История
История
Специалист «Диаэм» Анастасия Веткина рассказала о доступном в настоящее время оборудовании для вестерн-блоттинга и белкового электрофореза, а также о расходных продукции, которую компания предлагает в данной области, в том числе антителах, реагентах для рутинного выделения белков и работы с белками.
В настоящее время «Диаэм» расширила линейку реактивов и в дополнение к продукции Bio-rad предлагает реактивы от китайских, индийских, российских и немецких производителей. Реактивы и приборы от Bio-Rad тоже доступны, но теперь ассортимент в этом направлении в целом стал значительно шире.
Среди наиболее популярных реагентов и расходных материалов для электрофореза и вестерн-блоттинга:
«Диаэм» предлагает белковые маркеры — как окрашенные, так и неокрашенные.
В ассортименте по-прежнему есть белковые маркеры Bio-Rad: только у этого производителя есть и неокрашенные (10-250, 6,5-200, 14-97, 45-200, 1,4-26,6 кДа).
Сейчас закуплено огромное количество маркеров от китайского производителя Servicebio, они есть на складе и доступны для быстрой отгрузки. Линейка белковых маркеров у Servicebio достаточно большая (10-250, 10-200, 12-154, 10-180, 19-190, 10-180 кДа), поэтому их можно подобрать под разные задачи.
Компания «Диаэм» расширила ассортимент электрофорезных камер, добавив к продукции Bio-Rad приборы от китайского производителя WIX, причем характеристики этих устройств практически идентичны.
На слайде представлены в сравнении камеры Bio-Rad Mini Protean Tetra (8,3х7,3 см, 10 лунок, 1 мм, 1-4 геля, в комплекте заливочный столик и стекла) и камера WIX-miniPRO4 (артикул 10103001, 8,3х7,3 см, 10, 15 лунок, 1 мм, 1-4 геля, в комплекте заливочный столик и стекла).
По основным техническим характеристикам можно увидеть, что это по сути одна и та же камера. Оба устройства предназначены для четырех мини-гелей, держалки у китайской камеры такие же, как у «биорадовской», одинаков и размер геля, с которым работают обе камеры — 8,3х7,3 см.
В комплект также входят заливочные столики, которые выглядят практически одинаково.
У Bio-Rad они сдвоенные, у WIX – по отдельности.
В комплект входят четыре таких столика, держалки и стекла — как короткие, так и спейсерные.
Следует отметить, что в стандартный комплект входят стекла для заливки геля толщиной 1 мм. Но если нужны гели другой толщины, например 0,75 мм ил 1,5 мм, нужно просто проинформировать «Диаэм» об этом при составлении заказа, и при отгрузке в комплект будут добавлены стекла и гребенка на нужную толщину, так что другие варианты гелей тоже доступны.
Преимущества китайских камер дополняются тем, что все их пластиковые части и стекла полностью совместимы с камерами Bio-Rad, и если у пользователя уже есть камера Bio-Rad, но стекла разбились, он может заказать у «Диаэм» китайские стекла: они полностью подойдут к камере Bio-Rad и доступны для быстрой отгрузки благодаря значительным складским запасам.
Также с китайскими камерами совместимы готовые «биорадовские» гели: если пользователь привык работать с готовыми гелями именно от Bio-Rad, но готов попробовать другую камеру, то можно остановить выбор на продукции WIX и быть уверенным, что привычные гели полностью совместимы с китайскими камерами.
Ассортимент камер для блоттинга также дополнен продукцией WIX, и следует вновь отметить полную идентичность устройств Bio-Rad и китайского производителя (системы мокрого блоттинга 1704070 Criterion Blotter на 1-4 геля с плоскими электродами площадью 150х94 мм с камерой и крышкой — и WIX-miniBLOT4 на 1-4 геля, площадь 110х90 мм с камерой и крышкой).
Так выглядит камера для проведения вестерн-блоттинга, она доступна на 4 сэндвича и на два (в этом случае размер камеры меньше). Она оснащена всеми теми же аксессуарами ,как и продукция Bio-Rad, у нее такие же держалки и в целом все аксессуары совместимы с «биорадовскими» камерами.
Тема совместимости и взаимозаменяемости изделий Bio-Rad и WIX продолжается и в случае источников питания.
