Эндонуклеазы рестрикции от New England Biolabs комплектуются буфером, обеспечивающим максимальную активность конкретного фермента. Обычно это один из четырёх стандартных буферов - 1.1, 2.1, 3.1 или CutSmart (для некоторых рестриктаз необходим специальный буфер). Все эти буферы имеют соответствующую цветовую маркировку на этикетке - жёлтую, синюю, красную или зелёную. Состав буферов приведён на сайте New England Biolabs.
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start с "горячим" стартом представляет модифицированную Taq ДНК-полимеразу, имеющую повышенную устойчивость к ингибиторам реакции, содержащимся в образце. Полимераза имеет более высокую скорость синтеза ДНК и дает возможность получить результаты ПЦР в два раза быстрее, чем другие Taq ДНК-полимеразы.
Запатентованные антитела к Platinum II Taq Hot-Start ДНК-полимеразе блокируют активность полимеразы при комнатной температуре и диссоциируют после начальной стадии денатурации при 94 °C. Такой «горячий старт» обеспечивает повышенную чувствительность, специфичность и продуктивность, позволяя проводить подготовку реакции при комнатной температуре.
Благодаря уникальному составу буфера для ПЦР Platinum II температура отжига составляет 60 °C для большинства пар праймеров. Изостабилизирующие молекулы в буфере повышают стабильность дуплекса праймер-матрица во время стадии отжига и способствуют повышенной специфичности без необходимости оптимизации температуры отжига для каждой пары праймеров. С помощью Platinum II Taq Hot-Start ДНК-полимеразы с горячим стартом можно проводить амплификацию разных фрагментов ДНК вместе с использованием одного и того же протокола с универсальной температурой отжига праймеров и этапом элонгации, выбранным для самого длинного фрагмента, подлежащего амплификации. ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start поставляется с усилителем Platinum GC Enhancer для специфической амплификации и повышения выхода ПЦР-продукта мишеней с высоким содержанием GC-участков (более 65%).
Особенности ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start имеет следующие особенности:
ПЦР буфер Platinum II обеспечивает универсальную температуру отжига за счет изостабилизации дуплексных структур праймер-матрица, и дает возможность проведения совместной амплификации разных фрагментов ДНК;
имеет повышенную устойчивость к ингибиторам реакции, остающемся в образце после стадий очистки;
технология горячего старта — обеспечивает превосходную специфичность, чувствительность и продуктивность;
имеет более высокую скорость синтеза ДНК и дает возможность получить результаты ПЦР в два раза быстрее, чем другие Taq ДНК-полимеразы.
Области применения ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start применяется в следующих областях:
амплификация образцов неоптимальной чистоты;
амплификация образцов с низкой концентрацией;
прямая ПЦР из цельной крови;
генотипирование;
амплификация GC-богатых фрагментов (более 65%);
метод молекулярных колоний;
высокопроизводительная ПЦР.
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start поставляется в комплекте:
100 реакций:
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 40 мкл;
5х Platinum II ПЦР буфер, 1.25 мл;
Platinum GC Enhancer, 1.25 мл;
500 реакций:
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 200 мкл;
5х Platinum II ПЦР буфер, 4х1.25 мл;
Platinum GC Enhancer, 4х1.25 мл;
2500 реакций:
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 1000 мкл;
5х Platinum II ПЦР буфер, 2х12.5 мл;
Platinum GC Enhancer, 2х12.5 мл;
4х2500 реакций (4 упаковки, каждая из которых содержит):
ДНК-полимераза Platinum II Taq Hot-Start, 1000 мкл;
5х Platinum II ПЦР буфер, 2х12.5 мл;
Platinum GC Enhancer, 2х12.5 мл;
условия хранения: -20 °С.
Также предлагаются форматы:
Platinum II Hot-Start ПЦР мастер-микс (2X) содержит ДНК-полимеразу Platinum II Taq Hot-Start в смеси с буфером для ПЦР Platinum II и dNTPs, тем самым уменьшая количество шагов пипетирования во время постановки реакции ПЦР;
Platinum II Hot-Start Green ПЦР мастер-микс (2X) — дополнительно содержит утяжеляющий реагент и два отслеживающих красителя для прямой загрузки продуктов ПЦР в гели, что дополнительно упрощает рабочий процесс ПЦР от постановки до окончательного анализа результата.
