Продукция для работ с нуклеиновыми кислотами diaGene

Наборы предназначены для выделения геномной ДНК из зелёных частей растений. Параллельно с геномной ДНК растения происходит выделение геномной бактериальной и вирусной ДНК, что удобно при анализе инфицированности растения.

Очистка ДНК на микроколонках diaGene начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.

Сорбент позволяет выделять до 15 мкг геномной ДНК.

Все реагенты хранятся при комнатной температуре (+15-25 °С).

Набор diaGene для выделения ДНК из растительной ткани, Диаэм, русск., 4 стр.pdf

Состав набора:

	50 выделений	250 выделений
	Кат.№ 3361.0050	Кат.№ 3361.0250
Лизис-буфер LBB	5 мл	25 мл
Раствор для сорбции	14 мл	70 мл
Раствор для промывки 1	40 мл	2 х 100 мл
Раствор для промывки 2 (концентрат)	18 мл	3 х 30 мл
Протеиназа К	2 мг	5 x 2 мг
Микроколонки	50 шт.	250 шт.
2 мл пробирки для сбора фильтрата	50 шт.	250 шт.

Методика рассчитана на выделение ДНК из 100 мкл цельной крови, стабилизированной ЭДТА. Объём образца может варьировать от 50 до 200 мкл. При этом объёмы Буфера LBB, Протеиназы К и Раствора для сорбции должны быть изменены пропорционально.

Дополнительное оборудование и реагенты:

• твердотельный термостат, желательно с функцией перемешивания;
• микроцентрифуга для пробирок типа эппендорф ёмкостью 1,5-2 мл с максимальной скоростью центрифугирования не менее 13000 об/мин;
• дозаторы переменного объёма и наконечники с фильтрами к ним;
• стерильные пробирки типа эппендорф ёмкостью 1,5 мл, свободные от нуклеаз;
• 96% этанол;
• буфер PBS (для выделения ДНК из лейкоцитарного осадка);
• деионизованная автоклавированная вода или вода, свободная от нуклеаз.

Перед началом работы:

• добавьте 96% этанол в Раствор для промывки 2 (42 мл для 50 выделений, 70 мл в каждый флакон для 250 выделений) и тщательно перемешайте;
• растворите Протеиназу К в деионизованной воде (2 мг в 110 мкл, 10 мг в 520 мкл). Рекомендуется расфасовать раствор Протеиназы К на аликвоты по 20-50 мкл;
• возможно выпадение осадка в Растворе для сорбции. Для растворения осадка перед использованием необходимо прогреть раствор в течение 5-10 минут при +55 ^°С. Не нагревать свыше +65 ^°С!
• во избежание загрязнения образцов не рекомендуется сливать фильтрат через край. Для удаления фильтрата используйте автоматическую пипетку или аспиратор;
• для перевода значения скорости центрифугирования из об/мин в g воспользуйтесь специальными таблицами.

Выделение геномной ДНК из цельной крови

1. К 100 мкл образца добавьте 100 мкл Лизис-буфера LBB, тщательно перемешайте.
2. Добавьте 2 мкл раствора Протеиназы К, тщательно перемешайте и инкубируйте в термостате с перемешивание при 350-400 об/мин при +56 ^°С 30 минут. Если термостат без перемешивания - периодически встряхивайте пробирки.
3. Добавьте 280 мкл Раствора для сорбции и перемешайте на вортексе.
4. Внесите в колонку 100 мкл Раствора для промывки 1 (это не обязательно, но повышает эффективность сорбции) и выделяемый образец (не более 550 мкл). Центрифугируйте 2 минуты при 10000g. Необходимо учитывать, что объём колонки составляет 650 мкл. Если объём образца превышает 650 мкл, последовательно нанести образец на колонку, удаляя каждый раз фильтрат из пробирки для сбора фильтрата.
5. Нанесите на фильтр колонки 300 мкл Раствора для промывки 1 и центрифугируйте 2 минуты при 10000g. Удалите фильтрат.
6. Повторите п. 5.
7. Нанесите на фильтр колонки 500 мкл Раствора для промывки 2 и центрифугируйте 1 минуту при 12500-13000g.. Удалите фильтрат.
8. Повторите п. 7.
9. Поместите микроколонку в ту же пробирку и центрифугируйте 1 минуту при 12500-13000g для удаления остатков раствора.
10. Поместите микроколонку в новую 1,5 мл пробирку. Нанесите в центр мембраны 50 мкл деионизованной воды и подождите 1-3 минуты. Минимальный объём воды для элюции — 30 мкл, максимальный — 100 мкл. При элюции 30 мкл достигается максимальная концентрация ДНК, при элюции 100 мкл — максимальный выход.
11. Элюируйте ДНК центрифугированием в течение 1 мин при 12500-13000g. В среднем из 100 мкл человеческой крови выделяется от 0,5 до 2 мкг геномной ДНК. Ёмкость колонки составляет до 20 мкг ДНК. Для получения большего количества геномной ДНК рекомендуется выделение из лейкоцитарного осадка.

Состав набора:

	50 выделений Кат.№ 3316.0050	250 выделений Кат.№ 3316.0250
Буфер R	12 мл	60 мл
Буфер L	12 мл	60 мл
Буфер N	12 мл	60 мл
Буфер W	8 мл	3 х 15 мл
Буфер E	5 мл	25 мл
РНКаза А	120 мкл	600 мкл
Микроколонки	50 шт	5 х 50 шт
Пробирки для сбора фильтрата	50 шт	5 х 50 шт

Принцип действия

Набор предназначен для выделения до 25 мкг плазмидной ДНК длиной до 20 т.п.н. из 3-5 мл бактериальной культуры. Очистка ДНК на колонках diaGene происходит за счёт избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК.

