ДНК-полимераза Phusion является золотым стандартом для высокопроизводительной ПЦР. Частота ошибок у этой полимеразы – более чем в 50 раз ниже, чем у стандартной
Taq ДНК-полимеразы и в 6 раз ниже, чем у
Pfu.
ДНК-полимераза Phusion – наилучший выбор для клонирования и других экспериментов, требующих высокой точности при синтезе ДНК. Этот фермент обеспечивает стабильный выход ПЦР-продукта и быстроту проведения амплификации даже в присутствии ингибиторов.
ДНК-полимераза Phusion синтезирует фрагменты ДНК с тупыми концами.
Наборы Phusion Green комплектуются 5-кратными буферами Phusion Green, содержащими утяжеляющий агент и два маркерных красителя. Это позволяет наносить продукты ПЦР на гель без добавления дополнительных реактивов для электрофореза. Утяжеляющий агент и маркерные красители инертны, не влияют на ПЦР и не мешают использованию ПЦР-продуктов в реакциях лигирования или рестрикции, а также при секвенировании.
Условия хранения - 20 °С.
Особенности ДНК-полимеразы Phusion:
- высокая точность синтеза (в 52 раза выше по сравнению с Taq);
-
более высокая скорость синтеза – 1 тыс. п.н. за 15-30 секунд;
-
универсальность – практически не требуется оптимизация условий ПЦР;
-
больший выход ПЦР-продукта при минимальном количестве фермента.
Области применения:
- высокоточная ПЦР;
-
клонирование;
-
синтез ДНК для секвенирования;
-
амплификация сложных (GC-богатых) последовательностей;
- ПЦР длинных фрагментов (до 20 тыс. п.н.);
-
сайт-специфический мутагенез;
-
высокопроизводительная ПЦР;
-
получение микрочипов.
В состав набора входят:
- ДНК-полимераза Phusion (2 Ед/мкл);
-
5Х буфер Phusion Green HF*;
-
5Х буфер Phusion Green GC*;
-
ДМСО;
-
50 мМ MgCl₂.
* в состав 5Х буферов Phusion Green уже входит 7,5 мМ MgCl₂.