Проточные цитометры: анализаторы и сортеры Выбраны параметры: Bio-Rad, BioSino, Китай

Простой, удобный в работе проточный цитофлуориметр 7S, от китайской компании BioSino, способен обеспечить до 95% потребностей клеточной лаборатории в области клеточного анализа. Прибор имеет один синий лазер (488 нм), но, несмотря на это, обеспечивает до 7 каналов флуоресцентной детекции и обладает высокой чувствительностью детекции и простым ПО, что делает получение результатов быстрым и максимально комфортным.

7S позволяет реализовать все базовые методы цитометрии в лаборатории: анализ клеточного апоптоза и аутофагии, оценка эффективности трансфекции и уровня экспрессии, изучить фенотипы и субпопуляции лимфоцитов, провести HLA-типирование или анализ индекса фрагментации ДНК спермы человека, а также изучить плоидность растений.

Цитофлуориметр 7S оснащен синим аргоновым лазером 488 нм (50 мВт) и системой детекции из 7 сверхчувствительных светодиодных детекторов, которые регистрируют 5 флуоресцентных сигналов, а также прямое (FSC*) и боковое светорассеяния (SSC**).

Система детекции позволяет работать как с самыми популярными красителями (FITC, Alexa 488, PE, PI), так и тандемными красителями (PE-Texas Red, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7), что позволяет реализовать простые мультиплексные эксперименты.

Демонстрация прибора

Прибор имеется на складе, есть возможность запросить демонстрацию на рабочем месте заказчика. Форма заказа доступна по кнопке «Заказать демо».

Технические характеристики цитофлуориметра 7S

• Автоматический забор проб с функцией автоматического промешивания;
• ПО на английском языке;
• сбор данных / компенсация флуоресценции в 1 клик;
• метод определения концентрации клеток – прямой подсчет;
• источник возбуждения – синий лазер 488 нм;
• каналы детекции:
  • FL1 – 525/50 нм (FITC/Alexa 488);
  • FL2 – 585/40 нм (PE);
  • FL3 – 630/30 нм (PE-Texas Red/ECD/PI);
  • FL4 – 697/60 нм (PerCP /PE-Cy5 / PE-Cy5.5);
  • FL5 – 780/60 нм (PE-Cy7);
• FSC* чувствительность, мкм – менее 1;
• минимальный объем образца, мкл – 90;
• чувствительность, MESF*** – не более 150 (по FITC) и не более 50 (по PE);
• коэффициенты вариации (CV) для всех каналов, % – менее 2;
• размер клеток/частиц, мкм – от 0,5 до 50;
• габариты, Ш × Г × В, см — 500 х 605 х 305;
• вес, кг – 35.

* FSC (Forward Scatter) – прямое светорассеивание.
** SSC (Side Scatter) – боковое светорассеивание.
***MESF (Molecules of Equivalent Soluble Fluorochrome) – число молекул указанного эквивалентного растворимого флуорохрома.

См. также:

Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad

Сортер клеток, до 3 лазеров, до 4 флуоресцентных параметров, S3e, Bio-Rad

Антитела

Центрифуги

Диссоциатор клеточный DSC-400, RWD, Китай

Проточный цитометр SinoCyte X — это новейшая версия проточных цитометров компании BioSino, с возможностью установки 4× лазеров и до 21 канала флуоресцентной детекции.

Области применения

• Онкология и гематология: анализ клеток крови, обнаружение дендритных клеток, цитотоксических Т-клеток, Т-клеточных рецепторов и Р-селектина.
• Иммунология: обнаружение пролиферирующих Т-клеток, изотипов иммуноглобулинов, NK-клеток и регуляторных Т-клеток.
• Стволовые клетки: анализ гемопоэтических стволовых клеток, обнаружение CAR-T-клеток и анализ мезенхимальных стромальных клеток.
• Клеточная биология: клеточная пролиферация, клеточный цикл и анализ апоптоза.
• Океанография: обнаружение морских микроорганизмов, количественный анализ ДНК и определение содержания липосом в морских водорослях.
• Мониторинг окружающей среды: обнаружение живых и мертвых бактерий, абсолютное количественное определение вирусов, бактерий и микроводорослей, выявление бактериальной плоидности и классификация микроводорослей.
• Клиническая диагностика: анализ субпопуляций лимфоцитов, нейтрофилов регуляторных Т-клеток, активация Т-клеток, определение блокирующих антител, определение цитокинов, подсчет гемопоэтических стволовых клеток, иммунофенотипирование лимфом, анализ клеточного цикла и полиплоидии, выявление очагов лейкемии.