Выход ДНК зависит от ряда факторов: копийности плазмиды, условий роста, объёма культуры и т.д.

Не рекомендуется использовать для выделения плазмид длиной свыше 50 тысяч пар нуклеотидов, а также для получения препарата плазмидной ДНК для трансфекции эукариотических клеток.

Срок годности и особенности хранения:

• Все реактивы (кроме РНКазы А) и колонки хранить при комнатной температуре (+15...25 °С).
• РНКазу А хранить при -20 °С.
• Буфер R после добавления РНКазы хранить при +2...8°С.
• После использования пакет с колонками рекомендуется плотно закрывать
• Срок годности: 12 месяцев с даты изготовления.
• При транспортировке особые условия не требуются.

Дополнительное оборудование и реагенты:

• Микроцентрифуга для пробирок типа эппендорф ёмкостью 1,5-2 мл с максимальной скоростью центрифугирования не менее 12500 g;
• дозаторы переменного объёма и наконечники с фильтрами к ним;
• стерильные пробирки типа эппендорф ёмкостью 1,5 мл, свободные от нуклеаз;
• 96 % этанол;
• деионизованная автоклавированная вода или вода, свободная от нуклеаз.

Выделение плазмидной ДНК из бактерий

Перед началом работы добавьте 8 мл 96 % этанола в Буфер W, а также РНКазу А в Буфер R. При нерегулярном использовании набора рекомендуется отбирать нужное количество Буфера R и добавлять к нему 1/100 объёма РНКазы А. Для перевода значения скорости центрифугирования из об/мин в g воспользуйтесь специальными таблицами.

1. Осадите бактериальные клетки из 3-5 мл культуры в 1,5 мл пробирке центрифугированием при 1000g в течение 10 минут.
2. Тщательно ресуспендируйте клетки в 200 мкл Буфера R с РНКазой.
3. Добавьте 200 мкл Буфера L и осторожно перемешайте. Лизат должен стать прозрачным и вязким. Не перемешивать на вортексе и не встряхивать, так как это может привести к разрыву геномной ДНК и загрязнению конечного препарата.
4. Добавьте 200 мкл буфера N и тщательно перемешайте до образования белого осадка.
5. Центрифугируйте 10 минут при 10000 g.
6. Поместите микроколонку в 2 мл пробирку для сбора фильтрата. Перенесите супернатант в микроколонку и центрифугируйте 1 мин при 12500-13000g.
7. Вылейте фильтрат, поместите микроколонку в ту же пробирку и нанесите 650 мкл Буфера W. Центрифугируйте 1 мин при 12500-13000g.
8. Вылейте фильтрат, поместите микроколонку в ту же пробирку и центрифугируйте 1 мин при 13000 об/мин, чтобы удалить остатки Буфера W.
9. Поместите микроколонку в новую 1,5 мл пробирку. Нанесите в центр мембраны 50-100 мкл Буфера Е и подождите 1 мин. Вместо буфера Е для элюции также можно использовать воду, свободную от нуклеаз, или деионизованную автоклавированную воду. Минимальный объём элюента – 30 мкл, максимальный – 150 мкл. При элюции 30 мкл достигается максимальная концентрация ДНК, при элюции 150 мкл – максимальный выход.
   
10. Элюируйте ДНК центрифугированием в течение 1 мин при 12500-13000g.

Возможные проблемы и методы их решения

Проблема	Причина	Решение
Мало ДНК на выходе	Слишком много бактерий	Уменьшить объём культуры. Рекомендуется начинать с 3 мл культуры
	Неполный лизис	Ресуспендировать осадок более тщательно до полного разрушения бактериальных сгустков
	Неполная нейтрализация после лизиса	Тщательно перемешивать после добавления Буфера N
	Перед стадией элюции не полностью удалены остатки Буфера W	Обратить внимание на пункт o дополнительном центрифугировании
Загрязнение геномной ДНК	Слишком интенсивное перемешивание после добавления Буфера N	Перемешивать аккуратно, переворачиванием пробирки
Загрязнение низкомолекулярными примесями (А260/230 < 1,8-2)	Неполная нейтрализация буфером N или примесь осадка в посадке на колонку «Перерастание» бактериальной культуры	После центрифугирования лизата (п.5) отберите супернатант и центрифугируйте его ещё раз Подбор оптимальных условий роста (не более 18 часов)

Состав набора:

	50 выделений Кат.№ 3325.0050	250 выделений Кат.№ 3325.0250
Буфер Y	18 мл	2 х 45 мл
Буфер W	8 мл	3 х 15 мл
Буфер E	5 мл	25 мл
Микроколонки	50 шт.	5 х 50 шт.
2 мл пробирки для сбора фильтрата	50 шт.	5 х 50 шт.

Набор предназначен для очистки ДНК из реакционных смесей после ПЦР, лигирования, рестрикции и т.д. Очистка ДНК происходит за счёт избирательного связывания с сорбентом колонок на основе диоксида кремния. Фрагменты двцхцепочечной ДНК длиной свыше 50 п.н. сорбируются на мембрану колонки в присутствии хаотропного агента, а примеси (нуклеотидтрифосфаты, одноцепочечные олигонуклеотиды, соли и т.д.) оказываются в проскоке. Чистая ДНК элюируется буфером или деионизованной водой.

Ёмкость колонки составляет до 25 мкг ДНК, но зависит от состава наносимого на колонку препарата и от длины фрагментов ДНК.

Буфер Y содержит в своем составе индикатор кислотности. Эффективность сорбции ДНК зависит от рН (связывание ДНК с сорбентом происходит при рН < 7.5). При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера Y, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл 3М ацетата Na (pH 5.0).

