5× Green буфер
2 × 1.5 мл
5 × 1.8 мл
5× GC буфер
2 × 1.5 мл
5 × 1.8 мл
50 мМ MgCl2
1 × 1 мл
2 × 1 мл
50× смесь dNTP (10 мМ каждого)
2 × 200 мкл
2 × 800 мкл
6× буфер для нанесения на гель
1 × 1 мл
1 × 1.8 мл
* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С. Условия реакции:50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.
Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.
ПЦР GC-богатых и сложно-структурированных участков ДНК.
Ограничения к использованию
Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.
Хранение и транспортировка: при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.
Экстра-микс HS-Taq представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР (исключая ДНК-матрицу и праймеры):
высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с «горячим» стартом,
смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов,
ПЦР-буфер,
Mg2+.
Экстра-микс оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c "горячим стартом"; он химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристик плавления матрицы. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР, и компоненты, увеличивающие плотность пробы для удобства работы с ней. Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования.
Экстра-микс HS-Taq не содержит веществ, мешающих проведению оптического контроля за ходом реакции по изменению флюоресценции пробы.
HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при температуре ниже +70оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95°С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.
Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl2
и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl2 позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры".
Состав набора
Кат. №
Кол-во реакций по 50 мкл
HS-Taq (2х)
50 мМ MgCl2
Вода
6× буфер для нанесения на гель
1960.0200
200
4 х 1.25 мл
1 х 1 мл
4 х 1.25 мл
1 х 1 мл
1960.1020
1020
17 х 1.5 мл
2 х 1.8 мл
1 х 1.8 мл
Состав экстра-микса HS-Taq (2х):
100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
100 мM KCl;
0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
4 мМ MgCl2;
0,06 ед. акт./мкл HS-Taq ДНК-полимеразы;
0,2% Tween 20;
стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы.
Преимущества использования экстра-микса с Taq-полимеразой с "горячим" стартом:
Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
Сокращается время на подготовку реакции.
Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
Возможно использование в широком спектре видов ПЦР.
Возможность ТА клонирования продуктов ПЦР за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.
Область применения:
ПЦР с "горячим" стартом.
Высокопроизводительная ПЦР.
Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
Наработка ПЦР-продуктов для ТА-клонирования.
Вторая стадия ОТ-ПЦР.
Ограничения к использованию:
Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.н.
Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.
Срок хранения и транспортировка: 1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания- размораживания.
Экстра-микс HS-Taq Color представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР (исключая ДНК-матрицу и праймеры):
высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с "горячим" стартом;
смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов;
ПЦР-буфер;
Mg2+;
красители.
Экстра-микс оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c “горячим” стартом; он химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристик плавления матрицы. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР.
Увеличивающие плотность пробы компоненты и красители позволяют наносить реакционную смесь сразу на гель после амплификации для удобства работы с ней.
Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования. HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при температуре ниже +70оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95 °С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.
Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl2и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl2 позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры".
Состав набора
Кат. №
Кол-во реакций по 50 мкл
HS-Taq Color (2х)
50 мМ MgCl2
Вода
1961.0200
200
4 х 1.25 мл
1 х 1 мл
4 х 1.25 мл
1961.1020
1020
17 х 1.5 мл
2 х 1.8 мл
Состав экстра-микса HS-Taq Color (2х):
100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
100 мM KCl;
0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
4 мМ MgCl₂;
0,06 ед. акт./мкл HS-Taq ДНК-полимеразы;
0,2% Tween 20;
стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы;
красители.
Преимущества использования экстра-микса HS-Taq Color с Taq-полимеразой с "горячим" стартом:
Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
Сокращается время на подготовку реакции.
Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
Возможно использование в широком спектре видов ПЦР.
Возможность ТА клонирования продуктов ПЦР за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.
Удобство нанесения проб на гель после амплификации благодаря высокой плотности смеси и наличию красителя
Область применения:
ПЦР с “горячим” стартом.
Высокопроизводительная ПЦР.
Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
ОТ-ПЦР.
Ограничения к использованию:
Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.о.
Из-за содержания красителя не рекомендуется использовать для ПЦР в режиме реального времени и других приложений, требующих измерения оптической плотности или флуоресценции пробы. Для таких приложений рекомендуется использовать смеси HS-qPCR или HS-qPCR SYBR Blue.
Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.
Срок хранения и транспортировка:
1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Набор реактивов для ПЦР с Taq-ДНК-полимеразой Hot Start содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу и растворы всех необходимых компонентов для проведения стандартной ПЦР c "горячим" стартом (за исключением матрицы ДНК и праймеров). В состав набора входят: раствор HS-Taq ДНК-полимеразы (5 ед. акт./мкл), 5× ПЦР буфер, 50 мМ MgCl2, 50× смесь dNTP и 6× буфер для нанесения на гель. Все реагенты высокого качества и оптимизированы для проведения ПЦР.
HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём 5-минутной инкубации при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5´-3´ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н. и обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи ДНК, поэтому ПЦР-фрагменты пригодны для ТА-клонирования.
5× ПЦР-буфер оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР (не содержит MgCl2). В состав буфера входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl2
и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему «матрица-праймеры», а 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.
Состав набора
Кат. #
HS-Taq ДНК-полимераза, 5 ед. акт./мкл*
5× ПЦР-буфер
50 мМ MgCl2
50× смесь dNTP (10 мМ каждого)
6× буфер для нанесения на гель
Кол-во, ед. акт.
1957.0500
1 × 100 мкл
2 × 1,5 мл
1 × 1 мл
2 × 200 мкл
1 × 1,75 мл
500
1957.2250
3 × 150 мкл
8 × 1,5 мл
2 × 1 мл
4 × 400 мкл
3 × 1.75 мл
2250
* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С.Условия реакции:50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0.25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.
Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.
Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.н.
Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.
Хранение и транспортировка: при -20°С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.
Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start (+MgCl2) содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу и растворы всех необходимых компонентов для проведения стандартной ПЦР c “горячим” стартом (за исключением матрицы ДНК и праймеров). ПЦР-буфер, входящий в состав набора, уже содержит MgCl2
в концентрации 10 мМ, достаточной для постановки большинства рутинных ПЦР.
HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза не активна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём инкубации в течение 5 мин при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.
5× ПЦР-буфер (+MgCl2) оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР. В состав буфера входят MgCl2
(10 мМ) и добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl2
и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему «матрица-праймеры», а 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.
Состав набора
Кат. #
HS-Taq DNA-полимераза, 5 ед. акт./мкл*
5× ПЦР буфер (+MgCl2)
50 мМ MgCl2
50× смесь dNTP (10 мМ каждого)
6×буфер для нанесения на гель
Кол-во, ед. акт.
1958.0500
1 × 100 мкл
2 × 1.5 мл
1 × 1 мл
2 × 200 мкл
1 × 1.5 мл
500
1958.2250
3 × 150 мкл
8 × 1.5 мл
2 × 1 мл
4 × 400 мкл
3 × 1.5 мл
2250
* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С. Условия реакции: 50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.
Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.
Область применения:
ПЦР с “горячим” стартом.
Высокопроизводительная ПЦР.
Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
Вторая стадия ОТ-ПЦР.
Ограничения к использованию:
Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.
Хранение и транспортировка: при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.
Узнать цену
Не рекомендуется использовать для получения ампликонов длиной свыше 5000 п.н. Из-за содержания красителя не рекомендуется для ПЦР в реальном времени и других приложений, требующих измерения флуоресценции; для таких приложений следует использовать экстра-миксы qPCR (2х) и qPCR SYBR Blue (2х).
Получение длинных фрагментов до 25’000 п.н., получение продуктов для ТА-клонирования, амплификация GC-богатых и сложных матриц.
Применение: получение длинных фрагментов до 25 000 п.н., получение продуктов для ТА-клонирования, амплификация GC-богатых и сложных матриц. Из-за содержания инертного красителя смесь не рекомендуется использовать для ПЦР в реальном времени и других приложений, требующих измерения флуоресценции; для таких приложений необходимо использовать смесь qPCR (2х) и qPCR SYBR Blue (2х).
Узнать цену
Из-за содержания инертного красителя смесь не рекомендуется использовать для ПЦР в реальном времени и других приложений, требующих измерения флуоресценции; для таких приложений использовать смесь qPCR (2х) и qPCR SYBR Blue (2х).
Количественная ПЦР в реальном времени с детекцией продукта с помощью флуоресцентных зондов или интеркалирующего красителя SYBR Green I
Экстра-миксы diaGene — это готовые 2х смеси для ПЦР; содержат в одной пробирке все необходимые для постановки ПЦР компоненты (кроме матрицы и праймеров): термофильную ДНК-полимеразу, буфер, dNTP.