Технические характеристики

• Лазеры — до 4× одновременно: 405 нм (100 мВт), 488 нм (60 мВт), 637 нм (80 мВт) и 561 нм;
• каналы детекции:
• 488 лазер: FSC, SSC, 525 нм, 575 нм, 620 нм, 697 нм, 780 нм (7 параметров);
• 638 лазер: 670 нм, 720 нм, 780 нм (3 параметра);
• 405 лазер: 425 нм, 460 нм, 525 нм, 605 нм, 660 нм, 720 нм, 780 нм, VSC (Violet side scater), (8 параметров);
• 561 лазер: 582 нм, 620 нм, 660 нм, 695 нм, 730 нм, 780 нм (8 параметров);
• чувствительность, MESF¹ — FITC <50; PE <30; APC <30;
• формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 × 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 40- и 96-луночных планшетов;
• размер частиц от 0,2 до 50 мкм;
• скорость сбора данных, события / с — до 80 000;
• скорость потока, мкл / сек — 15-120;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш×Г×В — 760×450×470 мм;
• вес, кг — 40.

Проточный цитометр SinoCyte от BioSino представляет собой высокопроизводительную, компактную и удобную в использовании систему с поддержкой до трех каналов и 15 параметров флуоресценции. Благодаря широкому спектру применения проточный цитометр SinoCyt является мощным инструментом для исследователей в различных областях, включая онкологию, иммунологию, исследования стволовых клеток, клеточную биологию, океанографию, мониторинг окружающей среды и клиническую диагностику.

Области применения

• Онкология и гематология: анализ клеток крови, обнаружение дендритных клеток, цитотоксических Т-клеток, Т-клеточных рецепторов и Р-селектина.
• Иммунология: обнаружение пролиферирующих Т-клеток, изотипов иммуноглобулинов, NK-клеток и регуляторных Т-клеток.
• Стволовые клетки: анализ гемопоэтических стволовых клеток, обнаружение CAR-T-клеток и анализ мезенхимальных стромальных клеток
• Клеточная биология: клеточная пролиферация, клеточный цикл и анализ апоптоза.
• Океанография: обнаружение морских микроорганизмов, количественный анализ ДНК и определение содержания липосом в морских водорослях.
• Мониторинг окружающей среды: обнаружение живых и мертвых бактерий, абсолютное количественное определение вирусов, бактерий и микроводорослей, выявление бактериальной плоидности и классификация микроводорослей.
• Клиническая диагностика: анализ субпопуляций лимфоцитов, нейтрофилов регуляторных Т-клеток, активация Т-клеток, определение блокирующих антител, определение цитокинов, подсчет гемопоэтических стволовых клеток, иммунофенотипирование лимфом, анализ клеточного цикла и полиплоидии, выявление очагов лейкемии.

Технические характеристики

• Лазеры — до 3х одновременно из 3 доступных: 405 нм (100 мВт), 488 нм (60 мВт), 637 нм (80 мВт);
• каналы детекции:
• 488 лазер: FSC, SSC, 525 нм, 575 нм, 620 нм, 697 нм, 780 нм (7 параметров);
• 638 лазер: 670 нм, 720 нм, 780 нм (3 параметра);
• 405 лазер: 425 нм, 460 нм, 525 нм, 605 нм, 660 нм, 720 нм, 780 нм, VSC 8 параметров), VSC (Violet side scater);
• чувствительность, MESF¹ — FITC <50; PE <30; APC <30;
• формат загрузки — пробирки размерами от 17 x 100 мм до 8,5 x 45 мм (включая стандартные пробирки на 1,5, 2 и 5 мл), опциональный автозагрузчик для 40- и 96-луночных планшетов;
• размер частиц от 0,2 до 50 мкм;
• скорость сбора данных, события / с — до 50000;
• скорость потока, мкл / сек — 15-120;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 760 × 450 × 470 мм;
• вес, кг — 40.

Проточный цитофлуориметр ZE5 — надежный, гибкий, высокопроизводительный анализатор для лабораторий с большим потоком образцов.

Уникальные особенности проточного цитофлуориметра ZE5, Bio-Rad

Цитофлуориметр ZE5 имеет до пяти лазеров и 30 детекторов, позволяет работать с любой вашей панелью; переключается между пробирками, штативами или планшетами без изменения конфигурации программного обеспечения; проводит автоматическую проверку всех фильтров на предмет их наличия и правильного расположения.

