Блоттинг — общее название наиболее распространённого лабораторного метода изучения белков и нуклеиновых кислот.
Протокол блоттинга состоит из нескольких этапов: разделение смеси фрагментов белков или нуклеиновых кислот методом электрофореза в полимерном геле (полиакриламидном или агарозном); перенос фрагментов из геля на поверхность нитроцеллюлозной или PVDF мембраны; детекция перенесенных фрагментов на поверхности мембраны за счёт специфичного связывания с фрагментами комплементарных молекул, конъюгированных метками (изотопными, флуоресцентными, люминесцентными или хромогенными); визуализация обработанной мембраны с использованием гель- и хемидокументирующих систем.
Система вестерн-блоттинга WIX-autoPP представляет собой интеллектуальную высокопроизводительную автоматическую систему блоттинга, которая обеспечивает автоматизацию и стандартизацию всех этапов обработки мембран: от блокирования до обработки вторичными антителами.
Система WIX-autoPP может автоматически выполнять загрузку и рециркуляцию реагентов, инкубацию и промывку мембран мини, миди и макси формата, из нитроцеллюлозы или PVDF. Система полностью открыта и может использоваться с антителами реагентами любых производителей, по усмотрению пользователя.
WIX-autoPP имеет функцию автоматического повторного использования антител, что позволяет сократить расход антител и снизить стоимость эксперимента.
Преимущества систем автоматического блоттинга WIX-autoPP
Экономия времени — сокращение времени ручного труда;
экономичность — полностью открытая система для работы с мембранами, реагентами и антителами любых производителей;
возможность сбора и повторного использования антител;
высокая производительность — до 24 мембран параллельно;
гибкость создания, настройки и сохранения протоколов: редактируемая установка времени и температуры инкубации и промывки мембран;
возможность ночной инкубации при низкой температуре и ускоренной инкубации при высокой температуре.
Технические характеристики
Совместимые форматы мембран: мини, миди (опция) и макси (опция);
производительность — до 24 мембран миди формата;
управление через сенсорный ЖК-экран, с отображением текущего состояния программы в режиме реального времени;
установка параметров термостатирования мембран на каждом этапе в диапазоне от +2 до +40℃;
установка таймера инкубации мембран блокирующим раствором, первичными и вторичными антителами, мин — от 0 до 999;
Устройство Bio-Dot для микрофильтрации на 96 образцов, включает 96-луночную рамку, основание вакуумного коллектора, опорную пластину для прокладок, прокладку. 96-луночные устройства микрофильтрации Bio-Dot обеспечивают простые воспроизводимые методы связывания белков или нуклеиновых кислот в растворе с мембранами. Многие экспериментальные протоколы могут быть реализованы с помощью взаимозаменяемых шаблонов.
Технические особенности:
устойчивость к 100% этанолу, кислотам и щелочам;
автоклавируемость;
запатентованная уплотнительная прокладка для предотвращения боковых утечек;
простое нанесение проб с расстоянием между микропланшетами;
клапан потока (3-ходовой) для регулируемого вакуума.
Система применяется для равномерного вакуумного переноса НК из агарозного
геля на нейлоновую мембрану.
Вакуумный блоттинг НК – нозерн-блоттинг и блоттинг по Саузерну;
площадь блоттинга, мм – до 200х250;
объем буфера, мл – до 200;
время переноса, мин – 30-90;
система изготовлена из пластика, устойчивого к разбавленным
кислотам и щелочам;
регулятор вакуума (опция).
Комплект поставки: устройство вакуумного переноса, пористая вакуумпроницаемая пластина, кольцевая уплотнительная прокладка для резервуара, зажимная уплотнительная рамка, крышка. Не включает в себя регулятор вакуума (заказываются дополнительно).
В отличие от обычного полусухого переноса, где основным механизмом движения реагентов является диффузия, в системе SNAP i.d.2.0 используется вакуум для активного переноса реагентов на мембрану.
Система применима для проведения вестерн-блоттинга, ускоряя стадии блокировки мембраны, инкубации с антителами и промывки:
площадь блоттинга, мм — 75 х 84 (мини) / 87 х 135 (миди);
совместима с нитроцеллюлозными и PVDF-мембранами и всеми распространенными реагентами для блоттинга (флуоресцентными, хемилюминесцентными, хромогенными);
возможно работать независимо с 2 гелями;
уменьшает время инкубации с антителами до 10 мин, суммарное время блокировки, инкубации с антителами и промывки до 30 мин;
снижает уровень фонового сигнала, т.к. излишки реагентов удаляются под действием вакуума;
эффективная блокировка мембраны с использованием низких концентраций блокирующего агента (0,05–0,5% обезжиренного сухого молока NFDM) исключает риск переблокировки;
чувствительность такая же или лучше, чем при традиционной технике иммунодетекции;
воспроизводимость условий блоттинга и получаемых результатов;
коллектор для сбора первичных антител для повторного использования;
совместима с вакуумным насосом, вакуум 410 мбар, 34 л/мин, например, WP6222050, Millipore (опция);
габариты, Д х В х Г, cм — 40,6 х 8,8 х 32,4.
