Реактивы для молекулярной биологии на каждый день: на складе по специальным ценам!

Смесь водных растворов дезоксинуклеотидтрифосфатов - дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ, каждый в концентрации 2 мМ.

Особенности:

• Чистота свыше 99%, подтверждена ВЭЖХ;
• не содержат ДНК человека и E.coli;
• стабильны в течение нескольких лет при -20^оС;
• стабильны после многих циклов замораживания-размораживания ;
• стабильны в течение нескольких недель при комнатной температуре и после 30 циклов ПЦР.

Области применения:

• ПЦР фрагментов до 40 тыс. п.н.;
• синтез кДНК в реакции ОТ-ПЦР;
• ПЦР в реальном времени;
• высокоточная ПЦР;
• стандартная ПЦР.

Условия хранения: -20^оС

Водный раствор хлорида магния, отфильтрованный через мембрану 0.22 мкм. Предназначен для оптимизации условий ПЦР. Совместим со всеми полимеразами Thermo Scientific -Taq, DreamTaq, Phusion и др. Также может использоваться в качестве ко-фактора в других ферментативных реакциях.

Не содержит эндо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp II и раствором MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp I.

Условия хранения: -20^оС

ДНК-полимераза AmpiTaq - термостабильная рекомбинантная ДНК-полимераза. Представляет собой Taq ДНК-полимеразу, синтезируемую культурой клеток E.coli. Метод получения ДНК-полимеразы AmpliTaq и контроль качества обеспечивают постоянство характеристик полимеразы независимо от партиии, что даёт вопсроизводимость результатов ПЦР.

ДНК-полимераза AmpliTaq стабильно активна в диапазоне температур от +55 до +75^оС, что даёт возможность ставить ПЦР с различными праймерами, не оптимизируя уловия реакции.

Синтезирует фрагменты ДНК до 5 тыс п.н. с 3’-выступающим аденином.

Комплектуется 10-кратным буфером для ПЦР GeneAmp I. Также возможна комплектация с буфером GeneAmp II и раствором MgCl2.

Условия хранения: -20^оС

Деионизованная вода, отфильтрованная через мембрану 0.22 мкм. Предназначена для молекулярной биологии.

Не содержит экзо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 750 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C);
• 200 mM (NH₄)₂SO₄ ;
• 0.1% (v/v) Твин 20.

Условия хранения: -20^оС

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 750 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C);
• 200 mM (NH₄)₂SO₄;
• 0.1% (v/v) Tween 20;
• 20 mM MgCl₂

Условия хранения: -20°C.

Готовый к использованию 10-кратный буфер для ПЦР. Предназначен для Taq ДНК-полимераз (нативных и рекомбинантных). Также доступен в других составах и без детергентов.

Состав 10-кратного буфера:

• 100 мМ Tрис-HCl (pH 8.8 при +25°C)
• 500 мМ KCl
• 0.8% (об.) Nonidet P40
• 15 мМ MgCl₂

Условия хранения: -20^оС

Буфер GeneAmp I предназначен для ПЦР с ДНК-полимеразой AmpliTaq.

Содержит 15 мМ MgCl₂.

Условия хранения: -15-25^оС

Буфер GeneAmp II предназначен для ПЦР с ДНК-полимеразой AmpliTaq. Не содержит MgCl₂, раствор MgCl₂ входит в комплект в виде отдельного реагента.

Условия хранения: -15-25^оС

Taq ДНК-полимераза - термостабильная ДНК-полимераза из термофильной бактерии Thermus aquaticus. Фермент катализирует синтез ДНК в направлении 5’->3’, не обладает 3’->5’ экзонуклеазной активностью (корректирующей) и обладает низкой 5’->3’ экзонуклеазной активностью. Также обладает трансферазной активностью, что проявляется в способности присоединять дополнительный адениновый остаток к 3’-концу синтезированной цепи ДНК. Это удобно при ТА-клонировании. Время полужизни фермента при +95^оС - не менее 40 минут. Полимераза способна встраивать модифицированные нуклеотиды - биотинилированные или флуоресцентно-меченные.

Taq ДНК-полимераза - идеальный инструмент для стандартной ПЦР на последовательностях до 5 тыс. п.н.

Области применения:

• рутинная амплификация ДНК до 5 тыс. п.н.;
• высокопроизводительная ПЦР;
• мечение ДНК.

Комплектуется двумя 10-кратными буферами для ПЦР - с KCl и (NH₄)₂SO₄, а также 25 мМ раствором MgCl₂.

Точность Taq ДНК-полимеразы составляет 4.5 х 104, т.е. вероятность ошибки составляет 2.2 х 10-5 на 1 цикл.

Для экспериментов с микрочипами рекомендуется использовать Taq-буфер без детергентов.

Условия хранения: -20^оС

Буфер DreamTaq Green – это 10-кратный буфер для ПЦР, оптимизированный для постановки реакции с ДНК-полимеразой DreamTaq или DreamTaq Hot Start. Буфер содержит MgCl₂ в концентрации 20 мМ, а также KCl и (NH₄)₂SO_₄ в оптимальном соотношении, что обеспечивает специфичность отжига праймеров при различных концентрациях Mg^²+.