Цитофлуориметр ZE5 обеспечивает высокопроизводительный скрининг отдельных клеток, эффективный скрининг процессов передачи белков, мониторинг пациентов, проходящих иммунотерапию. Кроме исследований иммуногенности, разработки вакцины, открытия фенотипических лекарств, скрининга терапевтических антител, открытие биомаркеров рака, также может проводить работу по исследованию наночастиц.

В ситуации пандемии коронавируса облегчает скрининг сывороточных антител, реактивных к антигенам SARS-CoV-2.

Возможности цитофлуориметра ZE5:

• большое количество анализируемых параметров (до 30) обеспечивают гибкость в работе;
• высокая скорость анализа (до 100 000 событий в секунду, < 8 мин на 96-луночный планшет) обеспечивает высокую производительность;
• конструкция оптической системы (одинаковое расстояние от проточной ячейки до каждого детектора), фотоумножители Hamamatsu H11903 обеспечивают высокую чувствительность и разрешение;
• увеличенная стабильность лазерного пучка, верифицирование оптической системы ZE5 EYE обеспечивают стабильность и надежность результатов;
• возможность прямого подключения внешнего источника деионизированной воды и слива, замена емкостей с сервисными растворами без остановки измерения, автоматические процедуры старта и выключения обеспечивают удобство в обслуживании;
• универсальный автоматический автозагрузчик для любого типа пробирок или планшетов, контроль температуры, переноса пробы, предотвращение повреждения пробозаборника;
• возврат неиспользованного образца;
• конструкция проточной ячейки, высокочувствительная электроника обеспечивают низкие CV даже при высокой скорости потока.

Технические характеристики цитофлуориметра ZE5:

• лазеры — до 5: 355 нм (50 мВт), 405 нм (100 мВт), 488 нм (100 мВт), 561 нм (50 мВт), 640 нм (100 мВт);
• каналы детекции — FSC¹, SSC², до 27 флуоресцентных, опциональный дополнительный детектор FSC для субмикронных частиц;
• чувствительность MESF³ — <100 для FITC, PE, APC;
• формат загрузки — универсальный автозагрузчик для пробирок и планшетов (до 384 лунок);
• скорость потока — 0,025-3,5 мкл/сек (1,5-210 мкл/мин);
• скорость сбора данных — до 100 000 клеток/сек;
• метод определения концентрации клеток — прямой подсчет;
• габариты, Ш × Г × В — 740 × 690 × 660 мм;
• вес — 110 кг.

Сортер клеток S3e от Bio-Rad — это инновационная система сортинга с классической системой гидродинамической фокусировки, предназначенная для решения научно-прикладных задач в области сортировки клеток, в зависимости от сигнала флуоресцентной метки. В приборе реализована инновационная технология ProDrop.

В проточном цитометре, оборудованном системой для сортировки клеток, проточная ячейка закреплена на пьезокристалле. При подаче на него напряжения кристалл вместе с ячейкой совершает колебания с заданной частотой, в результате чего струя жидкости с клетками разбивается на отдельные капли. Проходя сквозь заряжающее кольцо, капля может приобретать положительный или отрицательный заряд в зависимости от того, какая клетка содержится внутри капли. Пролетая мимо отклоняющих пластин, капля с клеткой притягивается к ним, выходит из основного потока и попадает в пробирку. Суть технологии ProDrop заключается в том, что после прохождения процедуры детекции и сортинга калибровочных частиц ProLine, несортированные частицы подвергаются вторичной детекции на выходе, что позволяет оценить, насколько успешно прошла процедура сортировки, и в автоматическом режиме внести коррекцию процедуры без вмешательства пользователя.

Технические характеристики сортера клеток S3e

• Уровень чувствительности, событий/сек — до 100000;
• частота сортировки, событий/сек — до 30000;
• точность сортировки, % — более 99;
• диаметр сопла, мкм — 100;
• направление сортировки — 2-х линейное;
• источник света — до 3 лазеров на выбор из 4 доступных (405, 488, 561, 640 нм);
• детекция в 4-х флуоресцентных каналах (525/30, 586/25, 615/25, 655 нм);
• чувствительность менее <125 MESF для красителей FITC и PE;
• сортировка до 5 пробирок по 5 мл каждого направления селекции,
• возможность сортировки в стрипованные пробирки и на предметные стекла
• для микроскопии;
• минимальное разрешение — 0,5 мкм;
• система охлаждения Пельтье, температурный диапазон, °C — от 4 до 37;
• габариты, ШхГхВ, см — 70×65×65.

Комплект поставки: сортер клеток S3e, лазерs 488 и 561 нм, 4 флуоресцентных детектора, калибровочный набор, контейнеры (2 шт.) для реагентов и отходов, соединительные трубки, ПО ProSort, кабель, ПК.