Для защиты вакуумного насоса от контаминации рекомендуется использовать колбу Бунзена на 1 л (опция) и фильтрующую насадку SLFA05010, Millipore (опция), как показано на схеме выше.
В отличие от обычного полусухого переноса, где основным механизмом движения реагентов является диффузия, в системе SNAP i.d.2.0 используется вакуум для активного переноса реагентов на мембрану.
Система применима для проведения вестерн-блоттинга, ускоряя стадии блокировки мембраны, инкубации с антителами и промывки:
площадь блоттинга, мм — 75 х 84 (мини) / 87 х 135 (миди);
совместима с нитроцеллюлозными и PVDF-мембранами и всеми распространенными реагентами для блоттинга (флуоресцентными, хемилюминесцентными, хромогенными);
возможно работать независимо с 2 гелями;
уменьшает время инкубации с антителами до 10 мин, суммарное время блокировки, инкубации с антителами и промывки до 30 мин;
снижает уровень фонового сигнала, т.к. излишки реагентов удаляются под действием вакуума;
эффективная блокировка мембраны с использованием низких концентраций блокирующего агента (0,05–0,5% обезжиренного сухого молока NFDM) исключает риск переблокировки;
чувствительность такая же или лучше, чем при традиционной технике иммунодетекции;
воспроизводимость условий блоттинга и получаемых результатов;
коллектор для сбора первичных антител для повторного использования;
совместима с вакуумным насосом, вакуум 410 мбар, 34 л/мин, например, WP6222050, Millipore (опция);
габариты, Д х В х Г, cм — 40,6 х 8,8 х 32,4.
Для защиты вакуумного насоса от контаминации рекомендуется использовать колбу Бунзена на 1 л (опция) и фильтрующую насадку SLFA05010, Millipore (опция), как показано на схеме выше.
В отличие от обычного полусухого переноса, где основным механизмом движения реагентов является диффузия, в системе SNAP i.d.2.0 используется вакуум для активного переноса реагентов на мембрану.
Система применима для проведения вестерн-блоттинга, ускоряя стадии блокировки мембраны, инкубации с антителами и промывки:
площадь блоттинга, мм — 75 х 84 (мини) / 87 х 135 (миди);
совместима с нитроцеллюлозными и PVDF-мембранами и всеми распространенными реагентами для блоттинга (флуоресцентными, хемилюминесцентными, хромогенными);
возможно работать независимо с 2 гелями;
уменьшает время инкубации с антителами до 10 мин, суммарное время блокировки, инкубации с антителами и промывки до 30 мин;
снижает уровень фонового сигнала, т.к. излишки реагентов удаляются под действием вакуума;
эффективная блокировка мембраны с использованием низких концентраций блокирующего агента (0,05–0,5% обезжиренного сухого молока NFDM) исключает риск переблокировки;
чувствительность такая же или лучше, чем при традиционной технике иммунодетекции;
воспроизводимость условий блоттинга и получаемых результатов;
коллектор для сбора первичных антител для повторного использования;
совместима с вакуумным насосом, вакуум 410 мбар, 34 л/мин, например, WP6222050, Millipore (опция);
габариты, Д х В х Г, cм — 40,6 х 8,8 х 32,4.
Для защиты вакуумного насоса от контаминации рекомендуется использовать колбу Бунзена на 1 л (опция) и фильтрующую насадку SLFA05010, Millipore (опция), как показано на схеме выше.
Система для высокоэффективного вестерн-блоттинга и переноса НК с возможностью
работы с готовыми гелями; перенос 2-х гелей Criterion или 4-х гелей Mini-Protean.
электроблоттинг, погружение геля в буфер;
площадь блоттинга, см – 15х9,4;
количество кассет – 2;
объем буфера, мл – 1300;
расстояние между электродами, мм – 43;
время проведения блоттинга, мин – 30 – 60;
поддон для сборки “сэндвича”;
ролик для удаления воздушных пузырьков;
прокладки из вспененного полимера;
охлаждающий элемент Sealed Ice Block;
охлаждающий змеевик (опция);
рекомендуемые характеристики источника питания, напряжение, В / сила тока, А – 5-250 / 0,01-3;
габариты, ДхВхГ, мм – 118х150х218.