В состав буфера входят утяжеляющий агент и два маркерных красителя для электрофореза – голубой (миграция в 1% агарозном геле на уровне 3-5 тыс. п.н.) и жёлтый (миграция в 1% агарозном геле на уровне 10 п.н.). Это позволяет наносить ПЦР-смеси на гель непосредственно после реакции, не добавляя дополнительных реагентов.

Красители имеют максимумы поглощения 424 и 615 нм соответственно. Для приложений, требующих регистрации оптической плотности или флуоресценции ПЦР-продуктов, рекомендуется использовать бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Условия хранения – - 20 °С.

ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у Pfu. ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.

ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.

Также возможна комплектация с буфером Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) и мастер-миксы с ДНК-полимеразой Phusion – готовые 2-кратные реакционные смеси для ПЦР.

Условия хранения - 20 °С.

Особенности ДНК-полимеразы Phusion:

• высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
• более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
• универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
• больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.

Области применения:

• высокоточная ПЦР;
• клонирование;
• синтез ДНК для секвенирования;
• амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
• ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
• сайт-специфический мутагенез;
• высокопроизводительная ПЦР;
• получение микрочипов.

В состав набора входят:

• ДНК-полимераза Phusion (2 Ед/мкл);
• 5Х буфер Phusion HF*;
• 5Х буфер Phusion GC*;
• ДМСО;
• 50 мМ MgCl_₂.

* в состав 5Х буферов Phusion уже входит 7,55 мМ MgCl_₂.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start Green представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq Green, содержащим MgCl₂, а также утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР). Маркерные красители инертны, не взаимодействуют с компонентами ПЦР-смеси и не препятствуют использованию ПЦР-продуктов в реакциях рестрикции или лигирования, а также секвенированию. Если предполагается анализ ПЦР-продуктов с помощью спектрофотометрии или флуориметрии, рекомендуется использовать для амплификации бесцветный буфер DreamTaq или предварительно очищать ПЦР-продукт с помощью набора для очистки ДНК из реакционных смесей.

Также предлагается формат в виде 2-кратной готовой смеси для ПЦР – мастер-микс DreamTaq Hot Start Green.

ДНК-полимераза DreamTaq синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу;
• возможность нанесения ПЦР-продуктов на гель без добавления дополнительных реагентов для электрофореза.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start Green:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В набор входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq Green (с 20 мМ MgCl₂) – 10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Термостабильная ДНК-полимераза с горячим стартом DreamTaq Hot Start представляет собой модифицированную Taq ДНК-полимеразу с улучшенными свойствами – повышенной специфичностью и производительностью.

Функция горячего старта реализована с помощью ингибирования активности фермента антителами при комнатной температуре. Это препятствует образованию неспецифических продуктов до начала амплификации. Полимераза поставляется в комплекте с оптимизированным 10-кратным буфером DreamTaq, содержащим MgCl₂. Также возможна комплектация с буфером Dream Taq Green, содержащим утяжеляющий агент и маркерные красители (для удобства электрофоретического анализа продуктов ПЦР) или 2-кратный мастер-микс (готовая смесь для ПЦР) на основе полимеразы DreamTaq Hot Start.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start синтезирует фрагменты ДНК с аденозиновым остатком на 3’-концах, что делает их пригодными для ТА-клонирования.

ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start способна амплифицировать фрагменты ДНК до 6 тыс. п.н.

Не рекомендуется для амплификации GC-богатых последовательностей.

Особенности ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• более высокий выход ПЦР-продукта при меньших исходных концентрациях матрицы;
• повышенная специфичность и возможность подготовки реакционных смесей при комнатной температуре благодаря технологии горячего старта;
• способность синтеза более длинных ампликонов – до 6 тыс. пар нуклеотидов;
• требуется минимальная оптимизация условий отжига праймера и концентрации Mg^²+ благодаря улучшенному реакционному буферу.

Области применения ДНК-полимеразы DreamTaq Hot Start:

• рутинная ПЦР;
• синтез фрагментов для ТА-клонирования;
• скрининг рекомбинантных клонов;
• обратная транскрипция с последующей ПЦР;
• генотипирование.

В состав набора входят:

• 200 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 40 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 1,25 мл.

• 500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) – 2 × 1,25 мл.

• 2500 единиц:
v ДНК-полимераза DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

• 4 × 2500 единиц, 4 упаковки, каждая содержит:
v ДНК-полимеразу DreamTaq Hot Start – 5 × 100 мкл (5 Ед/мкл);
v 10Х буфер DreamTaq (с 20 мМ MgCl₂) –10 × 1,25 мл.

Условия хранения – от - 5 °С до - 30 °С.

Водные растворы дезоксинуклеотидтрифосфатов дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ, смешанные в одной пробирке в концентрации 10 мМ.

Нуклеотиды имеют чистоту 99% и тестированы на отсутствие нуклеазной активности и примесей ДНК.

Смесь удобна тем, что снижает число пипетирований при приготовлении реакционных смесей и предназначена для большинства молекулярно-биологических экспериментов. Нуклеотиды в составе смеси сохраняют свою стабильность при многократном замораживании-размораживании и при хранении при комнатной температуре до 7 недель.