Проблема	Возможная причина	Решение
Мало ДНК на выходе	рН раствора не оптимален для связывания ДНК с сорбентом	Обратить внимание на цвет индикатора. Если он отличается от жёлтого - добавить 10 мкл 3М ацетата натрия, рН 5.0
	Перед стадией элюции не полностью удалены остатки Буфера W	Обратить внимание на пункт о дополнительном центрифугировании

Набор предназначен для элюции и очистки фрагментов ДНК из легкоплавкого агарозного геля после электрофоретического разделения. С помощью набора можно элюировать ДНК из ТАЕ- или ТВЕ-геля, процесс прост и занимает не более 15-20 минут. После отмывки от примесей чистый препарат ДНК элюируется с колонки.

Полученный препарат ДНК может использоваться для рестриктазного расщепления, лигирования, секвенирования и др.

Ёмкость колонки diaGene составляет до 25 мкг ДНК.

Буфер для сорбции М содержит в своем составе индикатор кислотности. Эффективность сорбции ДНК зависит от рН (связывание ДНК с сорбентом происходит при рН < 7,5). При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу

	50 выделений Кат.№ 3326.0050	250 выделений Кат.№ 3326.0250
Буфер М	35 мл	2 x 75 мл
Буфер W	8 мл	3 х 15 мл
Буфер Е	5 мл	25 мл
Микроколонки	50 шт.	5 x 50 шт.
2 мл пробирки для сбора фильтрата	50 шт.	5 x 50 шт.

Срок годности и особенности хранения:

• все реактивы и колонки хранить при комнатной температуре (+15...25 °С);
• после использования пакет с колонками рекомендуется плотно закрывать;
• срок годности: 12 месяцев с даты изготовления;
• при транспортировке особые условия не требуются.

Дополнительное оборудование и реагенты:

• твердотельный термостат, желательно с функцией перемешивания;
• микроцентрифуга для пробирок типа эппендорф ёмкостью 1,5-2 мл с максимальной скоростью центрифугирования не менее 13000 об/мин;
• дозаторы переменного объёма и наконечники с фильтрами к ним;
• стерильные пробирки типа эппендорф ёмкостью 1,5 мл, свободные от нуклеаз;
• 96% этанол;
• 3М раствор ацетата натрия рН 5,0;
• опционально — деионизованная автоклавированная вода или вода, свободная от нуклеаз.

Элюция ДНК из агарозного геля

Перед началом работы добавьте 96% этанол в Буфер W (32 мл для 50 выделений, 60 мл в каждый флакон для 250 выделений), тщательно перемешайте.

1. Вырежьте скальпелем фрагмент геля, содержащий необходимый фрагмент ДНК.
2. Взвесьте фрагмент геля в 1,5 мл пробирке и добавьте Буфер М из расчёта 300 мкл Буфера М на 100 мг геля.
3. Инкубируйте при 50 °С, периодически перемешивая, до полного растворения геля (не более 10 мин).
4. Поместите микроколонку в 2 мл пробирку для сбора фильтрата. Перенесите полученный раствор (но не более 650 мкл) в микроколонку и центрифугируйте 1 мин при 13000 об/мин. Если объем раствора превышает объем колонки (650 мкл), его можно наносить последовательно, удаляя всякий раз фильтрат.
5. Вылейте фильтрат, поместите микроколонку в ту же пробирку и нанесите 650 мкл Буфера W. Центрифугируйте 1 мин при 13000 об/мин.
6. Вылейте фильтрат, поместите микроколонку в ту же пробирку и центрифугируйте 1 мин при 13000 об/мин, чтобы удалить остатки Буфера W.
7. Поместите микроколонку в новую 1,5 мл пробирку. Нанесите в центр мембраны 30-50 мкл Буфера Е и подождите 1 мин. Элюируйте ДНК центрифугированием в течение 1 мин при 13000 об/мин. Также для элюции можно использовать воду, свободную от нуклеаз. Минимальный объём элюции — 30 мкл.

Возможные проблемы и методы их решения

Проблема	Причина	Решение
Мало ДНК на выходе	рН раствора не оптимален для связывания ДНК с сорбентом	Обратить внимание на цвет индикатора. Если он отличается от желтого, добавить 10 мкл 3М ацетата Na (рН 5,0)
	Перед стадией элюции не полностью удалены остатки Буфера W	Обратить внимание на пункт o дополнительном центрифугировании
	Гель растворен не полностью	Инкубировать при 50 °C 10 минут, перемешивая каждые 2-3 минуты

Силикатный магносорбент для выделения ДНК/РНК на магнитном штативе (сепараторе).

Состав: суспензия микрогранул силикагеля, содержащих парамагнитные нанокристаллы магнетита /маггемита, в солевом растворе (0,5 М NaCl, 0,05 % NaN₃).

Силикатный магносорбент для выделения ДНК/РНК на магнитном штативе (сепараторе).

Состав: суспензия микрогранул силикагеля, содержащих парамагнитные нанокристаллы магнетита /маггемита, в солевом растворе (0,5 М NaCl, 0,05 % NaN₃).

Силикатный магносорбент для выделения ДНК/РНК на магнитном штативе (сепараторе).

Состав: суспензия микрогранул силикагеля, содержащих парамагнитные нанокристаллы магнетита /маггемита, в солевом растворе (0,5 М NaCl, 0,05 % NaN₃).

Набор реактивов для ПЦР с Taq-ДНК-полимеразой Hot Start содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу и растворы всех необходимых компонентов для проведения стандартной ПЦР c "горячим" стартом (за исключением матрицы ДНК и праймеров). В состав набора входят: раствор HS-Taq ДНК-полимеразы (5 ед. акт./мкл), 5× ПЦР буфер, 50 мМ MgCl₂, 50× смесь dNTP и 6× буфер для нанесения на гель. Все реагенты высокого качества и оптимизированы для проведения ПЦР.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём 5-минутной инкубации при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5´-3´ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н. и обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи ДНК, поэтому ПЦР-фрагменты пригодны для ТА-клонирования.

