Top.Mail.Ru
info@dia-m.ru 8 (800) 23-40-508
+7 (495) 745-05-08
Ваш регион Москва?

Анализ плоидности растений – просто и легко с 7S, BioSino

14.11.2022

Определение плоидности различных организмов от бактерии до млекопитающих проводится с помощью проточного цитометра.

Количество полного набора хромосом в ядре клетки (одноклеточного или многоклеточного организма) определяет – плоидность, а изменение числа хромосом, их увеличение – полиплоидию. Полиплоидия распространена как в растительных, так и животных организмах. Если увеличение числа хромосом в растительных клетках представлено трижды (3n), то это триплоидые растения, четырежды (4n) – тетраплоидные, пять раз (5n) – пентаплоидные и т.д.

Анализ полиплоидии проточным цитометром у растений, например, гаплоидных / диплоидных форм, триплоидов, тетраплоидов и т. д. имеет ценное значение при селекции и выведении новых сортов растений или при тестировании семян, и больше всего привлекает внимание специалистов сельского хозяйства, а также рыбоводных хозяйств и предприятий животноводства.

Проточный цитофлуориметр, 1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов, 7S, BioSino (Китай)

Проточный цитометр 7S, компании BioSino для анализа плоидности

Анализ плоидности у растений методом проточной цитометрии

Анализ плоидности у растений методом проточной цитометрии включает окрашивание ядер с флуоресцентным красителем, который связывается с ДНК.

Результат – гистограмма (histogram plot) плоидности растения, где каждый пик соответствует количеству ядер с одинаковым содержанием ДНК (с одинаковой интенсивностью флуоресценции).

Измерение плоидности можно использовать для отбора потомства с различными желаемыми особенностям.

Исследование плоидности внедрено больше всего в области сельского хозяйства (садоводство). Было показано, что полиплоидные растения обладают большей устойчивостью к болезням, имеют улучшенную устойчивость к стрессу, вредителям.

Примеры

а) Общий вид растений, культивируемых вместе в одном эксперименте; б) Размер генома / плоидность на гистограмме получен проточным цитометром; в) Зрелые листья; Ginkgo biloba г) Устьице диплоидной и полиплоидной Ginkgo biloba. а) Диплоидная A. damascena и Vicia faba; б) Тетраплоидные A. insularis и V. faba; в) Гексаплоидные A. sterilis и Pisum sativum. Плоидность отдельных растений оценивали по соотношению положений пиков, соответствующих ядрам G1 Musa и CRBC. Анализ подтвердил классификацию плоидности M. acuminata ssp. bankii (ITC 0885), Lakatan (ITC 0573) и TMPx 2637-49 (ITC 1196), но классификация не была подтверждена для сорта Cavendish 901 (ITC 0738), который оказался гексаплоидным.

Рисунок 1. Сравнение некоторых свойств тетраплоидных и диплоидных саженцев Ginkgo biloba.

а) Общий вид растений, культивируемых вместе в одном эксперименте;
б) Размер генома / плоидность на гистограмме получен проточным цитометром;
в) Зрелые листья; Ginkgo biloba;
г) Устьице диплоидной и полиплоидной Ginkgo biloba.

Polyploidy in a ‘living fossil’ Ginkgo biloba Petr Šmarda,Pavel Veselý,Jakub Šmerda,Petr Bureš,Ondřej Knápek,Magdaléna Chytrá (https://doi.org/10.1111/nph.14062)

Рисунок 2. Гистограмма показывает флуоресцентно окрашенные пропидий йодидом (PI) ядра, выделенные из листьев Avena и контрольного растения Vicia faba.

а) Диплоидные A. damascena и Vicia faba;
б) Тетраплоидные A. insularis и V. faba;
в) Гексаплоидные A. sterilis и Pisum sativum.