Условия хранения -20^оС

Набор состоит из 4 пробирок, каждая из которых содержит 100-мМ водный раствор одного из дезоксинуклеотидтрифосфатов - дАТФ, дГТФ, дЦТФ и дТТФ.

Растворы титрованы NaOH до рН 7.3 - 7.5. Нуклеотиды имеют чистоту 99% и тестированы на отсутствие нуклеазной активности и примесей ДНК. Сохраняют стабильность при многократном замораживании-оттаивании.

Набор предназначен для большинства молекулярно-биологических применений: стандартной ПЦР, ПЦР в режиме реального времени, обратной транскрипции, мечения и секвенирования ДНК.

Условия хранения -20^оС

Раствор RNAlater для стабилизации РНК в интактных, размороженных образцах тканей, устраняет необходимость немедленной обработки или замораживания образцов в жидком азоте для последующей обработки.

Особенности реагента RNAlater

Реагент RNAlater имеет следующие особенности:

• не требует заморозки тканей перед консервацией;
• сохраняет количественный и качественный состав РНК;
• сохраняет РНК 1 сутки при температуре 37°C, 1 неделю при комнатной температуре, 1 месяц при 4°C, либо любой срок при -20°C;
• совместим с любыми процедурами выделения РНК;
• тестирован на широком спектре тканей различных организмов;
• заполняет полости и органы многоклеточных организмов для инактивации РНКаз и стабилизации РНК по всему объёму ткани;
• требуется небольшой объём реагента для стабилизации РНК в образце;
• позволяет собирать образцы тканей в местах, где немедленная изоляция РНК невозможна;
• для последующего выделения РНК из образца не требуется отмывать реагент.

Условия хранения и перевозки — комнатная температура.

Обратная транскриптаза RevertAid — это рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV) с модифицированной структурой и каталитическими свойствами. Фермент обладает РНК-зависимой и ДНК-зависимой полимеразной активностью. Обратная транскриптаза RevertAid проявляет активность РНКазы Н в меньшей степени, чем обратная транскриптаза вируса миелобластоза птиц (AMV-RT).

Особенности обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid имеет следующие особенности:

• cинтезирует первую цепь кДНК до 13 тыс п.н.;
• оптимальная температура реакции +42 °С;
• активна до +50 °С;
• способна встраивать модифицированные нуклеотиды — меченые Су3, Су5, родамином родамином или флюоресцеином.
  

Области применения обратной транскриптазы RevertAid

Обратная транскриптаза RevertAid применяется в следующих областях:

• синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
• синтез кДНК для клонирования или экспрессии белков;
• мечение ДНК для микрочипов;
• анализ РНК с помощью праймер-экстеншн.

Комплектуется 5-кратным реакционным буфером.

Условия хранения: -20 °С.

Набор с обратной транскриптазой RevertAid - полная система для эффективного синтеза первой цепи кДНК ан РНК-матрицах. В состав набора входит обратная рестриктаза RevertAid - рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV-RT). Она активна при температурах от +42 до +50оС и способна синтезировать кДНК до 13 тыс. п.н.

В состав набора также входят: реакционный буфер, смесь дезокситрифосфатов, ингибитор РНКаз RiboLock, случайный 6-нуклеотидный праймер, олиго(дТ)18 праймер и контольный препарат - праймеры и матрица GAPDH.

Олиго(дТ)18 праймер предназначен для специфического отжига на 3’-поли(А) матричной РНК. Для обратной транскрипции 5-концов РНК и РНК без поли(А)-концов используется случайный праймер.

Также возможно использование ген-специфичных праймеров. Первая цепь кДНК может быть использована как матрица в ПЦР, ПЦР в реальном времени или для синтеза второй цепи кДНК.

Условия хранения: -20^оС

Набор с обратной транскриптазой RevertAid - полная система для эффективного синтеза первой цепи кДНК ан РНК-матрицах. В состав набора входит обратная рестриктаза RevertAid - рекомбинантная обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей (M-MuLV-RT). Она активна при температурах от +42 до +50оС и способна синтезировать кДНК до 13 тыс. п.н.

В состав набора также входят: реакционный буфер, смесь дезокситрифосфатов, ингибитор РНКаз RiboLock, случайный 6-нуклеотидный праймер, олиго(дТ)18 праймер и контольный препарат - праймеры и матрица GAPDH.

Олиго(дТ)₁₈ праймер предназначен для специфического отжига на 3’-поли(А) матричной РНК. Для обратной транскрипции 5-концов РНК и РНК без поли(А)-концов используется случайный праймер.

Области применения:

• Синтез первой цепи кДНК в реакциях ОТ-ПЦР или ОТ-ПЦР в реальном времени;
• синтез полноразмерных библиотек кДНК;
• синтез антисмысловой РНК.

Условия хранения: -20^оС

Ингибитор RiboLock ингибирует активность РНКаз А, В и С по неконкурентному механизму в соотношении 1 : 1. Не ингибирует эукариотические РНКазы T1, T2, U1, U2, CL3 и прокариотические РНКазы H и I.

Работает в большинстве реакционных смесей и защищает РНК от деградации при температурах до +55^оС.