5× ПЦР-буфер оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР (не содержит MgCl₂). В состав буфера входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl₂ и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему «матрица-праймеры», а 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.

Состав набора

Кат. #	HS-Taq ДНК-полимераза, 5 ед. акт./мкл*	5× ПЦР-буфер	50 мМ MgCl2	50× смесь dNTP (10 мМ каждого)	6× буфер для нанесения на гель	Кол-во, ед. акт.
1957.0500	1 × 100 мкл	2 × 1,5 мл	1 × 1 мл	2 × 200 мкл	1 × 1,75 мл	500
1957.2250	3 × 150 мкл	8 × 1,5 мл	2 × 1 мл	4 × 400 мкл	3 × 1.75 мл	2250

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С.Условия реакции:50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [³H] dTTP, 0.25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.

5× ПЦР-буфер:
50 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С), 250 мM KCl, 0.5% (v/v) Tween 20, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы.

Область применения:

• ПЦР с “горячим” стартом.
• Высокопроизводительная ПЦР.
• Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
• Наработка ПЦР-продуктов для ТА-клонирования.
• Вторая стадия ОТ-ПЦР.

Ограничения к использованию:

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.н.
  

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Хранение и транспортировка: при -20°С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.

1957_ Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start, инструкция, Диаэм, русск., 4 стр.

Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start (+MgCl₂) содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу и растворы всех необходимых компонентов для проведения стандартной ПЦР c “горячим” стартом (за исключением матрицы ДНК и праймеров). ПЦР-буфер, входящий в состав набора, уже содержит MgCl₂ в концентрации 10 мМ, достаточной для постановки большинства рутинных ПЦР.

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза не активна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём инкубации в течение 5 мин при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

5× ПЦР-буфер (+MgCl₂) оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР. В состав буфера входят MgCl₂ (10 мМ) и добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl₂ и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему «матрица-праймеры», а 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.

Состав набора

Кат. #	HS-Taq DNA-полимераза, 5 ед. акт./мкл*	5× ПЦР буфер (+MgCl2)	50 мМ MgCl2	50× смесь dNTP (10 мМ каждого)	6×буфер для нанесения на гель	Кол-во, ед. акт.
1958.0500	1 × 100 мкл	2 × 1.5 мл	1 × 1 мл	2 × 200 мкл	1 × 1.5 мл	500
1958.2250	3 × 150 мкл	8 × 1.5 мл	2 × 1 мл	4 × 400 мкл	3 × 1.5 мл	2250

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С. Условия реакции: 50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [³H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.

5× ПЦР буфер (+MgCl₂):
50 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С), 250 мM KCl, 10 мМ MgCl₂, 0.5% (v/v) Tween 20, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы.

Область применения:
ПЦР с “горячим” стартом.
Высокопроизводительная ПЦР.
Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
Вторая стадия ОТ-ПЦР.

Ограничения к использованию:

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
  

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Хранение и транспортировка: при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.

1958_ Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой и 10 мМ MgCl2, инструкция, Диаэм, русск., 4 стр.

Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой Hot Start расширенный содержит рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу, три реакционных буфера (10× ПЦР буфер, 5× Green буфер и 5× GC буфер), а также другие компоненты, необходимые для проведения ПЦР (за исключением матрицы ДНК и праймеров).

HS-Taq ДНК-полимераза представляет собой рекомбинантную Taq ДНК-полимеразу, инактивированную специфическими моноклональными антителами. HS-Taq ДНК-полимераза неактивна при температуре до +70 °С. Это позволяет избежать образования неспецифических продуктов и праймер-димеров при низкой температуре на стадии смешивания компонентов ПЦР-смеси. Активация осуществляется на первом цикле ПЦР путём инкубации в течение 5 мин при +95 °С. Рекомбинантная Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

10× ПЦР буфер оптимизирован для проведения большинства видов ПЦР, в том числе для проведения ПЦР в режиме реального времени с интеркалирующими красителями или флуоресцентными зондами. Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.

5× Green буфер содержит маркерные красители (сине-зелёный и желтый) и добавки, увеличивающие плотность раствора, для удобного нанесения на гель. Предназначен для стандартной ПЦР с оценкой выхода продуктов по конечной точке (методом разделения продуктов в геле). Буфер химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристики плавления матрицы.

5× GC буфер предназначен для амплификации участков ДНК, богатых GC и/или имеющих сложную пространственную структуру. Буфер химически стабилен, содержит вещества, меняющие температуру отжига праймеров и характеристики плавления матрицы.

В состав всех буферов входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР. Все буферы в условиях разбавления до 1× (однократного) содержат 1,5 мМ MgCl₂. Входящие в набор 50 мМ раствор MgCl₂ и 50× смесь dNTP позволяют легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры". 6× Буфер для нанесения на гель облегчает пробоподготовку для электрофореза ПЦР-продуктов и контроль над ходом электрофореза.

Состав набора

Компонент	Кат. #
	1959.0500	1959.2500
HS-Taq DNA-полимераза, 5 ед. акт./ мкл*	1 × 100 мкл	2 × 250 мкл
10× ПЦР буфер	1 × 1.5 мл	3 × 1.8 мл
5× Green буфер	2 × 1.5 мл	5 × 1.8 мл
5× GC буфер	2 × 1.5 мл	5 × 1.8 мл
50 мМ MgCl2	1 × 1 мл	2 × 1 мл
50× смесь dNTP (10 мМ каждого)	2 × 200 мкл	2 × 800 мкл
6× буфер для нанесения на гель	1 × 1 мл	1 × 1.8 мл

* За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74 °С. Условия реакции:50 мМ Трис-HCl, pH 9.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [³H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Буфер для хранения HS-Taq ДНК-полимеразы:
50 мМ Трис-HCl, pH 8.0 (при 25 °С), 50 мМ NaCl, 0.1 мМ ЭДТА, 1мМ дитиотреитол, 50% (v/v) глицерин и 1% (v/v) Тритон Х-100.

