Трис-глициновый буфер без SDS используется для проведения неденатурирующего (нативного) электрофореза в полиакриламидном геле для разделения белков в зависимости от их молекулярного веса и заряда. После добавления 20% метанола буфер трис-глицин-метанол используется для влажного переноса белков на мембрану. Не содержит метанол. Буфер профильтрован через фильтр 0,2 мкм.
- Концентрация — 10-кратный концентрированный раствор;
-
состав — 1,92 M глицина, 0,25 М трис;
-
условия хранения и транспортировки, °С —15-25, замораживание не допускается.
Приготовление рабочего раствора
Кат. № 12-310024 (10-кратный концентрированный раствор): разбавьте 10-кратный трис-глициновый буфер деионизированной водой (или смесью деионизированной воды и 20% метанола) в пропорции 1:10 (одна часть 10-кратного раствора и 9 частей воды (или 2 части метанола, 7 частей воды). Перемешайте. Раствор в рабочем разведении содержит: 0,192 М глицина, 0,025 М трис, рН 8,2-8,8.
Процедура
Для нативного электрофореза однократный трис-глициновый буфер заливается в камеру для электрофореза. Для переноса используется трис-глицин-метанол, содержащий 20% метанол, в количестве достаточном для покрытия электродов, пропитки мембраны и фильтровальной бумаги.