Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографии | Диаэм


Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографии

Колонка является основным элементом жидкостного хроматографа, обеспечивающим разделение смесей веществ и очистку целевого продукта. Материалом для ее изготовления может служить нержавеющая сталь, пластиковый полимер или стекло. В конструкционном плане она представляет собой трубку или полый цилиндр, заполненный изнутри сорбентом (твердой фазой). Внутренний диаметр разных типов колонок может варьировать от 1 мм до 1 м и более.
Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографииКолонка является основным элементом жидкостного хроматографа, обеспечивающим разделение смесей веществ и очистку целевого продукта. Материалом для ее изготовления может служить нержавеющая сталь, пластиковый полимер или стекло. В конструкционном плане она представляет собой трубку или полый цилиндр, заполненный изнутри сорбентом (твердой фазой). Внутренний диаметр разных типов колонок может варьировать от 1 мм до 1 м и более.

Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографииПо своему предназначению хроматографические колонки подразделяются на аналитические, микропрепаративные, препаративные и промышленные. Помимо этого, в жидкостной хроматографии получили распространение защитные колонки (для предохранения основной колонки от загрязнения) и предколонки, используемые для предварительной очистки анализируемых проб перед их инжекцией.

В качестве твердой фазы в колонках используют широкое разнообразие сорбентов, в т. ч.: дисперсные и монолитные силикагели, поперечно-сшитые на основе агарозы и декстрана, полимерные синтетические, изготовленные из оксидов алюминия и циркона. По своей структуре они бывают непористыми, поверхностно-пористыми и полно-пористыми. Их также классифицируют по форме (сферическая и нерегулярная) и размеру частиц.

Тип используемого сорбента определяет область его применения в разных видах жидкостной хроматографии: нормально-фазовая (НФХ), обращенно-фазовая (ОФХ), гидрофобная (HIC), гидрофильная (HILIC), аффинная, ионообменная (анионообменная, катионообменная), ион-парная и пр.

Наиболее распространенные силикагельные сорбенты условно подразделяют на немодифицированные и химически привитые. Плотность пришивки разных функциональных групп к поверхности сорбентных частиц может варьировать от 4 до 32% в пересчете на содержащийся в них углерод. По сравнению с немодифицированным силикагелем привитая фаза этого сорбента отличаются лучшей гидролитической стойкостью, более высокой емкостью и селективностью удерживания / элюирования.

Классификация силикагельных сорбентов осуществляется по единой номенклатуре с использованием целого ряда условных обозначений (см. табл. 1). Например, приставка sil (от лат. silica) в фирменных названиях ряда сорбентов (Supelcosil, Kromasil, Hypersil и пр.) без указания связанной фазы обычно означает, что они содержат немодифицированный силикагель.

Популярные производители колонок, предколонок и сорбентов: Agilent, Cytiva, Phenomenex, Supelco (Merck), Thermo FS, Tosoh Corporation, Waters.

Таблица 1. Сорбенты с привитыми фазами на основе силикагеля

Наименование связанной фазы

Свойства и область применения

C1, TMS, SAS, Триметил

Фаза с очень низкой емкостью и высокой селективностью разделения высокомолекулярных полярных соединений в ОФХ.

C2, RP-2, Диметил

C2 обладает более сильной удерживающей способностью, чем фаза С1, уступая по этому показателю сорбентам: С4, С8 и С18.

С3, Пропил

C3 подходит для HIC хроматографии пептидов и белков.

С4, Бутил

Фаза с более низкой емкостью и удерживающей способностью, чем у сорбентов С8 и С18. Хорошо подходит для разделения макромолекул гидрофобных белков и пептидов с помощью HIC и ион-парной хроматографии.

С5, Пентил

С5 обладает более сильной гидролитической устойчивостью по сравнению с сорбентом С4. Привитую фазу пентила с диаметром пор 300Å используют в ОФХ гидрофобных белков и пептидов.

С6, Гексил

С6 обладает более сильной удерживающей способностью, чем фазы: С1, С2, С3, С4 и С5, уступая по этому показателю сорбентам: С8 и С18. Привитая фаза гексила находит применение ион-парной хроматографии

С8, MOS, RP-8, LC8, Октил

По своей селективности фаза С8 близка к С18, но уступает ей по удерживающей способности. Этот сорбент находит широкое применение в хроматографии нуклеотидов, стероидов, пептидов, небольших гидрофильных белков и прочих биомолекул.

С12, Додецил

С12 обеспечивает лучшее чем у С18 взаимодействие с целевыми молекулами и более чёткую форму пиков для неполярных и умеренно полярных соединений.

RP Amide C16

Фаза с высокой селективностью разделения алкильных соединений

С18, ODS, RP-18, LC-18, Октадецил

Универсальная фаза с высокой емкостью удерживания в неполярных растворителях. Прекрасно работает в ион-парной хроматографии. Имеет широчайший спектр применений (разделение пептидов, нуклеотидов, стероидов, витаминов, жирных кислот, пестицидов и пр.).

AQ-C18, Полярно- модифицированный октадецил

Подходит для разделения образцов в водной фазе

Peptide ES-C18, Ди- изобутилоктадецил

Быстрое разделение пептидов и полипептидов с высокой пиковой нагрузкой

C30, Триаконтанолдиметил

Фаза с высокой селективностью разделения гидрофобных соединений, длинноцепочечных и структурно родственных изомеров

С₆H₅, Фенил

Обладает уникальной селективностью разделения ароматических соединений в хроматографии гидрофобного взаимодействия.

С₆H₅–С₆H₅, Biphenyl, Дифенил

Высокая селективность разделения ароматических соединений

С₆H₅ (линкер C₃H₆O), Фенил-эфир

Используют для разделения высоко-полярных ароматических веществ.

С₆H₅ (линкер C₆H₁₂), Фенил-гексил

Фаза с высокой селективностью разделения ароматических соединений – доноров электронов

С₆F₅, PFP,

Обеспечивает селективное разделение замещённых ароматических соединений.

CN, Cyano, CPS, PCN, циано, цианопропил, нитрил

Универсальная фаза как для НФХ, так и ОФХ. Обладает высокой удерживающей способность в отношении полярных соединений при слабом удерживании гидрофобных веществ. Слабая полярность и низкая емкость этого сорбента позволяет быстро уравновешивать его в режиме градиентного элюирования.

Nitro, NO₂

Низко-емкая фаза селективна к ароматическим соединениям в ОФХ и применима для НФХ

NH₂, APS, амино, аминопропилсилил

Фаза является слабым анионообменником с универсальной областью применения в НФХ, ОФХ и ионообменной хроматографии. Хорошо подходит для разделения углеводов.

Diol OH, Диол

Универсальная фаза как для НФХ, так и ОФХ. Используют также в гель-фильтрационной хроматографии (GFC) высоко-полярных соединений, пептидов и белков.

OH5, Пента-гидрокси

Идеально подходит для разделения высоко-полярных соединений

F5 (PFP)

Высокая селективность разделения ароматических соединений – акцепторов электронов

SCX

Сильный катионобменник

SAX

Сильный анионобменник

Карбоксил WSX

Слабый катионобменник


Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!