Рекомендуемая рабочая концентрация - 1 ед/мкл.

В состав буфера для хранения входит ДТТ, который обеспечивает стабильность ингибитора, но не является необходимым компонентом реакционной смеси.

Области применения:

• Предохранение РНК от деградации при транскрипции и трансляции in vitro, обратной транскрипции, амплификации РНК, выделении мРНК-протеинового комплекса из клеток млекопитающих;
• выделение и хранение РНК;
• исследование специфической РНКазной активности.

Условия хранения: -20^оС

Эндонуклеаза рестрикции Eco81I Fast Digest распознает и гидролизует сайты CC↓TNAGG при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции Eco81I Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ CC↓TNA GG 3’
	3’ GG ANT↑CC 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Температурная инактивация	за 10 минут при 80°С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	Bsu36I, AxyI, Bse21I
Хранение	-20 °С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Эндонуклеаза рестрикции XhoI Fast Digest распознает и гидролизует сайты R↓AATTY при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции XhoI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ C↓TCGA G 3’
	3’ G AGCT↑C 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	5 минут при 80 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Хранение	-20 °С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Эндонуклеаза рестрикции SalI Fast Digest распознает и гидролизует сайты G↓TCGAC при 37 °C за 5-15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции SalI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ G↓TCGA C 3’
	3’ C AGCT↑G 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	10 минут при 65 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Хранение	-20 °С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Эндонуклеаза рестрикции NotI Fast Digest распознает и гидролизует сайты GC↓GGCCGC при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции NotI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ GC↓GGCC GC 3’
	3’ GC CCGG↑CG 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Температурная инактивация	5 минут при 80 °С
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	CciNI
Хранение	-20 °С

Примечание: cписок всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Эндонуклеаза рестрикции NcoI Fast Digest распознает и гидролизует сайты C↓CATGG при 37 °C за 5–15 минут в универсальном буфере FastDigest.

Эндонуклеаза рестрикции NcoI Fast Digest относится к продвинутой линии ферментов для быстрого гидролиза ДНК, которые имеют 100% активность в универсальных реакционных буферах FastDigest и FastDigest Green.

Универсальные буферы FastDigest и FastDigest Green обеспечивают быстрый однократный, двойной или многократный гидролиз ДНК в течение 5-15 минут, исключая необходимость замены буфера или стадий очистки ДНК.

Короткое время инкубации и оптимальный состав универсального буфера позволяют устранить звездчатую активность.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как фрагмент Кленова, T4 ДНК лигаза, щелочная фосфатаза и T4 ДНК полимераза обладают 100% активностью в буфере FastDigest. Следовательно, ферменты для последующих применений могут быть добавлены непосредственно в реакционную смесь.

Для дополнительного удобства универсальный буфер FastDigest Green включает реагент плотности и два трекинговых красителя для прямой загрузки продуктов реакции гидролиза на гель.

Сайт узнавания	5’ C↓CATG G 3’
	3’ G GTAC↑C 5’
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Температурная инактивация	Нет
Поставляется в комплекте	буфер 10x FastDigest, буфер 10x FastDigest Green
Изошизомеры	Bsp19I
Хранение	-20 °С

Примечание: cписок всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Сайт узнавания	5' T↓CTAG A 3'
	3' A GATC↑T 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер Tango
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	65 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' A↓AGCT T 3'
	3' T TCGA↑A 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер R (Red)
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер R (Red); 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' G↓AATTC 3'
	3' CTTAA↑G 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер EcoRI
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	65 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер EcoRI; 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' G↓GATC C 3'
	3' C CTAG↑G 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер BamHI
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование — не чувствителен; CpG метилирование — не чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер BamHI; 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Сайт узнавания	5' GC↓GGCCGC 3'
	3' CGCCGG↑CG 5'
Концентрация	10 е.а./мкл
Оптимальная реакционная температура	37 °С
Оптимальный реакционный буфер	буфер O (Orange)
Чувствительность к метилированию	dam метилирование — не чувствителен; dcm метилирование – не чувствителен; CpG метилирование — чувствителен.
Инактивация за 20 минут при	80 °С
Поставляется в комплекте	10x буфер O (Orange); 10x буфер Tango
Условия хранения	-20 °С

Примечание: полный перечень эндонуклеаз рестрикции Thermo FS смотрите в таблице:

Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS, таблица, рус, 5 стр.

Экзонуклеаза ExoI специфически расщепляет одноцепочечную ДНК в направлении 3'--> 5', высвобождая дезоксинуклеотид-монофосфат.

Не расщепляет цепи ДНК, 3’-конец которых блокирован фосфорильной или ацетильной группой.

Активна в ПЦР-буфере.

Области применения:

• Удаление праймеров из ПЦР-смесей, в том числе перед секвенированием;
  

• расщепление 1-цепочечной ДНК с 3’-гидроксилированными концами.

Важно! фермент не предназначен для отщепления липких 3’-концов у 2-цепочечной ДНК.

Условия хранения: -20^оС

Щелочная фосфатаза катализирует отщепление 5’- и 3’-фосфатных групп от ДНК, РНК и нуклеотидов, а также от белков.