Комплект поставки: резервуар для буфера с крышкой и электродами, две кассеты для фиксации геля, две прокладки из вспененного полимера, электроды в виде пластин или проволоки (на выбор), охлаждающий элемент Sealed Ice Block, поддон для сборки "сэндвича", ролик для удаления воздушных пузырьков. Не включает охлаждающий элемент в виде змеевик (заказывается дополнительно).
Система для высокоэффективного вестерн-блоттинга и переноса НК с возможностью
работы с готовыми гелями; перенос 2-х гелей Criterion или 4-х гелей Mini-Protean.
электроблоттинг, погружение геля в буфер;
площадь блоттинга, см – 15х9,4;
количество кассет – 2;
объем буфера, мл – 1300;
расстояние между электродами, мм – 43;
время проведения блоттинга, мин – 30 – 60;
поддон для сборки “сэндвича”;
ролик для удаления воздушных пузырьков;
прокладки из вспененного полимера;
охлаждающий элемент Sealed Ice Block;
охлаждающий змеевик (опция);
рекомендуемые характеристики источника питания, напряжение, В / сила тока, А – 5-250 / 0,01-3;
габариты, ДхВхГ, мм – 118х150х218.
Комплект поставки: резервуар для буфера с крышкой и электродами, две кассеты для фиксации геля, две прокладки из вспененного полимера, электроды в виде пластин или проволоки (на выбор), охлаждающий элемент Sealed Ice Block, поддон для сборки "сэндвича", ролик для удаления воздушных пузырьков. Не включает охлаждающий элемент в виде змеевик (заказывается дополнительно).
Система Power Blotter XL разработана для полусухого метода переноса фракций белков с геля на мембрану при проведении вестерн-блоттинга.
Характеристики системы Power Blotter XL, Thermo FS:
метод переноса — электроблоттинг;
эффективный комбинированный протокол переноса, перенос белков с молекулярной массой от 10 до 300 кДа;
площадь блоттинга, см — 8,0×13,5;
объем буфера, мл — 200-400;
время блоттинга, мин — 5-10;
одна кассета для блоттинга;
перенос до 4-х гелей мини формата за 1 запуск;
может использоваться со стандартными расходными материалами для «полусухого» переноса (мембраны, бумага, буферы), возможность работы с готовыми гелями;
встроенный источник питания;
встроенные протоколы переноса для белков с разной молекулярной массой и до 25 протоколов, настраиваемых пользователем;
ЖК-дисплей с подсветкой;
сенсорная панель управления.
Комплект поставки: система Power Blotter XL, 1 кассета, ролик для удаления пузырьков, набор расходных материалов.
Система Pierce Power Blotter разработана для полусухого метода переноса фракций белков с геля на мембрану при проведении вестерн-блоттинга.
Метод переноса — электроблоттинг;
эффективный комбинированный протокол переноса, перенос белков с молекулярной массой от 10 до 300 кДа;
площадь блоттинга, см — 8,0×13,5;
объем буфера, мл — 200-400;
время блоттинга, мин — 5-10;
одна кассета для блоттинга;
перенос до 4-х гелей мини формата за 1 запуск;
может использоваться со стандартными расходными материалами для «полусухого» переноса (мембраны, бумага, буферы), возможность работы с готовыми гелями;
встроенный источник питания;
встроенные протоколы переноса для белков с разной молекулярной массой и до 25 протоколов, настраиваемых пользователем;
ЖК-дисплей с подсветкой;
сенсорная панель управления.
Комплект поставки: система Pierce Power Blotter, 1 кассета, ролик для удаления пузырьков, набор расходных материалов.
Система Trans-Blot SD Semy Dry для “полусухого” переноса белков и НК (электроблоттинг) с использованием малого количества буфера.
Площадь блоттинга, см – 24 х 16;
объем буфера, мл – ≤ 200;
расстояние между электродами определяется толщиной «сэндвича»;
время проведения блоттинга, мин – 15 - 60;
рамка для фиксации агарозных гелей;
набор Trans-Blot SD DNA/RNA для переноса НК (опция);
рекомендуемые характеристики источника питания, напряжение, В / сила тока, А – 5-500 / 0,01-3,0;
габариты, ДхВхШ, мм – 240х110х370;
вес, кг – 3,7;
Комплект поставки: камера, защитная крышка, титановый анод и стальной катод в виде пластин, рамка для фиксации агарозных гелей, фильтровальная экстра-толстая бумага для блоттинга (4 размера по 60 листов), размер, мм - 70х84, 80х135, 140х160, 180х185.