10× ПЦР буфер:
100 мM Трис-HCl, рН 8.5 (при 25 °С), 500 мM KCl, 15 мM MgCl₂, 0.5% (v/v) Tween 20, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы.

5× Green буфер:
50 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С), 250 мM KCl, 7,5 мМ MgCl₂, 0.5% (v/v) Tween 20, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы, маркерные красители.

5× GC буфер:
100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С), 250 мM KCl, 7.5 мМ MgCl₂, 0.5% (v/v) Tween 20, ДМСО, стабилизаторы Taq ДНК-полимеразы.

Область применения:

• ПЦР с “горячим” стартом.
• Высокопроизводительная ПЦР.
• Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
• Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
• Вторая стадия ОТ-ПЦР.
• ПЦР GC-богатых и сложно-структурированных участков ДНК.

Ограничения к использованию

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 тыс. п.н.
  

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Хранение и транспортировка: при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год.

1959_Набор реактивов для ПЦР с Taq-полимеразой расширенный, инструкция, Диаэм, русск., 4 стр.

Экстра-микс HS-Taq представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР (исключая ДНК-матрицу и праймеры):

• высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с «горячим» стартом,
• смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов,
• ПЦР-буфер,
• Mg²⁺.

Экстра-микс оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c "горячим стартом"; он химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристик плавления матрицы. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР, и компоненты, увеличивающие плотность пробы для удобства работы с ней. Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования.

Экстра-микс HS-Taq не содержит веществ, мешающих проведению оптического контроля за ходом реакции по изменению флюоресценции пробы.

HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при температуре ниже +70^оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95°С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl₂ и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl₂ позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры".

Состав набора

Кат. №	Кол-во реакций по 50 мкл	HS-Taq (2х)	50 мМ MgCl2	Вода	6× буфер для нанесения на гель
1960.0200	200	4 х 1.25 мл	1 х 1 мл	4 х 1.25 мл	1 х 1 мл
1960.1020	1020	17 х 1.5 мл	2 х 1.8 мл		1 х 1.8 мл

Состав экстра-микса HS-Taq (2х):

• 100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
• 100 мM KCl;
• 0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
• 4 мМ MgCl_2;
• 0,06 ед. акт./мкл HS-Taq ДНК-полимеразы;
• 0,2% Tween 20;
• стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы.

Преимущества использования экстра-микса с Taq-полимеразой с "горячим" стартом:

• Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
• Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
• Сокращается время на подготовку реакции.
• Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
• Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
• Возможно использование в широком спектре видов ПЦР.
• Возможность ТА клонирования продуктов ПЦР за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.

Область применения:

• ПЦР с "горячим" стартом.
• Высокопроизводительная ПЦР.
• Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
• Наработка ПЦР-продуктов для ТА-клонирования.
• Вторая стадия ОТ-ПЦР.

Ограничения к использованию:

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.н.
  

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Срок хранения и транспортировка: 1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания- размораживания.

1960_Экстра-микс для ПЦР HS-Taq, инструкция, Диаэм, русск., 5 стр.

Экстра-микс HS-Taq Color представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР (исключая ДНК-матрицу и праймеры):

• высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с "горячим" стартом;
• смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов;
• ПЦР-буфер;
• Mg^2+;
• красители.

Экстра-микс оптимизирован для проведения эффективной и воспроизводимой ПЦР c “горячим” стартом; он химически стабилен, инертен и не меняет оптимальной температуры отжига праймеров или характеристик плавления матрицы. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР.

Увеличивающие плотность пробы компоненты и красители позволяют наносить реакционную смесь сразу на гель после амплификации для удобства работы с ней.
Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования.
HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при температуре ниже +70^оС. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при +95 °С в течение 5 мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.; она обладает способностью присоединять адениновый остаток к 3’-концу синтезируемой цепи, поэтому продукты ПЦР могут использоваться для ТА-клонирования.

Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl₂ и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl₂ позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры".

Состав набора

Кат. №	Кол-во реакций по 50 мкл	HS-Taq Color (2х)	50 мМ MgCl2	Вода
1961.0200	200	4 х 1.25 мл	1 х 1 мл	4 х 1.25 мл
1961.1020	1020	17 х 1.5 мл	2 х 1.8 мл

Состав экстра-микса HS-Taq Color (2х):

• 100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
• 100 мM KCl;
• 0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
• 4 мМ MgCl₂;
• 0,06 ед. акт./мкл HS-Taq ДНК-полимеразы;
• 0,2% Tween 20;
• стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы;
• красители.

Преимущества использования экстра-микса HS-Taq Color с Taq-полимеразой с "горячим" стартом:

• Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
• Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
• Сокращается время на подготовку реакции.
• Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
• Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
• Возможно использование в широком спектре видов ПЦР.
• Возможность ТА клонирования продуктов ПЦР за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.
• Удобство нанесения проб на гель после амплификации благодаря высокой плотности смеси и наличию красителя

Область применения:

• ПЦР с “горячим” стартом.
• Высокопроизводительная ПЦР.
• Обычная ПЦР с высокой воспроизводимостью.
• Наработка ПЦР-продуктов для ТА клонирования.
• ОТ-ПЦР.

Ограничения к использованию:

• Не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 5 т.п.о.
• Из-за содержания красителя не рекомендуется использовать для ПЦР в режиме реального времени и других приложений, требующих измерения оптической плотности или флуоресценции пробы. Для таких приложений рекомендуется использовать смеси HS-qPCR или HS-qPCR SYBR Blue.