Стартовый комплект реагентов и рестриктаз Anza 10-pk включает в себя 5 эндонуклеаз рестрикции, 2 модифицирующих ДНК фермента и буферы.
Состав набора:
Anza 11 EcoRI;
Anza 5 BamHI;
Anza 1 NotI;
Anza 16 HindIII;
Anza 12 XbaI;
Anza 8 XhoI;
Anza 3 BcuI (isoschizomer to SpeI);
Anza 10 DpnI;
Anza 19 BglII;
Anza 26 Eco32I (isoschizomer to EcoRV);
Anza T4 DNA Ligase Master Mix;
Anza Alkaline Phosphatase;
Anza Buffer (10X);
Anza Red Buffer (10X).
Эндонуклеазы рестрикции, ДНК-модифицирующие ферменты и наборы ферментов для клонирования ДНК Anza, Thermo Fisher Scientific— это современные технологии, которые помогают экономить время и реагенты при постановке генно-инженерных экспериментов.
Продукция Anza — это линейка ферментов, позволяющая исследователю использовать:
128 рестриктаз;
5 ДНК-модифицирующих ферментов.
При клонировании с помощью ферментов Anza используется общий протокол для расщепления ДНК любыми рестриктазами Anza, а также единый буфер для рестриктаз и ДНК-модифицирующих ферментов. Такой подход устраняет необходимость в последовательных инкубациях и промежуточных очистках ДНК, необходимых при смене буферов, что позволяет существенно экономить время и снизить потери образца.
Преимущества наборов ферментов для клонирования Anza (в состав наборов включены 5 или 10 наиболее часто используемых рестриктаз, ДНК-лигаза, щелочная фосфатаза и универсальный буфер):
удобно: все ферменты Anza полноценно работают в универсальном буфере Anza;
быстро: 15-минутный протокол обработки ДНК;
просто: не требуются сложные и длительные этапы промежуточной очистки продуктов реакции;
надежно: отсутствие "звездной" активности;
полная система: в набор входят все необходимые модифицирующие ферменты ДНК Anza для полноценного клонирования.
Стартовый комплект реагентов и рестриктаз Anza 5-pk включает в себя 5 эндонуклеаз рестрикции, 2 модифицирующих ДНК фермента и буферы.
Состав набора:
Anza 11 EcoRI;
Anza 5 BamHI;
Anza 1 NotI;
Anza 16 HindIII;
Anza 12 XbaI;
Anza T4 DNA Ligase Master Mix;
Anza Alkaline Phosphatase;
Anza Buffer (10X);
Anza Red Buffer (10X).
Эндонуклеазы рестрикции, ДНК-модифицирующие ферменты и наборы ферментов для клонирования ДНК Anza, Thermo Fisher Scientific— это современные технологии, которые помогают экономить время и реагенты при постановке генно-инженерных экспериментов.
Продукция Anza — это линейка ферментов, позволяющая исследователю использовать:
128 рестриктаз;
5 ДНК-модифицирующих ферментов.
При клонировании с помощью ферментов Anza используется общий протокол для расщепления ДНК любыми рестриктазами Anza, а также единый буфер для рестриктаз и ДНК-модифицирующих ферментов. Такой подход устраняет необходимость в последовательных инкубациях и промежуточных очистках ДНК, необходимых при смене буферов, что позволяет существенно экономить время и снизить потери образца.
Преимущества наборов ферментов для клонирования Anza (в состав наборов включены 5 или 10 наиболее часто используемых рестриктаз, ДНК-лигаза, щелочная фосфатаза и универсальный буфер):
удобно: все ферменты Anza полноценно работают в универсальном буфере Anza;
быстро: 15-минутный протокол обработки ДНК;
просто: не требуются сложные и длительные этапы промежуточной очистки продуктов реакции;
надежно: отсутствие "звездной" активности;
полная система: в набор входят все необходимые модифицирующие ферменты ДНК Anza для полноценного клонирования.