Примеры использования сортера клеток S3e, Bio-Rad

Видео 5 минут: Investigating Cancer Stem Cells with the S3e Cell Sorter

Лекция 50 минут: Advanced Topics in Cell Sorting

Видео 5 минут: Identifying Predictive Biomarkers for Successful Immunotherapy Treatments.

Find out how the S3e Cell Sorter can help scientists discover new biomarkers that have the potential to become new therapies for cancer and other diseases.

Статьи с использованием сортера клеток S3e, Bio-Rad

1. Exosome mediated miR-155 delivery confers cisplatin chemoresistance in oral cancer cells via epithelial-mesenchymal transition Prathibha Kirave, Piyush Gondaliya1, Bhagyashri Kulkarni1, Rakesh Rawal, Rachana Garg, Alok Jain and Kiran Kalia

Естественный груз для миРНК это эксосомы, которые облегчают межклеточную коммуникацию в микросреде опухоли. Нарушение регуляции miRNA обычное явление при раке, и играет важную роль в устойчивости к химиотерапии. Опосредованный экзосомами перенос miRNA может играть важную роль устойчивости к лекарственным препаратам и служить мишенью для терапии рака. В изучению эксосомов, miRNA, сортер клеток S3e, Bio-Rad имеет критическую роль в данном случае для определения клеточного цикла. doi: 10.18632/oncotarget.27531

2. Strong increase in the autofluorescence of cells signals struggle for survival. Jérémy Surre

Прокариотические и эукариотические клетки обладают собственной естественной флуоресценцией из-за присутствия флуоресцентных клеточных структурных компонентов и метаболитов. Клеточная аутофлуоресценция (AF) зависит от метаболического состояния клеток. В данной статье было изучено воздействие различных стрессоров на изменение аутофлуоресценции клеток Escherichia coli. Спектры возбуждения и испускания, а также повышенная экспрессия генов биосинтеза флавинов убедительно свидетельствуют о том, что флавины вносят основной вклад увеличению аутофлуоресценции.

Повышенная экспрессия генов, кодирующих различные флавопротеины, указывает на клеточную стратегию борьбы с тяжелыми стрессами. Наблюдаемое усиление аутофлуоресценции при стрессе – это эволюционно законсервированное явление, поскольку оно происходит не только в клетках разных видов бактерий, но также в клетках дрожжей и человека. Влияние ампициллина на прямое рассеяние света и интенсивность автофлуоресценции клеток E. coli, а так же клеточное выживание, определялось сортером клеток S3e, Bio-Rad. doi: 10.1038/s41598-018-30623-2

3. Purification of high-quality RNA from a small number of fluorescence activated cell sorted zebrafish cells for RNA sequencing purposes Siebe Loontiens, Lisa Depestel, Suzanne Vanhauwaert, Givani Dewyn, Charlotte Gistelinck, Karen Verboom, Wouter Van Loocke, Filip Matthijssens, Andy Willaert, Jo Vandesompele, Frank Speleman & Kaat Durinck

Контроль транскрипции зависит от активности комплексов факторов транскрипции, метилирования ДНК, динамики модификации хроматина, а также образования петель ДНК более высокого порядка. На перестройку транскрипционных сетей во время развития рака большое влияние оказывают генетические поражения и эпигенетические изменения. Секвенирование РНК в настоящее время служит золотым стандартом для подробной и объективной молекулярной характеристики модельных систем как in vitro, так и in vivo.

В последние годы zebrafish (Danio rerio) становится все более важной в качестве модельного организма. Эмбриональное развитие у рыбок данио происходит быстро. Разработка линий флуоресцентных репортеров рыбок Danio rerio, в которых флуоресцентный маркер управляется промотором (специфичным для определенного типа клеток), делает возможным выполнение сортировки флуоресценцией клеток – сортер клеток S3e, Bio-Rad. Таким образом можно определять клеточное - специфические транскриптом, которые могли бы быть замаскированы при анализе РНК, полученной из целого эмбриона. Сортировка большого количества клеток (> 1 миллиона) не всегда возможна при работе с флуоресцентными репортерными эмбрионами. В зависимости от выбранного промотора флуоресцентный маркер может экспрессироваться только в небольшом количестве клеток и, таким образом, приводит к низкому выходу РНК. Учитывая важность получения достаточного количества высококачественной РНК для исследований экспрессии, было оптимизировано извлечение РНК из отсортированных с помощью – сортер клеток S3e, Bio-Rad – клеток эмбрионов рыбок данио и провелена углублення оценка качества извлеченной РНК. doi: 10.1186/s12864-019-5608-2