Ингибирование и инактивация
Ингибиторы: ионные детергенты (дезоксихолат натрия, саркозил и додецилсульфат натрия (SDS) в концентрациях выше, чем 0,06, 0,02 и 0,01%, соответственно).
Инактивируется экстракцией смесью фенол/хлороформ.

Срок хранения и транспортировка:
1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

1961_Экстра-микс для ПЦР HS-Taq Color, инструкция, Диаэм, русск., 6 стр.

Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением олигонуклеотидных зондов, обычная ПЦР, высоковоспроизводимая ПЦР,
генотипирование; для амплификаторов, обеспечивающих нормализацию сигнала по пассивному референсному красителю ROX: Thermo Life Technologies (ABI) 7500, 7500.

Экстра-микс HS-qPCR SYBR Blue предназначен для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени с использованием флуоресцентного красителя SYBR Green I и представляет собой 2-кратную реакционную смесь, содержащую все компоненты, необходимые для проведения ПЦР в режиме реального времени (исключая ДНК-матрицу и праймеры):

• высокопроцессивную рекомбинантную HS-Taq ДНК-полимеразу с "горячим" стартом,
• смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов,
• ПЦР-буфер,
• Mg²⁺ (3 мМ),
• интеркалирующий краситель SYBR Green I
• инертный краситель

Экстра-микс HS-qPCR SYBR Blue оптимизирован для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени. В его состав входят добавки, повышающие время полужизни и процессивность HS-Taq ДНК-полимеразы за счет повышения её стабильности во время ПЦР, а также вещества, влияющие на температуру отжига праймеров и характеристики плавления матрицы, что позволяет повысить специфичность ПЦР и использовать матрицы со сложной пространственной структурой. Инертный краситель в составе Экстра-микса HS-qPCR SYBR Blue окрашивает его в голубой цвет (максимум поглощения – 615 нм) и облегчает контроль за раскапыванием смеси при использовании многолуночных планшетов.

SYBR Green I - флуоресцентный интеркалирующий краситель для количественной и качественной детекции продуктов в ходе ПЦР в режиме реального времени. SYBR Green I обеспечивает простой и экономичный вариант для детекции и количественного определения ПЦР-продуктов без необходимости использования специфичных флуоресцентных зондов. В ходе амплификации краситель SYBR Green I встраивается в малую бороздку ДНК ПЦР-продуктов и испускает более сильный по сравнению с несвязанным красителем флуоресцентный сигнал. Максимумы поглощения и испускания SYBR Green I - 494 нм и 521 нм соответственно, что позволяет использовать его со всеми известными на сегодняшний день амплификаторами для проведения ПЦР в режиме реального времени.

HS-Taq ДНК-полимераза, входящая в состав экстра-микса, неактивна при комнатной температуре. Для её активации необходим прогрев реакционной смеси при 95 °С в течение 5 мин. П Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза обладает 5´-3´ ДНК-зависимой полимеразной активностью и 5’-3’ экзонуклеазной активностью нативной Taq ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus. Скорость продвижения Taq ДНК-полимеразы зависит от сложности ДНК-матрицы и составляет примерно 1 т.п.н./мин. Рекомбинантная HS-Taq ДНК-полимераза идеально подходит для стандартной ПЦР с матрицы до 5 т.п.н.

Кроме экстра-микса, в состав набора также включены 50 мМ MgCl_₂ и стерильная вода. Входящий в набор раствор MgCl_₂ позволяет легко оптимизировать реакционную смесь под конкретную систему "матрица-праймеры". Форма реагентов для проведения ПЦР в виде экстра-микса экономит время и снижает вероятность контаминации за счет малого числа шагов пипетирования.

Состав Экстра-микса HS-qPCR SYBR Blue:

• 100 мM Трис-НCl, рН 8.5 (при 25 °С);
• 100 мM KCl;
• 0,4 мМ каждого дезоксинуклеозидтрифосфата;
• 3 мМ MgC₂;
• 0,06 ед. акт./мкл Taq ДНК-полимеразы;
• 0,025 % Tween 20;
• стабилизаторы HS-Taq ДНК-полимеразы;
• SYBR Green I;
• инертный краситель.

Состав набора

Кат. №	Кол-во реакций по 50 мкл	HS-Taq qPCR SYBR Blue(2х)	50 мМ MgCl₂	Вода
1974.0200	200	4 х 1,25 мл	1 х 1 мл	4 х 1,25 мл
1974.1020	1020	17 х 1,5 мл	2 х 1,8 мл

Преимущества использования экстра-микса:

• Фермент с “горячим” стартом повышает специфичность, чувствительность и выход реакции.
• Для активации HS-Taq ДНК-полимеразы требуется не более 5 мин.
• Сокращается время на подготовку реакции.
• Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
• Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
• Инертный краситель облегчает пробоподготовку при постановке ПЦР.

Область применения:

• ПЦР в режиме реального времени с использованием интеркалирующего красителя SYBR Green I.
• Обычная ПЦР.

Ограничения к использованию:
Не рекомендуется использовать для ПЦР в реальном времени с флуоресцентно-меченными зондами. Для таких приложений следует использовать Экстра-микс HS-qPCR (2×).

Срок хранения и транспортировка:
1 год при -20 °С; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

1974_Экстра-микс для кол ПЦР HS-qPCR SYBR Blue, инструкция, Диаэм, русск., 3 стр.

Реакционная смесь, содержащая Taq ДНК-полимеразу с «горячим» стартом, для проведения ПЦР в режиме реального времени с флуоресцентными зондами.

Набор содержит реакционную смесь HS-qPCR (2×) и стерильную воду. Реакционная смесь HS-qPCR (2×) предназначена для проведения количественной ПЦР в режиме реального времени c использованием флуоресцентно-меченых зондов.

