Удобные одноразовые картриджи, готовые к использованию;
особый дизайн с двойными стенками (повышенная прочность колонки);
совместимы с различными хроматографическими системами или шприцами (имеют соединение типа Луер c внешней или внутренней нарезкой);
максимальное давление, psi- 45;
объем колонки, мл – 1 или 5, кроме Bio-Scale Mini Nuvia IMAC и DEAE Affi-Gel Blue (только 5 мл);
размер колонки, I.D.х L, мм – 12,6 х 40 (для 5 мл), 5,6 х 40 (для 1 мл);
материал колонки – полипропилен.
Несколько вариантов сорбентов:
Bio-Scale Mini Nuvia IMAC картриджи
Сорбент – полимер, содержащий нитрилотриуксусную кислоту (НТК) в качестве хелатирующего лиганда для би- и тривалентных ионов металлов. Структура НТК в комплексе с группами Ni2+ обуславливает высоко селективное связывание рекомбинантных гистидин-меченных белков.
Рекомендованы для быстрой и эффективной очистки биомолекул за один шаг.
Совместимы с элюентами – 8 М мочевиной, 6 М гуанидинхлоридом, 1 М NaOH, спиртами до 20 %, а также общими детергентами, солями, редуцирующими агентами и водными буферами.
Диапазон рН -2-14.
Bio-Scale Mini Profinity IMAC картриджи
Предназначены для очистки рекомбинантных гистидин-меченных белков путем иммобилизующей металл-афинной хроматографии (IMAC).
Сорбент – полимер, связанный с функциональными группами иминодиуксусной кислоты (ИДК) в качестве хелатирующего лиганда для би- и тривалентных ионов металлов. Структура ИДК в комплексе с группами Ni2+ обуславливает высоко селективное связывание с полигистидиновым фрагментом белка. Может быть использован как в денатурирующих, так и неденатурирующих условиях.
Совместим с денатурирующими, восстанавливающими агентами, детергентами.
Диапазон рН- 1-14.
Bio-Scale Mini Profinity GST картриджи
Применяются для очистки рекомбинантных белков, меченных глутатион-S-трансферазой (GTS).
Bio-Scale Mini Profinity eXact картриджи
Сорбент – матрица на основе агарозы, конъюгированная с субтилизин протеазой. Используются для очистки и сегментации высокоочищенных рекомбинантных белков, содержащих только нативную последовательность аминокислот (получение таких белков возможно, например, с помощью специальных наборов Profinity eXact fusion-tag).
Bio-Scale Mini UNOsphere SUPrA resin картриджи
Подходят для очистки моноклональных антител, разработки новых методов работы с белками.
Сорбент имеет в своем составе рекомбинантный протеин А, продуцируемый E. сoli без использования материалов животного происхождения.
Особенности полимерного сорбента позволяют сохранить баланс между динамической связывающей способностью, особенностями потока, и стабильностью при разработке новых методов очистки белков.
Bio-Scale Mini Affi-Prep Protein A resin картриджи
Полимерный сорбент Affi-Prep Protein A позволяет получать на этих колонках высокоочищенные Ig G (особенно Ig G млекопитающих). Протеин А селективно связывается с Fс-фрагментом иммуноглобулина Ig G.
Bio-Scale Mini DEAE Affi-Gel Blue картриджи
Сорбент представляет собой бифункциональный афинный гель, содержащий DEAE Bio-Gel A и ковалентно связанный с ним краситель Cibacron Blue F3GA. Краситель связывает альбумин, протеазу и другие комплементарные белки, тогда как DEAE-группы связывают оставшиеся кислые белки.
Данные картриджи являются экономичной альтернативой афинной хроматографии с протеином А:
позволяют провести очистку IgG от сыворотки в один шаг (элюированный IgG содержит небольшое количество трансферрина);
требуют минимальной подготовки образца (без диализа или обессоливания);
не обнаруживается протеолитической активности во фракциях очищенного IgG.
Bio-Scale Mini Affi-Gel картриджи
Картриджи заполнены сорбентом на основе агарозы с поперечными связями, с порами 100-200 Å. Агароза ковалентно связана с красителем Cibacron Blue F3GA, который идеально подходит для извлечения альбумина. Белки и пептиды связываются и освобождаются с высокой степенью специфичности путем подбора компонентов элюирующего буфера.