Термочувствительная фосфатаза FastAp активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах. Она дефосфорилирует все типы концов ДНК (липкие и тупые) в течение 10 минут при +37^оС и инактивируется при +75^оС в течение 5 минут, поэтому не требуется очистка реакционной смеси перед лигированием.

Особенности щелочной фосфатазы FastAp:

• Рекомбинантный белок;
• быстрое дефосфорилирование - 10 минут;
• быстрая инактивация - 5 минут;
• можно использовать для одновременного расщепления и дефосфорилирования векторной ДНК;
• активна во всех рестриктазных и ПЦР-буферах;
• дефосфорилирует белки;
• используется для очистки ПЦР-смесей совместно с ExoI.

Области применения:

• Дефосфорилирование векторной ДНК при клонировании;
• очистка ПЦР-продуктов из реакционных смесей перед секвенированием;
• дефосфорилировнание 5’-концов ДНК перед мечением полинуклеотидкиназой Т4;
• другие экперименты, связанные с дефосфорилированием нуклеиновых кислот;
• дефосфорилирование белков.

Важно!

Связывание фосфатазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

Условия хранения: -20^оС

АТФ (аденозин-5’-трифосфат) — высоко стабильный нуклеотид. Предлагается в виде водного 100 мМ раствора, титрованного NaOH до рН 7.3-7.5. Чистота не менее 99%. Стабилен при -20 °С в течение нескольких лет, выдерживает многократное замораживание-оттаивание.

Области применения аденозина-5’-трифосфата

Аденозин-5’-трифосфат применяется в следующих областях:

• транскрипция in vitro;
• синтез РНК, в том числе микроРНК;
• лигирование;
• фосфорилирование.

Условия хранения: -20 °С.

ИПТГ (Изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид) - высокостабильный аналог лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и индуцирует синтез бета-галактозидазы, фермента, метаболизирующего лактозу. Используется как индуктор экспрессии генов, клонированных под контроль lac-оперона.

Также используется совместно с X-Gal для бело-голубой селекции клонов.

Рекомендуется приготовление стокового раствора в концентрации 100 мМ. Для бело-голубой селекции используется конечная концентрация 0.1 мМ.

Условия хранения: +4^оС

Современные ДНК-лигазы одинаково быстро и эффективно сшивают как липкие, так и тупые концы. Одна из таких разновидностей лигаз используется в готовых наборах для клонирования CloneJET PCR, Thermo Fisher Scientific.

Наборы CloneJET PCR – это оптимизированные системы с позитивной селекцией для эффективного клонирования ПЦР-продуктов, синтезированных любыми термостабильными ДНК-полимеразами. С помощью наборов CloneJET PCR можно клонировать ДНК-фрагменты с любыми концами – тупыми или липкими, фосфорилированными или не фосфорилированным. Лигирование занимает всего 5 минут, а выход рекомбинантных клонов составляет более 99% благодаря использованию вектора pJET1.2/blunt с позитивной системой селекции.

Примеры применения:

• клонирование продуктов ПЦР с тупым или 3'-dA-концом длиной до 10 кб;
• клонирование фрагментов ДНК, генерируемых рестрикционными ферментами;
• секвенирование клонированной ДНК;
• транскрипция in vitro и in vivo клонированных вставок из промотора T7.

Клонирование с использованием наборов CloneJET PCR включает в себя этап достройки липких концов, получающихся при использовании для ПЦР стандартной Taq-полимеразы или при рестриктазном расщеплении ДНК. При этом реакция лигирования тупоконечной вставки длиной до 3000 пар нуклеотидов с линейным вектором занимает всего 5 минут (при более длинных вставках время лигирования увеличивается). Позитивная селекция клонов со вставкой осуществляется за счёт встраивания клонируемого фрагмента в последовательность летального гена eco47IR, тем самым выключая этот ген и обеспечивая жизнеспособность рекомбинантных клонов.

Преимущества наборов CloneJET PCR:

• универсальный вариант для клонирования фрагментов с тупым или липким концами;
• быстрое клонирование ПЦР-фрагмента всего за 5 минут;
• эффективность – более 99% положительных клонов;
• отсутствие фоновых клонов с «пустым» вектором.

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.

В качестве кофермента требуется наличие АТФ.

ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.

Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.

Области применения:

• Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;
• пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК;
• лигазная детекция РНК ;
• репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;
• циркуляризация линейной ДНК.

ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.

Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.

Важно!

1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65^оС, а затем охладить во льду.

2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)

Условия хранения: -20^оС

Полинуклеотидкиназа Т4 катализирует перенос гамма-фосфата от АТФ на 5’-концевую ОН-группу ДНК, РНК, олигонуклеотидов или нуклеозид-3’-монофосфатов (прямая реакция).Эта реакция обратимая. В присутствии АДФ полинуклеотидкиназа проявляет 5’-фосфатазную активность и катализирует обмен фосфатными группами между 5’-фосфорилированными полинуклеотидными цепями и АТФ (реакция обмена). Также фермент обладает 3’-фосфатазной активностью.

Полинуклеотидкиназа Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.