Технические характеристики оборудования позволяют убедиться, что приборы, производимые обеими компаниями, действительно одинаковы. Речь о PowerPac HC (1645052) от Bio-Rad и источнике питания с артикулом 10118001 от WIX.
При этом у источников питания WIX есть функция программного обеспечения, заложенного в прибор, позволяющая автоматически переключать напряжение при переходе белков из концентрирующего геля в разделяющий. Пользователю не придется переключать вольтаж вручную: все делает сам источник питания.
Кроме того, у этих источников питания есть режим микродозирования электричества. Он позволяет в случае, когда белковые образцы прошли разделяющий гель и дошли до его края, а пользователь отвлекся в это время, включить специальный режим, не позволяющий белкам выйти из геля в буфер: электричество продолжит подаваться, белки — двигаться по гелю, но это движение будет теперь очень медленным.
Для полусухого переноса Bio-Rad предлагает известную систему Trans-Blot Turbo Transfer System (1704150). WIX «отвечает» на это системой fastBLOT (10112001), которая полностью идентична прибору от Bio-Rad.
У нее те же характеристики: такой же объем образцов, емкость — прибор рассчитан на 4 мини-геля или 2 миди-геля. Перенос с двух мини-гелей осуществляется за 3 минуты, с двух миди-гелей — за 7 минут при условии, что используется готовый буфер для переноса. Если пользователь применяет какие-то самостоятельно приготовленные буферы для переноса, скорость процесса может измениться, в сторону увеличения продолжительности (например, будет не 7, а 20 минут).
У прибора от WIX тоже есть возможность запускать две различные программы переноса одновременно. Разница между двумя устройствами заключается разве что в экране: у Bio-Rad он кнопочный, у WIX — сенсорный.
К уникальным предложениям от WIX можно отнести систему autoPP, которая в какой-то степени служит аналогом системы iBind от Thermo FS.
Эта система предназначена не столько для маленьких лабораторий, сколько для лабораторий крупных, с большим потоком образцов.
После того, как все белки будут перенесены на мембрану, система позволяет автоматически инкубировать их сначала с промывочным буфером мембраны, потом с блокирующим буфером, с первичными и вторичными антителами.
Одновременно можно инкубировать до 12 мембран, но при условии, что они нарезаны на узкие полосочки, потому что контейнеры, в которых проводится процесс, узкие:
Если не разрезать мини-мембрану, следует воспользоваться другими контейнерами, в которые мембрана помещается полностью, но тогда количество мембран будет меньше 12-ти.
Система все делает сама за пользователя: нужно только залить промывочный и блокирующий буферы, а также первичные и вторичные антитела, которые помещаются в указанные «отсеки»:
Затем нужно выбрать время инкубации с каждым компонентом, после чего система сама проводит все процессы: сначала промывает, потом блокирует, потом инкубирует с первичными и вторичными антителами. При этом антитела после того, как они мембрана с ними инкубируется, удаляются из основного отсека с мембраной и возвращаются в исходный отсек. Если в лаборатории пользователя так принято, то можно использовать эти антитела повторно после такого возвращения их в исходные контейнеры.
Управляющий компьютер в таком случае не нужен: у прибора есть небольшой экран, достаточный для того, чтобы все запрограммировать и далее наблюдать за процессом, протекающим внутри.
К уникальным предложениям от WIX относится и система для вестерн-блоттинга с источником питания, имеющим функцию охлаждения. Это нужно для работы с белками, которые очень чувствительны к температуре. Кроме того, система пригодится для процессов, при которых электрофорез протекает очень долго, а холодной комнаты в лаборатории нет, и потому белки нагреваются за счет длительности процесса, а нагрев может как-то повлиять на результат эксперимента.
В этом устройстве заложены элементы Пельтье: они охлаждают буфер, он циркулирует и таким образом прогоняется через источник питания, охлаждается, а за счет этого осуществляется охлаждение камеры.
Следует отметить, что для этого источника питания подходит только определенная камера для вестерн-блота — снабженная тем самым контуром, по которому движется охлажденный буфер. Она покупается отдельно: таким образом при покупке источника питания с охлаждением пользователь должен купить одну камеру. Но бывает, что камера получила повреждения, тогда нет необходимости приобретать снова всю систему (если источник питания цел и работоспособен), можно купить только новую камеру как отдельную позицию.
Камеры для проведения электрофореза есть еще и у китайского производителя Servicebio.