Рекомендованы для очистки белков и пептидов, плазмид при низком давлении;
совместимы с различными хроматографическими системами или шприцами (имеют соединение типа Луер c внешней или внутренней нарезкой);
заполнены полимерным сорбентом одного из трех типов: - тип High Q - сильный анионообменник, функциональные группы -N+(CH3)3, 37 мг BSA/мл; - тип High S - сильный катионообменник, функциональные группы -SO3-, 49 мг IgG/мл; - тип DEAE S – слабый анионообменник, функциональные группы –HN+(C2H5)2, 35 мг белка;
картриджи имеют высокую химическую, механическую, термическую стабильность;
максимальное давление, psi- 45;
материал колонки – полипропилен;
размер колонки, диаметр х длина – 5,6х40 (1 мл) и 12,6х40 (5 мл).
Рекомендованы для разделения белков при низком давлении;
совместимы с различными хроматографическими системами или шприцами (имеют соединение типа Луер c внешней или внутренней нарезкой);
картриджи заполнены полимерным сорбентом одного из двух типов: - тип Q - для анионообменной хроматографии, функциональные группы -N+(CH3)3, 180 мг BSA/мл; - тип S - для катионообменной хроматографии, функциональные группы -SO3-, 60 мг IgG/мл;
Совместимы с различными хроматографическими системами или шприцами (имеют соединение типа Луер c внешней или внутренней нарезкой);
носитель - полимерный сорбент Rapid S, сильный катионообменник, созданный специально для преодоления изменения рН при кондуктивном переносе; колонка быстро уравновешивается при изменении кондуктивности с минимальными колебаниями рН, что позволяет экономить буферные растворы, быстрее проводить разделение;
высокая химическая стабильность (стабильны в 1М NaOH);
Совместимы с различными хроматографическими системами или шприцами (имеют соединение типа Луер);
сорбент (керамический гидроксиапатит) двух типов: -Тип I – полимеризован при 400 °С, имеет высокую связывающую белки емкость (>25 мг лизоцима/г) и высокую емкость для кислых протеинов; -Тип II - полимеризован при 700 °С, имеет меньшую связывающую белки емкость (>12,5 мг лизоцима/г) и дает лучшее разрешение для нуклеиновых кислот и протеинов; имеет очень низкую афинность для альбумина и более подходит для очистки многих видов и классов иммуноглобулинов;
Колонки заполнены полимерным носителем (полиметакрилатом), характеризующимся высокой химической и механической стабильностью;
активные группы стационарной фазы - полиметакрилат, гидроксилированная фаза;
рекомендованы для гель-фильтрационного разделения водорастворимых полимеров и олигосахаридов;
колонки BioAssist имеют корпус из полимерного материала полиэфирэфиркетона (PEEK), что позволяет уменьшить абсорбцию образца в сравнении со стальными или стеклянными колонками;
возможна работа с 50% органическими растворителями;
диапазон рН – 2-12;
защитные предколонки.
Модель колонки
Размер пор, Å
Размер частиц сорбента, мкм
Молекулярная масса разделяемых ПЭГ/ПЭО, Da
Молекулярная масса разделяемых декстранов, Da
Длина колонки, см
Внутренний диаметр колонки, мм
Примечание, назначение
TSKgel Alpha-2500
25
7
30
7,8
TSKgel Alpha-3000
150
7
30
7,8
TSKgel Alpha-4000
450
10
30
7,8
TSKgel Alpha-5000
1000
10
30
7,8
TSKgel Alpha-6000
не пористый
13
30
7,8
TSKgel Alpha-М
смешанный
13
30
7,8
TSKgel G2000PW
125
12
<2 х 103
60/30
7,5
TSKgel G2500PW
200
12
17
<3 х 103
60
30/60
7,5
21,5
TSKgel G2500PWxl
200
7
<3 х 103
30
7,8
TSKgel G3000PW
300
12
17
<50 х 103
<60 х 103
30/60
30
7,5
21,5
TSKgel G3000PWxl
200
7
<50 х 103
<60 х 103
30
7,8
TSKgel G3000PWxl-СР
200
7
0,2-50 х 103
30
7,8
анализ водорастворимых катионных полимеров
TSKgel G4000PW
500
17
2-300 х 103
1-700 х 103
30/60
7,5
TSKgel G4000PWxl
500
10
2-300 х 103
1-700 х 103
30
7,8
TSKgel G5000PW
1000
17
4-1000 х 103
4-1000 х 103
30/60
7,5
TSKgel G5000PWxl
1000
10
4-1000 х 103
50-7000 х 103
30
7,8
TSKgel G5000PWxl-СР
1000
10
0,4-500 х 103
30
7,8
анализ водорастворимых катионных полимеров
TSKgel G6000PW
>1000
17
40-8000 х 103
500-50000 х 103
30/60
7,5
TSKgel G6000PWxl
>1000
13
40-8000 х 103
500-50000 х 103
30
7,8
TSKgel G6000PWxl-СР
>1000
13
1-10000 х 103
30
7,8
анализ водорастворимых катионных полимеров
TSKgel BioAssist G6PW
1000
17
8000 х 103
30
7,8
TSKgel GMPW
<100 - 1000
17
5-8000 х 103
<50000 х 103
30
7,5
TSKgel GMPWxl
100-1000
13
5-8000 х 103
<50000 х 103
30
7,8
TSKgel G-Oligo-PW
125
7
<3 х 103
30
7,8
разделение водных растворов неионных и катионных олигомеров, олигосахаридов (напр., гидролизованный циклодекстрин)
Колонки предназначены для гравитационной хроматографии (без подсоединения к хроматографической системе, но возможно подсоединение к насосу, резервуару или объединение колонок в серии);
используются для быстрой и эффективной очистки антител;
материал колонки – полипропилен;
сорбент – гель Affi-Gel Protein A (на основе агарозы);
колонка имеет градуировку, верхний фрит и отламывающийся наконечник;
общий объем колонки, мл – 30.
