Вернуться назад

Набор diaGene для очистки ДНК из реакционных смесей

Артикул Цена, вал. Наличие на складе Количество
3325.0050 50 выделений 2 300,= RUB 2 300 Под заказ
3325.0250 250 выделений 8 100,= RUB 8 100 Под заказ

Описание
Оплата и доставка
Состав набора:

50 выделений

Кат.№ 3325.0050

250 выделений

Кат.№ 3325.0250

Буфер Y 18 мл 2 х 45 мл
Буфер W 8 мл 3 х 15 мл
Буфер E 5 мл 25 мл
Микроколонки 50 шт. 5 х 50 шт.
2 мл пробирки для сбора фильтрата 50 шт. 5 х 50 шт.

Набор предназначен для очистки ДНК из реакционных смесей после ПЦР, лигирования, рестрикции и т.д. Очистка ДНК происходит за счёт избирательного связывания с сорбентом колонок на основе диоксида кремния. Фрагменты двцхцепочечной ДНК длиной свыше 50 п.н. сорбируются на мембрану колонки в присутствии хаотропного агента, а примеси (нуклеотидтрифосфаты, одноцепочечные олигонуклеотиды, соли и т.д.) оказываются в проскоке. Чистая ДНК элюируется буфером или деионизованной водой.

Ёмкость колонки составляет до 25 мкг ДНК, но зависит от состава наносимого на колонку препарата и от длины фрагментов ДНК.

Буфер Y содержит в своем составе индикатор кислотности. Эффективность сорбции ДНК зависит от рН (связывание ДНК с сорбентом происходит при рН < 7.5). При оптимальном для сорбции рН индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера Y, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл 3М ацетата Na (pH 5.0).

Срок годности и особенности хранения:
  • Все реактивы и колонки хранить при комнатной температуре (+15...25 °С).
  • После использования пакет с колонками рекомендуется плотно закрывать.
  • Срок годности: 12 месяцев с даты изготовления.
  • При транспортировке особые условия не требуются.
Дополнительное оборудование и реагенты:
  • Микроцентрифуга для пробирок типа эппендорф ёмкостью 1.5-2 мл с максимальной скоростью центрифугирования не менее 13000 об/мин (11000g).
  • Дозаторы переменного объёма и наконечники с фильтрами к ним.
  • Стерильные пробирки типа эппендорф ёмкостью 1.5 мл, свободные от нуклеаз.
  • 96% этанол.
  • Изопропанол.
  • 3М раствор ацетата натрия с рН 5.0
  • Опционально – деионизованная автоклавированная вода или вода, свободная от нуклеаз.

Очистка ДНК из реакционных смесей
Перед началом работы:
  • добавьте изопропанол в Буфер Y (12 мл для набора на 50 выделений, 60 мл для набора на 250 выделений). Тщательно перемешайте;
  • добавьте 96 % этанол в Буфер W (32 мл для набора на 50 выделений, 60 мл в каждый флакон для набора на 250 выделений). Тщательно перемешайте.
  1. К одному объёму реакционной смеси добавьте 5 объёмов Буфера Y (например, к 100 мл реакционной смеси надо добавить 500 мкл Буфера Y). Тщательно перемешайте.
  2. Поместите колонку в пробирку для сбора фильтрата. Перенесите в колонку полученный раствор и центрифугируйте 1 минуту при 13000 об/мин. Необходимо учитывать, что объём колонки составляет 650 мкл. Если объём образца превышает 650 мкл, последовательно нанесите образец на колонку, удаляя каждый раз жидкость из пробирки для сбора фильтрата.
  3. Нанесите на колонку 650 мкл Буфера W и центрифугируйте 1 мин при 6000 об/мин. Удалите фильтрат.
  4. Центрифугируйте пустую колонку 1 минуту при 13000 об/мин для удаления остатков Буфера W. Поместите микроколонку в новую 1,5 мл пробирку. Нанесите в центр мембраны 30-100 мкл Буфера Е и подождите 1 мин. Можно также использовать для элюции воду, свободную от нуклеаз или деионизированную автоклавированную воду. Минимальный объём элюента – 30 мкл, рекомендуемый – 50 мкл. При элюции 30 мкл достигается максимальная концентрация ДНК, но возможны потери.
  5. Элюируйте ДНК центрифугированием в течение 1 мин при 13000 об/мин.

Возможные проблемы и методы их решения

Проблема

Возможная причина

Решение

Мало ДНК на выходе

рН раствора не оптимален для связывания ДНК с сорбентом

Обратить внимание на цвет индикатора. Если он отличается от жёлтого - добавить 10 мкл 3М ацетата натрия, рН 5.0

Перед стадией элюции не полностью удалены остатки Буфера W

Обратить внимание на пункт о дополнительном центрифугировании

Доставка

Доставка осуществляется по всей России и странам СНГ. Возможен самовывоз со склада по адресу Московская область, г. Мытищи, 7-й Ленинский переулок, д.13. Доставка по Москве и Московской области осуществляется бесплатно.

Цена товара указана со склада в Москве и не включает расходы на доставку в другие города.

Вы можете выбрать способ доставки в личном кабинете, чтобы он автоматически указывался при оформлении всех последующих заказов. При выборе варианта «Транспортная компания по выбору клиента» укажите в комментариях транспортную компанию, с которой вы предпочитаете работать.

Точная стоимость доставки рассчитывается менеджером при подтверждении заказа в зависимости от весообъемных характеристик и дальности. Товары, требующие особого температурного режима, доставляются с соблюдением требуемых условий. Если в заказе есть прекурсоры, необходимо оформить официальное письмо об отпуске прекурсоров. (образец письма об отпуске прекурсоров)


Оплата

Компания Диаэм работает с юридическими и физическими лицами. После оформления заказа продавец-консультант сформирует счет и направит его вам по электронной почте и на страницу заказа в Личном кабинете на сайте. Вы также можете сами сформировать счет из Корзины, авторизовавшись на сайте. Счет оплачивается через банк. Вы можете оплатить товар в кассе Диаэм или любом отделении банка.

Для получения товара необходимо предоставление доверенности организации, а для получения товара при оплате физическим лицом необходим паспорт.

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!