Этот производитель представляет два прибора: камеру для проведения электрофореза на два мини-геля и камеру на проведения вестерн-блота на два сэндвича.
Интересны наборы Servicebio для самостоятельного приготовления гелей – это своего рода промежуточный вариант между гелями, которые пользователь заливает самостоятельно, для чего предварительно должен приготовить навески, отрегулировать pH до нужных значений и так далее, и готовыми гелями. В случае наборов Servicebio пользователь получает готовые растворы, которые нужно смешать в необходимом соотношении, чтобы получить гель нужной концентрации.
Такой подход отлично экономит время, хотя при его использовании определенная часть ручного труда сохраняется.
Но следует отметить, что готовые гели остались только среди продукции Bio-Rad и других производителей, предлагающих готовые гели, в портфолио «Диаэм» пока нет.
Что интересно: в такой набор входит краситель, с помощью которого можно окрашивать верхний концентрирующий гель. Как правило, помещать образец в лунки затруднительно из-за прозрачности этих лунок: их плохо видно. Чтобы избежать этих трудностей, можно верхнюю часть геля окрасить — это опциональное решение: можно и не окрашивать, если есть есть опасения, что красителя может повлиять на результаты эксперимента.
Готовый раствор обычно рассчитан на 50 гелей. Если речь о мини-форматах, на количество будет влиять толщина заливки. Что касается сроков годности таких растворов после вскрытия, информацию нужно уточнять у производителя для каждого конкретного набора.
Сейчас «Диаэм» предлагаем в основном антитела Arigobio, Servicebio и ABclonal. Мы везем по-прежнему и Abcam, но дорого и долго. Однако если у клиентов есть потребности в продукции, которую предлагает только Abcam, то «Диаэм» обеспечит ее поставку.
Есть также небольшое количество антител от российского пр-ля «Сайстор» (SCIstore).
Следует отметить, что ABclonal готов предоставить бесплатные пробники объемом 20 мкл. Если пользователь хочет попробовать антитела, но опасается тратить деньги, связываясь с новым производителем, можно заказать такие пробники — они будут отгружены с каким-либо другим заказом, чтобы их доставка тоже была бесплатной. Так клиенты «Диаэм» могут попробовать новые антитела ABclonal. Но при этом производитель настоятельно просит прислать отзыв об опробованных пробниках.
Последние слайды выборочно представляют реагенты, часто используемые для работы с белками.
Это:
Также есть российская компания Lumiprobe, которая предлагает различные наборы с флуоресцентными красителями для определения концентрации белка, наборы для определения концентрации белка 15102/25102 (100 тестов/ 500 тестов), наборы для определения количества белка ProteOrange 14102 (500 мкл), наборы для мечения белков, а также много других различных реактивов для работы с белками.
До знаковых событий 2022 года компания «Диаэм» предлагала системы Amicon от компании Merck (Millipore). Сейчас эту продукцию везти практически невозможно, но как вариант «Диаэм» предлагает системы ультрафильтрации от производителя Cobetter filtration. В настоящий момент он предлагает только пробирки на 15 мл с полиэфирсульфоновой мембраной. Системы ультрафильтрации позволяют работать с белками и фракционировать белки разной молекулярной массы.
Кроме того, в последнее время стали доступны концентраторы от Sartorius: эта компания производит отгрузку на склад после определенного перерыва, и ассортимент у этого поставщика шире.
Упаковки с концентраторами возможны на 3, 10, 30, 50 и 100 килодальтон.
Для тех, кто занимается хроматографией, очисткой и выделением белков, «Диаэм» предлагает рекомбинантные белки для очистки и выделения антител: белок A, белок G, сорбенты с белком A и G, TEV протеазу и все другие компоненты, которые обычно используются в хроматографии при очистке белков.
В наличии аналоги нитроцеллюлозных мембран от Bio-Rad — они такие же по толщине, по материалу — это PVDF или нитроцеллюлоза, с диаметром пор 0.2 — 0.45 мкм в нарезке 7х8 см. Это продукция компании Servicebio и ряд других производителей.
Дополнительные вопросы о представленной продукции можно задать Анастасии Веткиной:
по телефону +7-843-210-20-80
или электронной почте Avetkina@dia-m.ru.
С помощью личного кабинета Вы сможете:
Сравнение