Области применения:

• Мечение 5’-концов нуклеиновых кислот с целью получения гибридизационных зондов, зондов для транскриптов, маркеров для электрофореза, праймеров для секвенирования и ПЦР;

• 5’-фосфорилирование синтетических олигонуклеотидов, ПЦР-продуктов, ДНК и РНК перед лигированием;

• выявление модификаций ДНК с помощью [³²P];

• отщепление 3’-концевых фосфатов.

Полинуклеотидкиназа Т4 Thermo Scientific комплектуется 10-кратными буферами А (для прямой реакции), В (для реакции обмена) и 24% раствором ПЭГ 6000.

Полиэтиленгликоль повышает эффективность реакции фосфорилирования и используется в реакции обмена.

Важно! Полинуклеотидкиназа ингибируется ионами аммония, поэтому при осаждении фосфорилируемой ДНК рекомендуется использовать ацетат натрия.

Условия хранения: -20^оС

Деионизованная вода, обработанная диэтилпирокарбонатом (ДЭПК) и отфильтрованная через мембрану 0.22 мкм. Предназначена для экспериментов с использованием РНК.

Не содержит экзо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.

Не предназначена для ПЦР и экспериментов in vivo.

ТРИзол - готовый к использованию реагент для выделения РНК высокого качества. Также используется для выделения ДНК, РНК и белков из широкого спектра биологических образцов - тканей, клеток, жидкостей и др. Это однофазная смесь фенола и гуанидин-изотиоцианата, разработанная для выделения фракций ДНК, РНК и белков из одного и того же биологического образца.

Выполнение протокола выделения РНК с помощью ТРИзол занимает около одного часа. Реагент обеспечивает эффективный лизис и даёт возможность получения РНК высокого качества за счёт ингибирования РНКаз.

Выделение фракций ДНК, РНК и белков осуществляется с помощью добавления к ТРИзол хлороформа.

Условия хранения: при комнатной температуре

РНКаза А - эндорибонуклеаза, расщепляющая одноцепочечную РНК по цитозиновым и урациловым остаткам. Так как РНКаза А от Thermo Scientific не содержит ДНКаз, не требуется её термическая обработка перед использованием.

Области применения:

• Выделение плазмидной и геномной ДНК;
• удаление РНК из препаратов рекомбинантных белков;
• исследования защищённости от РНКаз (совместно с РНКазой Т);
• картирование 1-нуклеотидных мутаций в ДНК и РНК.

Рекомендуемая рабочая концентрация РНКазы А - от 1 до 100 мкг/мл. В присутствии NaCl в низких концетрациях (до 100 мМ) РНКаза А расщпляет 1- и 2-цепочечную РНК, а также цепь РНК в составе гибридов ДНК-РНК. В присутствии NaCl в концентрации 0.3М и выше РНКаза А расщепляет только 1-цепочечную РНК.

Условия хранения: -20^оС

Протеиназа К - эндопротеаза широкого спектра действия., расщепляющая белки даже в присутствии детергентов. Относится к классу сериновых протеаз. Протеиназа К гидролизует пептидные связи со стороны карбоксильной группы алифатических, ароматических и гидрофобных аминокислот. Минимальный размер расщепляемого пептида - 4 аминокислоты.

Протеиназа К Thermo Scientific - готовый к использованию раствор с концентрацией не менее 600 ед/мл (20 мг/мл).

Области применения:

• Выделение нуклеиновых кислот из животных тканей и клеточных культур;
• удаление ДНКаз и РНКаз в процессе выделения и очистки нуклеиновых кислот;
• определение локализации ферментов.

Рекомендуемая рабочая концентрация фермента - от 0.05 до 1 мг/мл. Активность фермента повышается в присутствии 0.2-1% SDS или 1-4 М мочевины.

Ионы кальция являются фактором регуляции связывания протеиназы К с субстратом и повышают стабильность фермента. Оптимальное значение рН - от 7.5 до 8, но белок стабилен при рН от 4 до 12. Оптимальная температура - +50-55^оС, при нагревании свыше +65^оС протеиназа К инактивируется.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Набор для экстракции из геля предназначен для выделения фрагментов ДНК из агарозного геля после электрофоретического разделения. С помощью набора можно очистить фрагменты ДНК от 25 до 20 тыс. п.н. с выходом до 95%. Ёмкость колонок GeneJET - до 25 мкг ДНК, выделяемой из 1 г агарозного геля. Выделеннная ДНК пригодна для рестрикции, лигирования, секвенирования, мечения и т.д.

Условия хранения: комнатная температура.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Данный набор предназначен для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов - культур животных клеток, животных тканей, человеческих клеток крови, бактерий и дрожжей.

С помощью набора GeneJET можно получить препарат чистой РНК (А260/280 > 1.9) с длиной фрагментов не менее 200 нуклеотидов. Полученная РНК пригодна для молекулярно-биологических экспериментов, таких, как обратная транскрипция, ОТ-ПЦР, ОТ-количественная ПЦР и гибридизация.

Условия хранения: комнатная температура

Наборы GeneJET Plasmid Miniprep предназначены для выделения плазмидной ДНК из бактерий с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния. Набор позволяет получить до 20 мкг высококопийной плазмидной ДНК за одну процедуру выделения.