При использовании данной колонки удобно дополнительно использовать наборы для пробоподготовки, включающие колонки для обессоливания, специальные буферы.
Рекомендованы для отработки новых методов и подбора условий, очистки альбуминов, ферментов, включающих NAD+ и NADP+, коагулирующих факторов, интереферонов и их родственных белков;
носитель – Capto Blue, включающий агарозную матрицу Capto, с которой ковалентно связан Cibacron Blue 3G;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 3/0,3/44;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм –7,7 х 100 (4,7 мл).
Рекомендованы для разделения и очистки гликопротеинов, полисахаридов, олиголипидов;
носитель - Con A Sepharose 4B, представляет собой тетрамерный металлопротеин Concanavalin A (Con A) (выделен из Canavalia ensiformis) в качестве лиганда на 4% агарозной матрице;
размер частиц сорбента, мкм – 45-165 (в среднем - 90);
диапазон рН – 4-9;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 16 х 25 (5 мл) и 7 х 25 (1 мл).
Колонки на основе полимерных смол применяются в аффинной хроматографии для очистки биомолекул на основании их биологических функций или структуры. Принцип разделения основан на специфичной и обратимой адсорбции биомолекул аналита с комплементарно связанными лигандами, иммобилизованными на матрице сорбента.
Предназначены для концентрирования антител и их фрагментов (например, Fab, scFv, Dabs) методом аффинной хроматографии низкого давления;
сорбент - Capto L (полимерный), комбинирует в себе агарозную матрицу с рекомбинантным белком – лигандом L (производится без использования культрур клеток млектопитающих), имеющим сильную аффинность к вариабельным фрагментам легких каппа-цепей антител;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления.
Модель колонки
Лиганды/матрица
Размер частиц сорбента (средний), мкм
Диапазон рН
Максимальное давление, bar/MPa/psi
Размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм (объем, мл)
HiTrap Protein L
Рекомбинантный протеин L (E. coli)/агароза с поперечными сшивками
Предназначены для быстрой и эффективной очистки IgG вручную;
поставляются заполненными сорбентом и полностью готовыми к использованию (10 колонок в наборе);
возможно многократное использование (одну колонку можно использовать до 5 раз);
сорбент - Protein G Sepharose 4 Fast Flow, представляющий собой 4% агарозную матрицу с поперечными сшивками, на которой цианбромидным методом (CNBr) иммобилизован в качестве лиганда рекомбинантный протеин G, лишенный альбумин-связывающих регионов;
протеин G в сравнении с протеином А связывает более широкий диапазон IgG эукариотических видов, а также больше подклассов IgG; протеин G имеет большую аффинность к IgG, чем протеин А, и минимальную аффинность к альбумину, что позволяет получать более чистые препараты;
размер частиц сорбента, мкм – в среднем - 90;
объем сорбента, мл - 1;
диапазон рН – 3-9.
Колонки поставляются в двух модификациях:
Protein G GraviTrap заполнены сорбентом - Protein G Sepharose 4 Fast Flow. Имеют удерживающую способность на одну колонку – 20 мг IgG человека.
rProtein A Protein G GraviTrap заполнены смесью сорбентов - rProtein A Sepharose Fast Flow (50%) и Protein G Sepharose 4 Fast Flow (50 %). Имеют удерживающую способность на одну колонку – 35 мг IgG человека.