В состав реакционной смеси HS-qPCR (2×) входят все необходимые компоненты ПЦР (исключая ДНК-матрицу, праймеры и зонд): HS-Taq ДНК-полимераза, смесь dNTP, 2×ПЦР-буфер, Mg²⁺.

Область применения: ПЦР c “горячим” стартом в режиме реального времени с применением олигонуклеотидных зондов; обычная ПЦР; высоковоспроизводимая ПЦР; мультиплексная ПЦР; генотипирование.

Хранение: в защищённом от света месте при +25 °С – 7 дней; при +4 °С – 4 месяца; при -20°С – 18 месяцев; не более 50 циклов замораживания-размораживания.

Транспортировка: при 0 - +4 °С, допускается транспортировка при комнатной температуре до 3-х дней.

Рекомбинантная форма, выделенная из E. сoli Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7,4, 50 мМ KCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50% глицерин. Определение единицы активности: Одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для лигирования 50% Hind III фрагментов ДНК фага l за 30 мин при 16°С в 20 мкл реакционной смеси при концентрации ДНК 300 мкг/мл. Условия реакции: 50 мМ трис-HCl рН 7,5, 10 мМ MgCl₂, 10 мМ дитиотрейтол, 1 мМ ATP. Оптимальная температура лигирования 16°С. Хранение и транспортировка: при -20°С.

Обладает 5 ́-3 ́ полимеразной активностью, 3 ́-5 ́ экзонукеазной корректирующей активностью, используется для синтеза длинных фрагментов ДНК, достройка «липких» концов ДНК, получение зондов и модицифированных ДНК-конструкций.

Полимераза с горячим стартом, смесь термостабильного белка, выделенного из рекомбинантного штамма E. coli, несущего ген полимеразы Thermus Aquaticus и специфических
моноклональных антител; свободна от бактериальной ДНК.
Хранение при – 20 °С.

Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli

Буфер хранения:
50 мМ Трис-HCl, pH 8,0 (при 25°С), 50 мМ NaCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 1 % Тритон Х-100.

Определение единицы активности:
За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 10 нмоль dNTP в кислотонерастворимый продукт за 30 мин при 74°С.

Условия реакции:
50 мМ трис-HCl, pH 9,0 (при 25° С), 50 мМ NaCl, 10 мМ MgCl₂, 200 мM dATP, 200 мM dCTP, 200 мM dGTP, 50 мM [3H] dTTP, 0,25 мг/мл активированной ДНК из тимуса теленка.

Хранение и транспортировка:
-20°С

Полинуклеотидканаза катализирует перенос фосфата от АТФ на 5’ конец ДНК или РНК, используется для концевого мечения НК, фосфорилирования праймеров, удаления 3’- фосфорильных групп. Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli.

Буфер хранения: 10 мМ трис-HCl рН 7,4, 50 мМ KCl, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ ДТТ, 50% глицерин.

Условия определения активности: 70 мМ трис-HCl рН 7,6, 10 мМ MgCl₂, 5 мМ ДТТ, 66 мкМ [g³²Р] АТФ, 20 мкМ 18-20-мерный гетеродезоксиолигонуклеотид.

Определение единицы активности:

Одна единица активности соответствует количеству фермента, катализирующему включение 1 нмоль [³²Р] в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37 °С.

Хранение и транспортировка при -20 °С.

Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli Условия хранения: 20 мМ К-фосфат рН 7,5, 0,1 мМ ЭДТА, 0,1 мМ ДТТ, 20 мМ КCl, 50% глицерин. Хранить при -20° С Определение единицы активности: За единицу активности РНК-полимеразы Т7 принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль нуклеозидтрифосфата в кислотонерастворимый продукт за 1 час при 37° С. Условия реакции: 40 мМ трис-HCl рН 8,1, 16 мМ MgCl₂, 2 мМ спермидин - НСl 10 мМ дитиотрейтол, 4 нуклеозидтрифосфата в концентрации 1 мМ каждый, 10 мкг/мл плазмиды, содержащей Т7 промотор. Хранение и транспортировка: при -20°С.

Область применения: синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР в режиме реального времени, синтез кДНК для клонирования, получение меченых кДНК-зондов для микрочипов (microarray), мечение ДНК, анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Рекомбинантная форма, выделенная из E. coli, не содержит доменa РНКазы Н Буфер хранения: 50 мМ трис-HCl, pH 8,0 (при 25°C ), 100 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 5 мМ дитиотрейтол, 50 % глицерин и 0,1 % NP-40. Условия определения активности: 50 мМ трис-HCl, pH 8,3 (при 25°С), 40 мМ KCl, 6 мМ KCl, 50 мM [3H] dTTP, 1 мМ дитиотрейтол, poly А 2 А260/мл, 2 мкМ d(pT)12, 100 мкг/мл БСА. Определение активности: За единицу активности принимали количество фермента, катализирующее включение 1 нмоль dTMP в кислотонерастворимый продукт за 10 мин при 37°С. Хранение и транспортировка: -20°С

Поставляются в виде 100 мМ раствора в воде как наборами по 4 нуклеотида, так и по отдельности, нуклеотиды очищены ионнообменной колоночной хроматографией.

Условия хранения: -20 °С, допускается транспортировка в температуре окружающей среды.

Каждый нуклеозид-5’-трифосфаты поставляется в отдельной пробирке, свободен от примесей эндо-, экзонуклеаз, рибонуклеаз, фосфатаз, следовых количеств ДНК и нуклеотидов, протестирован in vitro.

Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.

Каждый нуклеозид-5’-трифосфаты поставляется в отдельной пробирке, свободен от примесей эндо-, экзонуклеаз, рибонуклеаз, фосфатаз, следовых количеств ДНК и нуклеотидов, протестирован in vitro.

