Набор для экстракции бактериального белка B-PER | Диаэм



Вернуться назад

Набор для экстракции бактериального белка B-PER

Артикул Цена, вал. Наличие на складе Количество
90078 483,= USD 37 277 Под заказ

Описание

Оплата и доставка

Набор для экстракции бактериального белка B-PER обеспечивает мягкую экстракцию белков из бактерий (E. coli) без необходимости механического повреждения клеток. Набор может быть использован для выделения растворенных белков и телец включения из бактериальных клеточных лизатов. В состав набора входит реагент для экстракции бактериального белка B-PER, лизоцим и ДНКаза I, что позволяет выделять белки большого молекулярного веса (более 70 кДа) и белки экспрессирующиеся в тельцах включения. В зависимости от применения, добавочные компоненты: ингибиторы протеаз, соли, восстанавливающие агенты могут быть добавлены к реагенту.

Важная информация о продукте:

  • B-PER экстрагирует белки из свежих и замороженных клеток. Обычно экстракция более эффективна из замороженных клеток. Количество реагента зависит от количества клеточной пасты. Если необходимо, добавьте ингибиторы протеаз не содержащие ЭДТА, соли, и восстанавливающие агенты прямо в реагент.
  • добавьте лизоцим и ДНКазу I к B-PER реагенту для более эффективной экстракции белка. Экстракция некоторых сверхэкспрессированных белков не требует добавления лизоцима;
  • если добавление лизоцима и ДНКазы I может помешать последующему применению, использование этих ферментов следует исключить;
  • реагент B-PER эффективно экстрагирует растворимые белки из распространенных бактериальных штаммов и особенно подходит для штаммов BL21 с дефектной протеазной экспрессией. Если лизис клеток проходит неэффективно для определенного бактериального штамма, заморозьте клетки перед экстракцией;
  • лизаты цельных клеток, приготовленные с помощью реагента B-PER, совместимы с последующими приложениями, такими как количественное определение белка методом BCA или методом Брэдфорда.

Протокол экстракции белка из бактериальных клеток:

  • осадите бактериальные клетки центрифугированием при 5000 g в течении 10 минут;
  • если необходимо, добавьте 2 мкл лизоцима и 2 мкл ДНКазы I на 1 мл реагента B-PER. Добавьте ингибитор протеаз не содержащий ЭДТА;
  • добавьте 4 мл реагента B-PER на каждый грамм осадка клеток. Суспендируйте пипетированием;
  • инкубируйте 10-15 минут при комнатной температуре;
  • центрифугируйте лизат при 15000 g в течении 5 минут для отделения растворимых и нерастворимых белков.

Примечание: Если огромное количество сверхэкспрессированного белка остается в осадке, выделяемый белок может экспрессироваться в тельцах включения. В этом случае, либо используйте реагент для очистки телец включений (арт. 78115), либо измените условия экспрессии белка для минимизации образования телец включения.

Проблемы при выделении, причины и решения:

Проблема

Возможная причина

Решение

Выделяемый белок не растворяется

Выделяемый белок экспрессируется в тельцах включения

Измените условия экспрессии белка или используйте реагент для солюбилизации телец включения.

Добавьте лизоцим и ДНКазу I к реагенту B-PER

Бактериальные клетки не лизируются при добавлении фермента

Температура слишком низкая

Подогрейте клеточную культуру и остальные реагенты до комнатной температуры

Лизоцим имеет низкую активность или неактивен

Добавьте больше лизоцима к B-PER реагенту или купите новый фермент.

Высокая вязкость клеточного экстракта

ДНКаза I имеет низкую активность или неактивна

Добавьте больше ДНКазы I к B-PER реагенту или купите новый фермент.

Добавьте Mg2+ до конечной концентрации 2 mM

Сверхэкспрессированный белок остается в осадке

Только реагент B-PER не может перевести белок в растворенное состояние

Добавьте лизоцим и ДНКазу I к B-PER

Реагент B-PER мутный после доставки

Реагент холодный

Нагрейте реагент до комнатной температуры

Состав набора B-PER:

  • B-PER реагент для экстракции бактериального белка, 250 мл;
  • лизоцим, 0.5 мл 50мг/мл;
  • ДНКаза I, 0.5 мл, 2500 ед/мл.

Сопутствующие товары Thermo Scientific:

  • 78990 Реагент для экстракции белка из дрожжей Y-PER, Thermo FS;
  • 89802 Реагент для экстракции белка из клеток насекомых I-PER, Thermo FS;
  • 78505 Реагент для экстракции белка из культивируемых клеток млекопитающих M-PER, Thermo FS;
  • 78510 Реагент для экстракции белка из тканей T-PER, Thermo FS;
  • A44056 Реагент для экстракции суммарного белка из растений Pierce Plant, Thermo FS;
  • 89802 Реагент для экстракции белка из насекомых I-PER, Thermo FS;
  • 78115 Реагент для очистки телец включений, Thermo FS.

Информацию о данной продукции можно получить по запросу.

Доставка

Доставка осуществляется по всей России и странам СНГ. Возможен самовывоз со склада по адресу Московская область, г. Мытищи, 7-й Ленинский переулок, д.13. Доставка по Москве и Московской области осуществляется бесплатно.

Цена товара указана со склада в Москве и не включает расходы на доставку в другие города.

Вы можете выбрать способ доставки в личном кабинете, чтобы он автоматически указывался при оформлении всех последующих заказов. При выборе варианта «Транспортная компания по выбору клиента» укажите в комментариях транспортную компанию, с которой вы предпочитаете работать.

Точная стоимость доставки рассчитывается менеджером при подтверждении заказа в зависимости от весообъемных характеристик и дальности. Товары, требующие особого температурного режима, доставляются с соблюдением требуемых условий. Если в заказе есть прекурсоры, необходимо оформить официальное письмо об отпуске прекурсоров. (образец письма об отпуске прекурсоров)


Оплата

Компания Диаэм работает с юридическими и физическими лицами. После оформления заказа продавец-консультант сформирует счет и направит его вам по электронной почте и на страницу заказа в Личном кабинете на сайте. Вы также можете сами сформировать счет из Корзины, авторизовавшись на сайте. Счет оплачивается через банк. Вы можете оплатить товар в кассе Диаэм или любом отделении банка.

Для получения товара необходимо предоставление доверенности организации, а для получения товара при оплате физическим лицом необходим паспорт.

  • Набор для экстракции бактериального белка B-PER
Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!