Предназначены для быстрой и эффективной очистки моно- и поликлональных антител, их фрагментов от супернатанта клеточных культур и биологических жидкостей вручную;
поставляются заполненными сорбентом и полностью готовыми к использованию (10 колонок в наборе);
возможно многократное использование (одну колонку можно использовать до 5 раз);
матрица – 4% агароза с поперечными сшивками;
лиганды – рекомбинатный белок А (E. coli);
размер частиц сорбента, мкм – 60-165 (в среднем - 90);
объем сорбента, мл - 1;
диапазон рН – 2-9.
Колонки поставляются в двух модификациях:
rProtein A GraviTrap заполнены сорбентом - rProtein A Sepharose Fast Flow. Имеют удерживающую способность на одну колонку – 50 мг IgG человека.
rProtein A Protein G GraviTrap заполнены смесью сорбентов - rProtein A Sepharose Fast Flow (50%) и Protein G Sepharose 4 Fast Flow (50 %). Имеют удерживающую способность на одну колонку – 35 мг IgG человека.
Рекомендованы для очистки IgM от культур клеток гибридомы;
носитель – высокоразрешающая Sepharose, представляет собой 6% агарозную матрицу с поперечными сшивками и «пришитыми» к ней лигандами 2-меркаптопиридина;
размер частиц сорбента, мкм – 34;
диапазон рН – 3-11;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 7 х 25 (1 мл).
носитель – высокоразрешающая Sepharose, представляет собой 6% агарозную матрицу с поперечными сшивками и «пришитыми» к ней лигандами 2-меркаптопиридина;
размер частиц сорбента, мкм – 34;
диапазон рН – 3-11;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 16 х 25 (5 мл).
Предназначены для очистки широкого диапазона различных видов и подклассов IgG;
носитель – Protein G Sepharose High Performance, представляет собой 6% агарозную матрицу с поперечными сшивками и «пришитыми» к ней лигандами – рекомбинантным протеином G, лишенным альбумин-связывающих регионов;
размер частиц сорбента, мкм – 34;
диапазон рН – 3-9;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 7 х 25 (1 мл).
Модель колонки
Лиганды/матрица
Размер частиц сорбента (средний), мкм
Диапазон рН
Максимальное давление, bar/MPa/psi
Размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм (объем, мл)
HiTrap Protein L
Рекомбинантный протеин L (E. coli)/агароза с поперечными сшивками
Предназначены для фракционирования иммуноглобулинов IgG по подклассам и очистки их от клеточных супернатантов и биологических жидкостей методом аффинной хроматографии низкого давления;
сорбент - rProtein A Sepharose Fast Flow (белок А в качестве лигандов на матрице из агарозы с поперечными сшивками);
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 16 х 25 (5 мл) и 7 х 25 (1 мл).
Модель колонки
Лиганд/матрица
Размер частиц сорбента (средний), мкм
Размер частиц сорбента (средний), мкм
HiTrap rProtein A FF
Рекомбинантный белок А (E. coli)/ 4% агароза с поперечными сшивками
90
2-9
HiTrap Protein A HP
Нативный белок А/6% агароза с поперечными сшивками
Предназначены для очистки Fab (каппа) фрагмента человека;
носитель – KappaSelect, представляет собой агарозную матрицу с поперечными сшивками и «пришитыми» к ней лигандами – рекомбинантным белком (Mr 13 000), продуцируемым S. Cerevisiae, с аффинностью к постоянным доменам иммуноглобулиновых легких каппа-цепей;
размер частиц сорбента, мкм – 75;
диапазон рН – 3-10;
максимальное давление, bar/MPa/psi – 5/0,5/70;
материал колонки – полипропилен;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 7 х 25 (1 мл).
носитель – IXSelect, представляющий собой агарозную матрицу с поперечными сшивками и фактора IX-лиганды;
размер частиц сорбента, мкм – 75;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 16 х 25 (5 мл) и 7 х 25 (1 мл) - для моделей HiTrap IXSelect; 7,7 х 100 (4,7 мл) – для моделей HiScreen IXSelect.
Матрица – Sepharose, агароза с поперечными сшивками;
предназначены для хроматографии низкого давления;
материал колонки – полипропилен;
возможно подсоединение к шприцам, перистальтическим насосам, хроматографам низкого давления.