Условия хранения: -20 °С, допускается многократное размораживание или замораживание.

Поставляются в виде 100 мМ раствора в воде как наборами по 4 нуклеотида, так и по отдельности, нуклеотиды очищены ионнообменной колоночной хроматографией.

Условия хранения: -20 °С, допускается транспортировка в температуре окружающей среды.

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

100 мМ раствор аммонийной соли в стерильной воде, либо в ТЕ-буфере.
Чистота препарата — не менее 99 % (по ВЭЖХ).

Терминирующий аналог dATP для секвенирования.

Условия хранения: -20 °С, допускается на короткий период (до 1 недели) хранение при комнатной температуре.

Терминирующий аналог dUTP для секвенирования.

Условия хранения: -20 °С, допускается на короткий период (до 1 недели) хранение при комнатной температуре.

Терминирующий аналог dCTP для секвенирования.

Условия хранения: -20 °С, допускается на короткий период (до 1 недели) хранение при комнатной температуре.

Терминирующий трифосфат, аналог трифосфатов на основе 2',3'-дидезоксинуклеозидов.

Условия хранения: -20 °С.

Терминирующий трифосфат, аналог трифосфатов на основе 2',3'-дидезоксинуклеозидов.

Условия хранения: -20 °С.

Терминирующий трифосфат, аналог трифосфатов на основе 2',3'-дидезоксинуклеозидов.

Условия хранения: -20 °С.

Для анализа степени оксидативного повреждения ДНК и изучения последующей репарации ДНК.

Реагент для мечения ДНК с использованием ПЦР.

Условия хранения: -20 °С.

Реагент для введения флуоресцентной метки в ДНК.

Условия хранения: -20 °С.

Буфер для хранения и нанесения образцов, содержит 3 красителя для оценки подвижности в геле,
состав: 60 % глицерин, 0,003% бромфеноловый синий, 0,003% ксиленцианол, 0,15% оранжевый G, 60 мМ ЭДТА, 10 мМTris-HCl (pH 7,6).

Фрагменты 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000; концентрация — 0,5 мг/мл; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим раствором

Фрагменты 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000; концентрация — 0,5 мг/мл; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим раствором.

Фрагменты 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 и 1000 п.н.

Фрагменты 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000; 50, 250, 500, 750 и 1000 п.н.– удвоены; условия хранения в буфере; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим раствором.

Фрагменты 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000 (x 2), 4000, 5000, 6000, 8000, 10000; 3000 — удвоен; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим раствором.

Фрагменты 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000 п.н.; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим раствором.

Фрагменты: 24, 34, 57, 67, 110, 147, 157, 190, 242, 328, 404, 489, 710 п.н.; требуется буфер для нанесения с красителями и утяжеляющим агентом.

Набор содержит по 50 мкг каждого вида ДНК-маркеров: 1911, 1910, 1909

Маркер молекулярного веса ДНК содержит 8 фрагментов от 250 до 3000 п.н.; фрагменты 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500 и 3000 п.н.; концентрация ДНК-маркера — 0,1 мг/мл; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 2 мкл; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК содержит 13 фрагментов от 250 до 10000 п.н.; фрагменты: 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 4000, 5000, 6000, 8000, 10000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 250, 500, 1000, 3000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 2 мкл; условия хранения: -20 °C.

• Наличие свободного хода элементов переноса (пинов) по вертикали, то есть пины подвижны (нивелируются неровности донорной и приемной поверхности);
• передача равной нагрузки на каждый пин обеспечивает более точный количественный перенос в каждой точке;
• возможность самостоятельно заменять пины при их повреждении;
• элементы репликаторов выполнены из нержавеющей стали и алюминия с защитным покрытием;
• стерилизация в пламени горелки или в автоклаве (при этом цвет репликатора может измениться).

Репликатор совместим с круглыми чашками Петри диаметром 40 мм.

• Количество пинов, шт. – 28;
• длина пина, мм – 20;
• диаметр пина, мм – 1,5;
• форма окончания пина – плоскость;
• погрешность при переносе, % – ± 5 от приведенного объема;
• расстояние между центрами пинов, мм – 5.

• Наличие свободного хода элементов переноса (пинов) по вертикали, то есть пины подвижны (нивелируются неровности донорной и приемной поверхности);
• передача равной нагрузки на каждый пин обеспечивает более точный количественный перенос в каждой точке;
• возможность самостоятельно заменять пины при их повреждении;
• элементы репликаторов выполнены из нержавеющей стали и алюминия с защитным покрытием;
• стерилизация в пламени горелки или в автоклаве (при этом цвет репликатора может измениться).

Репликатор совместим с круглыми чашками Петри диаметром 40 мм.

• Количество пинов, шт. – 28;
• длина пина, мм – 20;
• диаметр пина, мм – 2;
• форма окончания пина – полусфера;
• погрешность при переносе, % – ± 5 от приведенного объема;
• расстояние между центрами пинов, мм – 5.

• Наличие свободного хода элементов переноса (пинов) по вертикали, то есть пины подвижны (нивелируются неровности донорной и приемной поверхности);
• передача равной нагрузки на каждый пин обеспечивает более точный количественный перенос в каждой точке;
• возможность самостоятельно заменять пины при их повреждении;
• элементы репликаторов выполнены из нержавеющей стали и алюминия с защитным покрытием;
• стерилизация в пламени горелки или в автоклаве (при этом цвет репликатора может измениться).

Репликатор совместим с круглыми чашками Петри диаметром 86 мм.

• Количество пинов, шт. – 110;
• длина пина, мм – 20;
• диаметр пина, мм – 2;
• форма окончания пина – полусфера;
• погрешность при переносе, % – ± 5 от приведенного объема;
• расстояние между центрами пинов, мм – 7.