Система полусухого переноса WIX-fastBLOT – удобная система для ускоренного переноса белков из геля на мембрану с использованием минимального количества буфера и максимальной экономии времени.
Характеристики системы сухого переноса WIX-fastBLOT
Сенсорный экран 5” для создания и редактирования протоколов;
9 встроенных протоколов с возможностью редактирования;
2 кассеты можно запускать одновременно с разными программами;
функция отвода тепла, что решает проблему перегрева образца во время переноса;
установка напряжение от 0 до 30 В;
совместимость с реагентами и расходными материалами любых производителей;
скорость переноса – 2 мини-геля – 3 мин, 4 мини-геля и 2 миди-геля – 7 мин;
Система iBlot 2 разработана для быстрого и воспроизводимого переноса белков и нуклеиновых кислот с геля на мембрану при проведении вестерн-блоттинга. При переносе используются готовые кассеты с встроенными электродами и мембранами, смоченные буфером, что обеспечивает максимальную воспроизводимость результатов по сравнению с ручными методами проведения блоттинга.
Метод переноса— электроблоттинг;
площадь блоттинга, см — 13,5х10,8
буфер для переноса – не требуется;
время блоттинга, мин — 3-7;
встроенный источник питания;
встроенные протоколы переноса для белков с разной молекулярной массой и до 25 протоколов, настраиваемых пользователем;
ЖК-дисплей с подсветкой;
сенсорная панель управления.
Комплект поставки: cистема iBlot 2, ролик для удаления пузырьков/
детекция перенесенных фрагментов на поверхности мембраны за счёт специфичного связывания с фрагментами комплементарных молекул, конъюгированных метками (изотопными, флуоресцентными, люминесцентными
или хромогенными);
В зависимости от изучаемого вещества выделяют несколько разновидностей блоттинга:
Саузерн-блоттинг (Southern blot) — метод изучения ДНК с фракционированием методом электрофореза в агарозном геле и переносом разделенных фрагментов ДНК на нитроцеллюлозную мембрану для последующей гибридизации. Метод назван по имени изобретателя, английского биолога Эдвина Саузерна и является созвучным слову Southern (англ. "южный").
Нозерн-блоттинг (Northern blot) — метод изучения смеси РНК и мРНК в образцах. Метод разработан Дж. Олвайном, Д. Кемпом и Дж. Старком для изучения РНК и напоминает методику Э. Саузерна. Но поскольку есть некоторые принципиальные отличия (объект исследования РНК, мембрана из диазобензилоксиметил-целлюлозы), авторы решили подчеркнуть эти отличия и назвать метод Northern blot (англ. "северный") в противоположность методу Southern blot.
Вестерн-блоттинг (Western blot) — метод обнаружения специфичных белков в образце с фракционированием методом электрофореза в полиакриламидном геле с добавлением натрия додецилсульфата, с последующим переносом фрагментов на нитроцеллюлозную мембрану. Детекция целевых фрагментов на мембране осуществляется с использованием первичных
и добавлением вторичных
антител, меченых пероксидазой хрена или флуоресцентной меткой. Название метода Western blot (англ. "западный") является игрой английских слов и было дано У. Нейлом Бурнеттом, чтобы подчеркнуть отличие от метода Southern blot.
Саузвестерн-блоттинг (Southwestern blot) — метод изучения белков, связанных с ДНК. Поскольку метод изучает комплекс ДНК-белок, учёные решили отобразить в названии комбинацию названий двух методов Southern blot и Western blot, присвоив название Southwestern blot (англ. "юго-западный").
Истерн-блоттинг (Eastern blotting) — метод изучения посттрансляционных модификаций белков с фракционированием белков методом электрофореза в полиакриламидном геле с добавлением натрия додецилсульфата, с последующим переносом фрагментов на мембрану из нитроцеллюлозы или PVDF. Придерживаясь тенденции в наименовании модификации методов Эдвина Саузерна, данный метод был назван Eastern blot (англ. "восточный").
Для повышения удобства работы с сайтом на нем используются файлы cookie.
В cookie содержатся данные о Ваших прошлых посещениях сайта. Если Вы не хотите, чтобы эти данные
обрабатывались, отключите cookie в настройках браузера.