Область применения: ПЦР в режиме реального времени с использованием интеркалирующего красителя SYBR Green I, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, генотипирование; идеально подходит для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, StepOne Plus.
Экстра-микс HS-qPCR SYBR Blue предназначен для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени с использованием флуоресцентного красителя SYBR Green I и представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР в режиме реального времени (исключая ДНК-матрицу и праймеры):
высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с "горячим" стартом,
смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов,
ПЦР-буфер,
Mg2+ (3 мМ),
интеркалирующий краситель SYBR Green I
инертный краситель
Экстра-микс HS-qPCR SYBR Blue оптимизирован для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР, а также вещества, влияющие на температуру отжига праймеров и характеристики плавления матрицы, что позволяет повысить специфичность ПЦР и использовать матрицы со сложной пространственной структурой. Инертный краситель в составе Экстра-микса HS-qPCR SYBR Blue окрашивает его в голубой цвет (максимум поглощения – 615 нм) и облегчает контроль за раскапыванием смеси при использовании многолуночных планшетов.
SYBR Green I - флуоресцентный интеркалирующий краситель для количественной и качественной детекции продуктов в ходе ПЦР в режиме реального времени. SYBR Green I обеспечивает простой и экономичный вариант для детекции и количественного определения ПЦР-продуктов без необходимости использования специфичных флуоресцентных зондов. В ходе амплификации краситель SYBR Green I встраивается в малую бороздку ДНК ПЦР-продуктов и испускает более сильный по сравнению с несвязанным красителем флуоресцентный сигнал. Максимумы поглощения и испускания SYBR Green I - 494 нм и 521 нм соответственно, что позволяет использовать его со всеми известными на сегодняшний день амплификаторами для проведения ПЦР в режиме реального времени.
HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при комнатной температуре. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при 95 °С в течение 5 мин. П Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.
Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl₂ и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl₂ позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры". Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования.
Состав Экстра-микса HS-qPCR SYBR Blue:
100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
100 мM KCl;
0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
3 мМ MgC₂;
0,06 ед. акт./мкл Taq ДНК-полимеразы;
0,025 % Tween 20;
стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы;
SYBR Green I;
инертный краситель.
Состав набора
Кат. №
Кол-во реакций по 50 мкл
HS-Taq qPCR SYBR Blue(2х)
50 мМ MgCl₂
Вода
1974.0200
200
4 х 1,25 мл
1 х 1 мл
4 х 1,25 мл
1974.1020
1020
17 х 1,5 мл
2 х 1,8 мл
Преимущества использования экстра-микса:
Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
Сокращается время на подготовку реакции.
Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
Инертный краситель облегчает пробоподготовку при постановке ПЦР.
Область применения:
ПЦР в режиме реального времени с использованием интеркалирующего красителя SYBR Green I.
Обычная ПЦР.
Ограничения к использованию:
Не рекомендуется использовать для ПЦР в реальном времени с флуоресцентно-меченными зондами. Для таких приложений следует использовать Экстра-микс HS-qPCR (2×).
Срок хранения и транспортировка:
1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Реакционная смесь, содержащая Taq ДНК-полимеразу с «горячим» стартом, для проведения ПЦР в режиме реального времени с флуоресцентными зондами.
Набор содержит реакционную смесь HS-qPCR (2×) и стерильную воду. Реакционная смесь HS-qPCR (2×) предназначена для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени c использованием флуоресцентно-меченых зондов.
В состав реакционной смеси HS-qPCR (2×) входят все необходимые компоненты ПЦР (исключая ДНК-матрицу, праймеры и зонд): HS-Taq ДНК-полимераза, смесь dNTP, 2×ПЦР-буфер, Mg²⁺.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением олигонуклеотидных зондов; обычная ПЦР; высоковоспроизводимая ПЦР; мультиплексная ПЦР; генотипирование.
Хранение: в защищённом от света месте при +25 °С – 7 дней; при +4 °С – 4 месяца; при -20°С – 18 месяцев; не более 50 циклов замораживания-размораживания.