Преимущества набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• процедура выделения занимает менее 14 минут;
• не требуется экстракция фенолом/хлороформом или осаждение спиртом;
• очищенная ДНК немедленно готова к использованию;
• совместим с вакуумным коллектором для увеличения пропускной способности;
• оптимизирован для выделения ДНК бактерий.

Выделенная набором GeneJET Plasmid Miniprep ДНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• рестрикции и модификации;
• автоматизированного флуоресцентного и радиоактивного секвенирования;
• ПЦР;
• in vitro транскрипции;
• трансформации.

Состав набора GeneJET Plasmid Miniprep:

• раствор для ресуспендирования клеток;
• раствор для лизиса клеток; раствор для нейтрализации лизата;
• промывочный раствор (концентрат);
• раствор РНКазы А;
• буфер для элюции;
• спиновые колонки;
• трубки для сбора элюата;
• подробный протокол работы.

Культуру клеток собирают и лизируют. Затем лизат очищают центрифугированием и наносят на колонку с кремнеземом для селективного связывания молекул ДНК при высокой концентрации соли. Адсорбированную ДНК промывают для удаления загрязнений, а чистую плазмидную ДНК элюируют в небольшом объеме элюционного буфера или воды.

Условия хранения и перевозки - комнатная температура.

ДНКаза I - эндонуклеаза, расщепляющая одно- и двухцепочечную ДНК. Она гидролизует фосфодиэфирные связи, что приводит к образованию олигодезоксинуклеотидов и монодезоксинуклеотидов с 5’-фосфатом и 3’-OH.

Так как фермент рекомбинантный, его раствор не содержит РНКаз.

Активность ДНКазы I зависит от присутствия ионов Ca²⁺ и Mg²⁺, а также Mn²⁺. В присутствии Mg²⁺ фермент расщепляет каждую цепь двухцепочечной ДНК независимо друг от друга, случайным образом. В присутствии Mn²⁺ расщепление обеих цепей двухцепочечной ДНК происходит приблизительно в одном и том же месте, при этом концы фрагментов ДНК - тупые или выступающие на 1-2 нуклеотида.

Применение:

• Получение препаратов РНК, не содержащих примеси ДНК;
• расщепление матрицы ДНК после транскрипции in vitro;
• обратная транскрипция;
• мечение ДНК методом ник-трансляции (с использованием ДНК-полимеразы I);
• изучение взаимодействий «ДНК-белок» методом футпринтинга;
• получение библиотек вставок ДНК, перекрывающихся случайным образом.

Фермент комплектуется двумя 10-кратными реакционными буферами - с MgCl₂ и без MnCl₂

Важно! ДНКаза I чувствительна к физической денатурации - не перемешивать на вортексе или пипетированием. Перемешивать только переворачиванием пробирки.

Условия хранения: -20^оС

Гликоген - полисахарид высокой степени чистоты. Выделен из двустворчатых моллюсков. Используется в качестве инертного соосадителя при преципитации нуклеиновых кислот спиртами. Он не растворим в этаноле и способствует образованию более прочного и видимого осадка нуклеиновой кислоты после центрифугирования. Гликоген более эффективен при высаживании нуклеиновых кислот, чем тРНК, линейный акриламид или фрагментированная ДНК.

Данный продукт рекомендуется в первую очередь для преципитации РНК, а также ДНК.

Идеален для преципитации олигонуклеотидов (более 8 оснований) и РНК/ДНК в низкой концентрации (20 пг и более).

Не влияет на спектральные характеристики нуклеиновых кислот.

При концентрации до 0.4 мкг/мкл совместим с трансфекцией.

При концентрации до 8 мкг/мкл совместим с ферментативными реакциями - ПЦР, лигированием, рестрикцией, синтезом кДНК, трансформацией, транскрипцией in vitro.

Не влияет на электрофоретическую подвижность нуклеиновых кислот.

Условия хранения: -20^оС

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

С помощью данного набора можно выделить геномную ДНК (длина фрагментов - свыше 30 тыс. п.н.) из культур животных клеток, образцов животных тканей, цельной крови, бактерий и дрожжей.

Выделенная ДНК пригодна для большинства молекулярно-биологических экспериментов - ПЦР, гибридизации, рестрикции и др.

Условия хранения: комнатная температура

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler Mix содержит 15 фрагментов ДНК от от 75 до 20000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 5000, 6000, 8000, 10000; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500, 1000 и 3000 п.о., что облегчает их идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp Plus содержит 14 фрагментов от 100 до 3000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 3000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500 и 1000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 1 мкл; условия хранения: при комнатной температуре или при 4 °С до 6 месяцев, более длительное хранение при -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 50bp содержит 13 фрагментов от 50 до 1000 п.н.; фрагменты: 50, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 250 и 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp содержит 10 фрагментов от 100 до 1000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонную полосу (повышенной концентрации) при 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp содержит 10 фрагментов от от 100 до 1000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 п.н.; имеет эталонную полосу (повышенной концентрации) при 500 п.н., что облегчает идентификацию в геле; предварительно смешан с буфером для нанесения; рекомендуемый объём для нанесения на гель — 1 мкл; условия хранения: -20 °C.

