ДНКаза I - эндонуклеаза, расщепляющая одно- и двухцепочечную ДНК. Она гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов и монодезоксинуклеотидов с 5’-фосфатом и 3’-OH.
Так как фермент рекомбинантный, его раствор не содержит РНКаз.
Активность ДНКазы I зависит от присутствия ионов Ca2+ и Mg2+, а также Mn2+. В присутствии Mg2+ фермент расщепляет каждую цепь двухцепочечной ДНК независимо друг от друга, случайным образом. В присутствии Mn2+ расщепление обеих цепей двухцепочечной ДНК происходит приблизительно в одном и том же месте, при этом концы фрагментов ДНК - тупые или выступающие на 1-2 нуклеотида.
Применение:
- Получение препаратов РНК, не содержащих примеси ДНК;
- расщепление матрицы ДНК после транскрипции in vitro;
- обратная транскрипция;
- мечение ДНК методом ник-трансляции (с использованием ДНК-полимеразы I);
- изучение взаимодействий «ДНК-белок» методом футпринтинга;
- получение библиотек вставок ДНК, перекрывающихся случайным образом.
Фермент комплектуется двумя 10-кратными реакционными буферами - с MgCl2 и без MnCl2
Важно! ДНКаза I чувствительна к физической денатурации - не перемешивать на вортексе или пипетированием. Перемешивать только переворачиванием пробирки.
Условия хранения: -20оС