Транспортировка: при 0 - +4 °С, допускается транспортировка при комнатной температуре до 3-х дней.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением олигонуклеотидных зондов, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР,
генотипирование; для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7500, 7500.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением флуоресцентно-меченных зондов и нормировкой данных по сигналу ROX, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, мультиплексная ПЦР, генотипирование. Смесь подходит для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, StepOne Plus.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением флуоресцентно-меченных зондов и нормировкой данных по сигналу ROX,
обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, мультиплексная ПЦР, генотипирование; для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному
красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7500, 7500 Fast, ViiA 7, QuantStudio 12K; Stratagene Mx4000, Mx3005P, Mx3000P.
Область применения: ПЦР в режиме реального времени с применением олигонуклеотидных зондов, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, мультиплексная ПЦР, генотипирование.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением флуоресцентно-меченных зондов и нормировкой данных по сигналу
ROX, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, мультиплексная ПЦР, генотипирование. Смесь подходит для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию
сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, StepOne Plus.
Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением флуоресцентно-меченных зондов и нормировкой данных по сигналу ROX, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР, мультиплексная ПЦР, генотипирование; для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7500, 7500 Fast, ViiA 7, QuantStudio 12K; Stratagene Mx4000, Mx3005P, Mx3000P.
Узнать цену
В состав некоторых экстра-миксов кроме обычных компонентов, включен пассивный краситель ROX для нормализации сигнала или урацил-ДНК-гликозилаза с дУТФ для снижения риска контаминации.
Ферменты diaGene для синтеза и модификации нуклеиновых кислот
Термостабильные ДНК-полимеразы: Taq — обычная и с «горячим стартом», Pfu ДНК-полимераза и высокопроцессивная PFHP-полимераза — предназначены для проведения высокоточной ПЦР, клонирования, ПЦР с GC-богатыми матрицами, ПЦР длинных фрагментов, мутагенеза и микрочипа ПЦР; менее чувствительны к различным составам ПЦР буфера.
Обратные транскриптазы, активные при различных температурах, предназначены для синтеза ДНК на основе РНК-матриц.
ДНК-лигаза Т4 и полинуклеотидкиназа Т4 используются в генной инженерии: ДНК-лигаза фага Т4 сшивает как липкие, так и тупые концы, полинуклеотидкиназа фага Т4 используется для введения радиоактивной метки в НК для получения радиоактивных меток и для секвенирования.;
ДНК-зависимая РНК-полимераза Т7 предназначена, в первую очередь, для транскрипции in vitro.
Все ферменты рекомбинантные, продуцируются в клетках E.coli; поставляются с соответствующим буфером.
Буфер хранения:
50 мМ Трис-HCl, pH 8,0 (при 25°С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 1 % Тритон Х-100.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74°С.
Условия реакции:
50 мМ трис-HCl, pH 9,0 (при 25° С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl2, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.
Урацил-ДНК-гликозилаза (UDG) эффективно гидролизует урацил из одно- и двуцепочечных ДНК, но не из олигомеров, оптимальная температура – 37 °С,
хранение при -20 °С, срок хранения 2 года.
Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli.
Буфер хранения: 20 мМ трис-HCl рН 8,2, 50 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ; 0,1 мг/мл БСА, 50% глицерина.
Хранить при -20 °С.
Условия реакции:
20 мМ трис-HCl рН 8,2, 1 мМ ЭДТА, 10 мМ NaCl.
Определение единицы активности: за 1 единицу приняли количество фермента, необходимое для высвобождения 60 пмолей урацила за 1 минуту из двуцепочечной урацил-содержащей ДНК при 37 °С.
Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli, не содержит доменa РНКазы Н Буфер хранения:
50 мМ трис-HCl, pH 8,0 (при 25°C ), 100 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 0,1 % NP-40. Условия определения активности:
50 мМ трис-HCl, pH 8,3 (при 25°С), 40 мМ KCl, 6 мМ KCl, 50 мM [3H] dTTP, 1 мМ дитиотрейтол, poly А 2 А260/мл, 2 мкМ d(pT)12, 100 мкг/мл БСА. Определение активности:
За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при 37°С. Хранение и транспортировка: -20°С
Область применения: синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени, синтез кДНК для клонирования, получение меченых кДНК-зондов для микрочипов (microarray), мечение ДНК, анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.