Маркер молекулярного веса ДНК GeneRuler 100 bp Plus содержит 14 фрагментов от от 100 до 3000 п.н.; фрагменты: 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1200, 1500, 2000, 3000 п.н.; имеет эталонные полосы (повышенной концентрации) при 500 и 1000 п.н., что облегчает идентификацию в геле; поставляется с буфером для нанесения для отслеживания миграции фрагментов ДНК на гель-электрофорезе; условия хранения: -20 °C.

Используется при приготовлении маркеров и образцов для нанесения на полиакриламидный или агарозный гель. Содержит два красителя (ксиленцианол FF (XCFF)) и оранжевый G/ orange G для визуализации фрагментов во время фореза, глицерин для равномерной загрузки на дно лунки и ЭДТА для связывания двухвалентных тонов металлов и ингибирования металл-зависимых протеаз. Не маскирует ДНК при УФ-экспозиции. Используется для анализа коротких фрагментов ДНК.

10 мM Tрис-HCl (pH 7,6), 0,15% оранжевый G, 0,03% ксиленцианол FF, 60% глицерин, 60 мM ЭДТА.

Применение: гель-электрофорез.

Реагент для приготовления образцов ДНК и маркеров для электрофореза в агарозном или полиакриламидном геле. Содержит цветные маркерные красители Бромфеноловый синий и ксиленцианол FF для визуального контроля за миграцией фрагментов ДНК в геле. Также в состав реагента входят глицерин в качестве утяжеляющего агента и ЭДТА в качестве ингибитора нуклеаз.

Не мешает визуализации ДНК в ультрафиолете.

10 мM Tрис-HCl (pH 7,6), 0,03% бромфеноловый синий, 0,03% ксиленцианол FF, 60% глицерин, 60 мM ЭДТА.

Маркер ДНК FastRuler Low Range предназначен для быстрого определения длины и приблизительной концентрации фрагментов 2-цепочечной ДНК в специальных 48- или 96-луночных гелях для высокопроизводительного электрофореза, но может использоваться и в обычных агарозных гелях; содержит смесь пяти фрагментов ДНК с тупыми концами: 50, 200, 400, 850, 1500 п.н., которые быстро (в течение 8-14 минут) разделяются при коротком пробеге (10-20 мм) в соответствующем агарозном геле;, комплектуется 6-кратным буфером для нанесения, хотя содержит краситель и утяжеляющий агент для нанесения на гель; может быть визуализирован этидиум бромидом или SYBR Safe; условия хранения: -20 °C.

Предназначен для электрофореза нуклеиновых кислот в полиакриламидном геле в нативных и денатурирующих условиях (7 М мочевина), а также для секвенирования ДНК методом капиллярного электрофореза. Рекомендуется для разделения фрагментов нуклеиновых кислот до 1500 нуклеотидов. ТВЕ может использоваться с агарозными гелями, но не рекомендуется для препаративного электрофореза. Так как борат является ингибитором ферментов, не рекомендуется использовать в случае последующих ферментативных модификаций ДНК. Отфильтрован через мембрану 0,22 мкм.

Предназначен для электрофореза нуклеиновых кислот в агарозном и полиакриламидном гелях. Используется как электродный буфер, буфер для заливки гелей и буфер для приготовления образцов. Отфильтрован через мембрану 0,22 мкм. Рекомендуется для электрофоретического разделения фрагментов ДНК и РНК длиной более 1000 нуклеотидов, геномной ДНК и суперскрученной ДНК.

Агароза TopVision - легкоплавкая агароза, предназначенная для препаративного разделения фрагментов нуклеиновых кислот методом электрофореза, а также для постановки ферментативных реакций в геле.

Оптимальная концентрация - 0.7 - 2%

Имеет сертификат GQ (genetic quality), что означает пригодность очищенных с её помощью нуклеиновых кислот для молекулярно-биологических экспериментов.

Не содержит ДНКаз и РНКаз.

Не связывает ДНК и РНК.

Пригодна для анализа РНК.

Формирует прозрачный гель.

Области применения:

• аналитический электрофорез нуклеиновых кислот

• препаративный электрофорез

• ферментативные реакции в геле

Условия хранения: комнатная температура.

Цвет оранжевый
Длина волны возбуждения флуоресценции, нм 280 (УФ), 502 (голубой)
Длина волны испускания флуоресценции, нм 530 нм (зеленый)
Температура кипения, ºС 189
Температура плавления, ºС 18,4
Температура вспышки, ºС 94
Условия хранения -20 ºС, в темном месте; в оригинальной таре при комнатной температуре
Индекс риска (R): 20,22,26, 36/37/38, 68 вреден при попадании в дыхательные пути
Индекс безопасности (S): 9,36,60

Предназначен для закрывания концов капилляров картриджа секвенатора SeqStudio при хранении его вне прибора.

Среда DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium — модификация среды BME (Basal Medium Eagle), содержит в четыре раза больше аминокислот и витаминов, а также различные добавки, улучшающие рост клеток. Среды DMEM выпускаются с высоким и пониженным содержанием глюкозы, с и без пирувата натрия, с добавками для культивирования клеток различных типов, в том числе нетрансформированных клеток и гибридов. Среда DMEM выпускается как в жидком виде, так и в форме порошка.