Носители для белковой (FPLC) хроматографии российского производства

05.08.2022

Компания Диаэм предлагает аффинные и ионобменные носители для белковой хроматографии российского производства.

Хроматографы низкого давления используются для препаративного выделения рекомбинантных белков, антител и их фрагментов, а также отработки разных методик разделения и очистки биологических молекул с целью последующего масштабирования этих процедур на производстве. Хроматографию низкого давления обычно проводят в стеклянных или пластиковых хроматографических колонках или картриджах, заполненных иммобилизованными аффинными, гидрофобными или ионно-обменными сорбентами.

Афинные носители

Аффинные носители представляют собой агарозный носитель, химически модифицированный различными функциональными группами. В основе принципа his-tag хроматографической очистки белков (она же металл-хелатная аффинная хроматография (МХХ) лежит взаимодействие между ионами металлов и имидазольным кольцом гистидина.

Полигистидиновая метка (Poly-his-tag или просто His-tag) является самой популярной меткой, используемой в аффинной хроматографии белков. Из-за своего небольшого размера (6 повторяющихся аминокислотных остатков) метка практически не меняет функции белка, а низкая иммуногенность и универсальность делает метку практически уникальной.

В настоящее время для аффиной хроматографии существуют продукты, основанные на двух различных лигандах-хелаторах:

1) Лиганд нового поколения AZUR с повышенной устойчивостью к ЭДТА – аналог лиганда используемого в сорбенте Cytiva Ni Sepharose excel и колонках HisTrap excel.

2) Традиционный лиганд NTA – нитрилотриуксусная кислота.

Кроме того, при необходимости возможно изготовление под заказ носителя с различными связанными ионами помимо традиционного Ni: Металл, с которым связан лиганд в хелатном комплексе может заметно влиять на аффинность и специфичность МХХ. Обычно действует следующее правило: чем выше выход белка, тем менее специфично его выделение. Обычно, по увеличению специфичности (и, соответственно, уменьшению аффинности), ионы располагаются в следующей последовательности: Cu²⁺, Ni²⁺, Zn²⁺, Co²⁺.

Связанный ион металла

Лиганд AZUR

Лиганд NTA

Никель / Ni²⁺

Ni-AZUR

Ni-NTA

Кобальт / Co²⁺

Co-AZUR

Co-NTA

Цинк / Zn²⁺

Zn-AZUR

Zn-NTA

Медь / Cu²⁺

Cu-AZUR

Cu-NTA

Без иона металла
(для активации пользователем)

IonLess-AZUR

IonLess-NTA


В данный момент доступны к заказу два варианта носителей.

Носитель AbiFlow 100 Ni-AZUR Agarose

Суспензия для самостоятельного изготовления афинных колонок AbiFlow 100 Ni-AZUR Agarose, частицы 50-150 мкм, Россия

Носитель AbiFlow 100 Ni-AZUR Agarose – разработка для очистки белков методом металл-хелатной хроматографии низкого давления. Носитель представляет собой микросферы со средним диметром 100 мкм, полученные путем кросс-сшивания природного полисахарида агарозы фармакопейного качества, с иммобилизованным комплексом тетра-дентантного хелатирующего лиганда с никелем (AZUR-Ni). Предназначен для реализации металл-хелатной хроматографии в FPLC, спин- и батч- форматах. Размер микросфер влияет на скорость потока и выход белка.

Носитель выдерживает самые высокие концентрации хелаторов, таких как ЭДТА и ДТТ, которые обычно используются в буферах для клеточных культур млекопитающих (вплоть до 20 мМ ДДТ и ЭДТА). Лиганд сопоставим с тем, который используется в Cytiva Ni Sepharose excel. Обращаем Ваше внимание, что носитель на основе AZUR не может быть регенерирован по стандартному протоколу с использованием ЭДТА.

Параметр

Значение

Тип носителя

Агароза

Размер микросфер носителя

50-150 мкм*

Аффинность

His-tag

Назначение

Специфическое связывание и очистка белков с his-tag меткой

Лиганд

AZUR: улучшенный тетрадентантный лиганд для his-tag

Связанный ион

Ni2+

Емкость по белку

>50 мг/мл

Стабильность хелатора

Стабилен в буферах с 20 мМ DTT и 20 мМ EDTA

Условия хранения

+4°С

* Микросферы с более узким диапазоном и другими средними размерами поставляются по договоренности.


Носитель AbiFlow 100 Ni-NTA Agarose

Суспензия для самостоятельного изготовления афинных колонок AbiFlow 100 Ni-NTA Agarose, частицы 50-150 мкм

Носитель AbiFlow 100 Ni-NTA Agarose – классический тип носителя для металл-хелатной хроматографии (МХХ) белков. Представляет собой микросферы средним диаметром около 100 мкм на основе кросс-сшитой агарозы фармакопейного качества с иммобилизованным комплексом лиганда нитрилотриуксусной кислоты с никелем (NTA-Ni). Предназначен для реализации МХХ в FPLC, спин- и батч- форматах.

Параметр

Значение

Тип носителя

Агароза

Размер микросфер носителя

50-150 мкм*

Аффинность

His-tag

Назначение

Специфическое связывание и очистка белков с his-tag меткой

Лиганд

NTA

Связанный ион

Ni2+

Стабильность хелатора

Стабилен в буферах с 10 мМ ДТТ и 1 мМ ЭДТА

Условия хранения

+4°С

* Микросферы с более узким диапазоном и другими средними размерами поставляются по договоренности.


Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог
FLO-931-102-10ML
FLO-931-102-10ML
10 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-931-102-50ML
50 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-931-102-250ML
250 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу


Тип носителя Агароза
Размер микросфер носителя 50-150 мкм
Аффинность His-tag
Назначение Специфическое связывание и очистка белков с his-tag меткой
Лиганд AZUR: улучшенный тетрадентантный лиганд для his-tag
Связанный ион Ni2+
Емкость по белку >50 мг/мл
Стабильность хелатора Стабилен в буферах с 20 мМ DTT и 20 мМ EDTA
Условия хранения +4°С
  • Суспензия для самостоятельного изготовления афинных колонок AbiFlow 100 Ni-AZUR Agarose, частицы 50-150 мкм
FLO-911-102-10ML
FLO-911-102-10ML
10 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-911-102-50ML
50 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-911-102-250ML
250 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу


Тип носителя Агароза
Размер микросфер носителя 50-150 мкм
Аффинность His-tag
Назначение Специфическое связывание и очистка белков с his-tag меткой
Лиганд NTA
Связанный ион Ni2+
Стабильность хелатора Стабилен в буферах с 10 мМ ДТТ и 1 мМ ЭДТА
Условия хранения +4°С
  • Суспензия для самостоятельного изготовления афинных колонок AbiFlow 100 Ni-NTA Agarose, частицы 50-150 мкм

Ионобменные носители

Принцип работы ионообменной хроматографии (ИОХ или IEX) основан на разделении белков с разным поверхностным зарядом, что обеспечивает высокое разрешение сепарации и емкость загрузки образца. Разделение основано на обратимом электростатическом взаимодействии между заряженным белком и противоположно заряженной хроматографическим носителем. Вследствие высокой скорости кинетики связывания, для ионообменной хроматографии можно использовать высокие скорости потока и носители различной степени твердости. Кроме того, за счет регулирования рН-буфера и, тем самым, изменяя заряд макромолекул, можно легко управлять эффективностью их разделения.

Носитель AbiFlow 100 СМ-Agarose

Суспензия для самостоятельного изготовления ионообменных колонок AbiFlow 100 CM-Agarose, частицы 50-150 мкм

Носитель AbiFlow 100 СМ-Agarose — слабый катионобменник на основе кросс-сшитой 4% агарозы фармакопейного качества и иммобилизованных на нее карбоксиметильных (СМ) остатков – слабого ионообменного лиганда. Отлично подходит для быстрой и эффективной очистки белков методом ион-обменной хроматографии, которую проводят, как правило, в растворах с низкой ионной силой, а элюцию связавшихся белковых молекул – в возрастающем солевом градиенте.

Носитель имеет высокую пористость, что обеспечивает эффективное ионное взаимодействие с белками. Сшитая агароза физически стабильна, что делает ее пригодной для процессов очистки при низком давлении со скоростью потока до 5 мл/мин (оптимально 0,5–2 мл/мин).

Плотность иммобилизованных СМ групп превышает 30 мкмоль/мл. AbiFlow 100 DEAE-Agarose поставляется в виде 50% суспензии, т.е. 1 мл соответствует 500 мкл влажной смолы. Суспензия содержит 20% этанола в качестве консерванта.

AbiFlow 100 СМ-Agarose стабильна в диапазоне pH 2–14, что упрощает разработку процедуры «очистки на месте» (CIP).


Параметр

Значение

Размер микросфер носителя

50-150 мкм*

Назначение

Очистка белков методом ион-обменной хроматографии

Лиганд

Карбоксиметил (CM-)

Тип ионного обмена

Слабо-катионный

Полимерный матрикс

Кросс-сшитая агароза

Рабочая обменная емкость

0,03-0,05 ммоль / мл влажной смолы

Рабочий диапазон рН

4-10 (2-14 – кратковременно для регенерации)

Химическая стабильность

Стабилен в стандартных водных буферах: 1 М NaOH, 8 M мочевине, 8 М гуанидин хлориде, 70% этаноле

Условия хранения

+4°С

* Микросферы с более узким диапазоном и другими средними размерами поставляются по договоренности.


Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог
FLO-21-102-5ML
FLO-21-102-5ML
5 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-21-102-25ML
25 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу
FLO-21-102-100ML
100 мл
хранение +4°C, транспортировка +4°C
По запросу
По запросу


Размер микросфер носителя 50-150 мкм
Назначение Очистка белков методом ион-обменной хроматографии
Лиганд Карбоксиметил (CM-)
Тип ионного обмена Слабо-катионный
Полимерный матрикс Кросс-сшитая агароза
Рабочая обменная емкость 0,03-0,05 ммоль / мл влажной смолы
Рабочий диапазон рН 4-10 (2-14 – кратковременно для регенерации)
Химическая стабильность Стабилен в стандартных водных буферах: 1 М NaOH, 8 M мочевине, 8 М гуанидин хлориде, 70% этаноле
Условия хранения +4°С
  • Суспензия для самостоятельного изготовления ионообменных колонок AbiFlow 100 CM-Agarose, частицы 50-150 мкм

См. также:

Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографии

Хроматографы жидкостные низкого давления

Хроматографы жидкостные среднего давления

Хроматографы промышленные

Хроматографы флэш

Фильтрующие насадки (шприцевые фильтры)

Фильтры (мембраны) для фильтрации жидкостей и газов



Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме:

Раскрыть анкету для отправки запроса

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!