Полинуклеотидканаза катализирует перенос фосфата от АТФ на 5’ конец ДНК или РНК, используется для концевого мечения НК, фосфорилирования праймеров, удаления 3’- фосфорильных групп. Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli.
Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7,4, 50 мМ KCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ, 50% глицерин.
Условия определения активности: 70 мМ трис-HCl рН 7,6, 10 мМ MgCl2, 5 мМ ДТТ, 66 мкМ [g32Р] АТФ, 20 мкМ 18-20-мерный гетеродезоксиолигонуклеотид.
Определение единицы активности:
Одна единица активности соответствует количеству фермента, катализирующему включение 1 нмоль [32Р] в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37 °С.
Хранение и транспортировка при -20 °С.
Узнать цену
Трифосфаты
Широкий выбор стандартных дезоксинуклеозидтрифосфатов (dNTP) и нуклеозидтрифосфатов (NTP), а также их модифицированных форм; в водном растворе или в ТЕ-буфере в виде солей K⁺, Li⁺, Na⁺, NH₄⁺ (по выбору); как по отдельности, так и в наборах по четыре.
Каждый трифосфат поставляется в отдельной пробирке, свободен от примесей эндо-, экзонуклеаз, рибонуклеаз, фосфатаз, следовых количеств ДНК и нуклеотидов, протестирован in vitro; допускается многократное размораживание/замораживание.
Нуклеозидтрифосфаты и дезоксинуклеозидтрифосфаты синтезированы химическим путем и очищены ионнообменной хроматографией; стандартные нуклеозидтрифосфаты используются как компоненты буферных растворов и реакционных смесей, в качестве субстрата в реакции матричного синтеза ДНК (ПЦР или секвенирование) и РНК.
Модифицированные нуклеозидтрифосфаты используются в качестве терминирующих аналогов трифосфатов при секвенировании, для ферментативного непрямого нерадиоактивного мечения РНК/ДНК, например, введения флуоресцентной метки в ДНК, для исследования взаимодействий полимераза-субстрат и других молекулярно-биологических задач.
Трифосфаты (NTP) и дезокситрифосфаты (dNTP)
Чистота препарата — не менее 99% (по ВЭЖХ), растворы в ТЕ-буфере или в воде; представлены аммонийные соли, растворы калийной, литиевой или натриевой соли — по запросу.
Каждый нуклеозид-5’-трифосфаты поставляется в отдельной пробирке, свободен от примесей эндо-, экзонуклеаз, рибонуклеаз, фосфатаз, следовых количеств ДНК и нуклеотидов, протестирован in vitro.
Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.
Каждый нуклеозид-5’-трифосфаты поставляется в отдельной пробирке, свободен от примесей эндо-, экзонуклеаз, рибонуклеаз, фосфатаз, следовых количеств ДНК и нуклеотидов, протестирован in vitro.
Условия хранения: -20 °С, допускается
многократное размораживание или замораживание.
Поставляются в виде 100 мМ раствора в воде как наборами по 4 нуклеотида, так и по отдельности, нуклеотиды очищены ионнообменной колоночной хроматографией.
Условия хранения: -20 °С, допускается транспортировка в температуре окружающей среды.
100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).
Узнать цену
Терминирующие аналоги dNTP для секвенирования
Чистота — не менее 96% (по ВЭЖХ), водные растворы аммонийной соли; растворы триэтиламмонийной, литиевой или натриевой соли — по запросу; морфолиновые трифосфаты — литиевые соли.
5-[N-(N-биотинил- e- аминокапроил) -3- аминоаллил] -2’-дезоксиуридин -5’-трифосфат (Био-11-dUTP) широко используется для нерадиоактивного мечения ДНК.
Био-11-dUTP ферментативно вводится в ДНК посредством ник-трансляции, методом random priming, мечением 3’-конца или с помощью ПЦР.
Число "11" означает количество атомов углерода в цепочке между dUTP и биотином. Длина "11" оптимальна для большинства приложений.
Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.
5-{(7-N-(6-N-(биотинил)аминокапроил) -амино-4-окса-гепт-1-инил)-2’-дезоксицитидин-5’-трифосфат (Био-15-dCTP) широко используется для нерадиоактивного мечения ДНК.
Био-11-dCTP ферментативно вводится в ДНК посредством ник-трансляции, методом random priming, мечением 3’-конца или с помощью ПЦР.
Число "15" означает количество атомов углерода в цепочке между dCTP и биотином. Длина "15" оптимальна для большинства приложений.
Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.
Реагент для непрямого ферментативного нерадиоактивного мечения ДНК. BrdUTP используется для включения в ДНК для последующей детекции с помощью анти-BrdU антител.
Включение BrdUTP в ДНК также является средством внечения случайных мутаций.
Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.
ДНК-маркеры diaGene: размер от 24 до 10 000 п.н., шаг — линейный от 50 до 250 п.н. или нелинейный. Фрагменты ДНК, входящие в состав маркера, визуализируются в электрофоретическом геле при помощи окрашивания интеркалирующими агентами: бромистым этидием и SYBR Green (см. Некоторые реактивы для молекулярной биологии); для удобства визуализации некоторые фрагменты даны в удвоенной концентрации. Формы выпуска:
ДНК-маркеры-концентраты — требуют разведения в буфере для нанесения.
ДНК-маркеры, готовые к применению — в буфере для нанесения с красителем и утяжеляющим агентом.
Буферы для нанесения и хранения образцов: Буфер 24 (два красителя) и Буфер 25 (три красителя).
Маркер молекулярного веса ДНК содержит 8 фрагментов от 250 до 3000 п.н.; фрагменты 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500 и 3000 п.н.; концентрация ДНК-маркера — 0,1 мг/мл; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 2 мкл; условия хранения: -20 °C.
Маркер молекулярного веса ДНК содержит 13 фрагментов от 250 до 10000 п.н.; фрагменты: 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 4000, 5000, 6000, 8000, 10000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 250, 500, 1000, 3000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 2 мкл; условия хранения: -20 °C.
хранение -20°C, транспортировка комнатная температура
330, руб.
330, руб. RUB
Буфер для хранения и нанесения образцов, содержит 2 красителя для оценки подвижности в геле,
состав: 12,5 % глицерин, 0,008% бромфеноловый синий, 0,008% ксиленцианол, 5 мМ ЭДТА, 10 мМTris-HCl (pH 8,0).
Буфер для хранения и нанесения образцов, содержит 3 красителя для оценки подвижности в геле,
состав: 60 % глицерин, 0,003%
бромфеноловый синий, 0,003% ксиленцианол, 0,15% оранжевый G, 60 мМ ЭДТА, 10 мМTris-HCl (pH 7,6).
имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 200, 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле;
предварительно смешан с буфером для нанесения;
условия хранения — -20 °C.
Узнать цену
Репликаторы diaGene
Репликаторы diaGene специально сконструированы для удобного ручного переноса микрокапель/микроколоний одновременно 28–384 образцов в дочерние микропланшеты, на мембраны, на жидкие и агаризованные среды. Все модели имеют подвижные пины (кроме модели # 3183), что обеспечивает безопасный и надежный перенос (труднее повредить поверхность агара или мембраны); объем капли — от 0,07 до 3,0 мкл. Выбор по диаметру, длине пинов, а также по форме окончания позволяет подобрать репликатор под большинство задач.
Применение:
тиражирование плазмидных, космидных, BAC и YAC библиотек;
мутантых штаммов, рекомбинантных клонов;
проведение теста на чувствительность к антибиотикам;
перенос антител, антигенов, антибиотиков, кДНК, ДНК, РНК, олигонуклетидов, продуктов ПЦР, растворов химических соединений;
классификация штаммов бактерий по чувствительности к бактериофагам; гибридизации колоний.
Предназначены для работы с 96-ти луночными планшетами, при этом могут быть использованы совместно как со стандартными низкопрофильными, так и высокопрофильными планшетами (2000 мкл); стерилизация в пламени горелки или в автоклаве.
Материал – нержавеющая сталь и алюминий с защитным покрытием;
жесткое крепление элементов переноса (пинов) к несущей платформе (неподвижные пины);
количество пинов, шт. – 96;
длина пина, мм – 50;
диаметр пина, мм – 2;
окончание пина – полусфера, обеспечивающая перенос около 0,2 мкл ± 5% воды на гидрофильную поверхность и около 0,07 мкл на гидрофобную поверхность.
Матричная плашка имеет 144 лунки с d 6 мм и глубиной 11 мм, стерилизуется автоклавированием.
С данной матричной плашкой может быть использован репликатор с подвижными пинами для 96-ти луночных планшет, обеспечивающий полный перенос из планшета за два подхода.