Модель колонки
Носитель
Лиганд/матрица
Размер частиц сорбента (средний), мкм
Диапазон рН
Максимальное давление, bar/MPa/psi
Размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм (объем)
Назначение
HiPrep Heparin FF
Heparin Sepharose 6 Fast Flow
Свиной гепарин/6% агароза с поперечными связями
90
4-12
1,5/0,15/22
16х100 (20)
Препаративная очистка белков с аффинностью к гепарину, например, ДНК-связывающие факторы, коагулирующие белки, липопротеины, белоксинтезирующие факторы
HiTrap Benzamidine FF
Benzamidine Sepharose 4 Fast Flow
Р-аминобензамидин (pABA)/ 4% агароза с поперечными связями
90
2-8
5/0,5/70
7х25 (1)
16х25 (5)
Удаление и очистка сериновых протеаз, например, тромбина, трипсина, трипсин-подобных ферментов, зимогенов (в т.ч. урокиназы и прекалликреина) и др. из сыворотки, моноклональных клеточных супернатантов, бактериальных лизатов
HiTrap Blue HP
Blue Sepharose High Performance
Cibacron Blue F3G-A/6% агароза с поперечными связями
34
4-12
5/0,5/70
7х25 (1)
16х25 (5)
Широкий диапазон биомолекул, в т.ч.альбумин, интерферон, нуклеотид-зависимые ферменты, α2-макроглобулин, коагулирующие факторы и др. родственные белки
HiTrap Heparin HP
Heparin Sepharose High Performance
Свиной гепарин/6% агароза с поперечными связями
34
5-10
5/0,5/70
7х25 (1)
16х25 (5)
Препаративная очистка белков с аффинностью к гепарину, например, ДНК-связывающие факторы, коагулирующие белки, липопротеины, белоксинтезирующие факторы
HiTrap NHS-Activated HP
NHS activated Sepharose High Performance
N-гидроксисукцинимид (NHS)/ 6% агароза с поперечными связями
Колонки на основе полимерной матрицы предназначены для использования в гельпроникающей хроматографии (разновидность гель-фильтрационной хроматографии, но мобильная фаза – полностью органическая). Часто используются для определения молекулярной массы синтетических органических полимеров.
Колонки серии Hhr и Xl поставляются в тетрагидрофуране (THF), у колонок Hhr он может быть заменен на широкий ряд других растворителей, тогда как у Xl – только на бензол, хлороформ, толуол, ксилол, дихлорметан, дихлорэтан.
Созданы для высокоразрешающего разделения белков и других биомолекул по их размеру на хроматографах высокого и низкого давления.
Области применения – разделение биомолекул, удаление контаминантов (белков клетки-хозяина, ДНК, белка А и др.), анализ молекул по размеру, дополнительная очистка;
дают качественные и воспроизводимые результаты в широком диапазоне скоростей потока, вязкости и температуры;
максимальное давление, psi – 600;
диапазон рН - 2-12;
объем колонки, мл – 24;
размер колонки, внутренний диаметр х длина, мм – 10 х 300;
два вида сорбентов: -ENrich SEC 70 – для разделения молекул от 500 Da до 70 kDa; -ENrich SEC 650 – для разделения молекул от 5 до 650 kDa;
совместимы с реагентами для повышения растворимости белков - органические кислоты (1 М уксусная), 8M мочевина, 6M гуанидин гидрохлорид, хаотропные агенты, детергенты, соли и 1M NaOH, спирты (до 20 %)), а также водными буферами.
Колонки применяются для разделения крупных молекул (в т.ч. белков) методом гельфильтрационной хроматографии (когда биомолекулы разделяются в соответствии со своими размерами. Относительно маленькие молекул проникают в поры сорбента и там задерживаются, тогда как более крупные молекулы не могут туда проникнуть и вымываются быстрее).
Колонки заполнены сорбентом на основе силикагеля, связанным с различными гидрофильными активными группами, что минимизирует взаимодействие стационарной фазы с белками.
Рекомендуемый диапазон рН – 2,5-7,5;
активные группы стационарной фазы – диольные;
колонки BioAssist G2SWxl, G3SWxl и G4Swxl имеют корпус из полимерного материала полиэфирэфиркетона (PEEK), что позволяет уменьшить абсорбцию образца в сравнении со стальными или стеклянными колонками;
защитные предколонки.
Модель колонки
Размер пор, Å
Размер частиц сорбента, мкм
Молекулярная масса разделяемых глобулярных протеинов, Da
Матрица – полиметакрилат с гидрофильным покрытием, модифицированный различными активными группами, сферические частицы;
сорбент Discovery BIO PolyMA менее гидрофобен по сравнению с полистереном (что уменьшает количество вторичных, неспецифичных взаимодействий с аналитом), имеет большую химическую стабильность относительно силикагелевых сорбентов (возможна работа в широком диапазоне рН, лучше регенерация фазы);
размер частиц сорбента, мкм – 5;
размер пор, Å – 1000;
диапазон температур, °С – 4-50;
рекомендованы для разделения белков, пептидов и других биотехнологически получаемых молекул;