Genome size variation in the genus Avena, Authors: Honghai Yan, Sara L. Martin, Wubishet A. Bekele, Robert G. Latta, Axel Diederichsen, Yuanying Peng, and Nicholas A. Tinker (https://doi.org/10.1139/gen-2015-0132)

Рисунок 3. Гистограмма показывает полученные данные на плоидность после скрининга образцов в INIBAP Transit Centre (ITC) с помощью проточной цитометрии.

Плоидность отдельных растений оценивали по соотношению положений пиков, соответствующих ядрам G1 Musa и CRBC. Анализ подтвердил классификацию плоидности M. acuminata ssp. bankii (ITC 0885), Lakatan (ITC 0573) и TMPx 2637-49 (ITC 1196), сорт Cavendish 901 (ITC 0738) оказался гексаплоидным.

Molecular and Cytogenetic Characterization of Wild Musa Species, Jana Čížková, Eva Hřibová, Pavla Christelová, Ines Van den Houwe, Markku Häkkinen, Nicolas Roux, Rony Swennen, Jaroslav Doležel (https://doi.org/10.1371/journal.pone.0134096)

Красители и подготовка проб

Используемые красители для определения плоидности проточным цитометром.

Основные красители для определения плоидности это пропидий йодид, ДАПИ/DAPI, Hoechst 33258. Крайне важно оптимизировать подготовку и окрашивание ядер для достижения точных измерений плоидности. Окрашивание ядер, выделенных из клеток различных тканей, особенно богатых таннином или гранулам крахмала, могут быть сложными для обработки и вызывать неспецифические окрашивания.



Подготовка проб для анализа плоидности проточным цитометром

Забор образца
растения
Выделение ядра Окрашивание ядер Детекция плоидности
и размера генома
Анализ плоидности
и размера генома


Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог
ZS-AE7S
5 484 770, руб.
426 930 CNY

Простой, удобный в работе проточный цитофлуориметр 7S, от китайской компании BioSino, способен обеспечить до 95% потребностей клеточной лаборатории в области клеточного анализа. Прибор имеет один синий лазер (488 нм), но, несмотря на это, обеспечивает до 7 каналов флуоресцентной детекции и обладает высокой чувствительностью детекции и простым ПО, что делает получение результатов быстрым и максимально комфортным.

7S позволяет реализовать все базовые методы цитометрии в лаборатории: анализ клеточного апоптоза и аутофагии, оценка эффективности трансфекции и уровня экспрессии, изучить фенотипы и субпопуляции лимфоцитов, провести HLA-типирование или анализ индекса фрагментации ДНК спермы человека, а также изучить плоидность растений.

Цитофлуориметр 7S оснащен синим аргоновым лазером 488 нм (50 мВт) и системой детекции из 7 сверхчувствительных светодиодных детекторов, которые регистрируют 5 флуоресцентных сигналов, а также прямое (FSC*) и боковое светорассеяния (SSC**).

Система детекции позволяет работать как с самыми популярными красителями (FITC, Alexa 488, PE, PI), так и тандемными красителями (PE-Texas Red, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7), что позволяет реализовать простые мультиплексные эксперименты.

Демонстрация прибора

Прибор имеется на складе, есть возможность запросить демонстрацию на рабочем месте заказчика. Форма заказа доступна по кнопке «Заказать демо».


Технические характеристики цитофлуориметра 7S

  • Автоматический забор проб с функцией автоматического промешивания;
  • ПО на английском языке;
  • сбор данных / компенсация флуоресценции в 1 клик;
  • метод определения концентрации клеток – прямой подсчет;
  • источник возбуждения – синий лазер 488 нм;
  • каналы детекции:
    • FL1 – 525/50 нм (FITC/Alexa 488);
    • FL2 – 585/40 нм (PE);
    • FL3 – 630/30 нм (PE-Texas Red/ECD/PI);
    • FL4 – 697/60 нм (PerCP /PE-Cy5 / PE-Cy5.5);
    • FL5 – 780/60 нм (PE-Cy7);
  • FSC* чувствительность, мкм – менее 1;
  • минимальный объем образца, мкл – 90;
  • чувствительность, MESF*** – не более 150 (по FITC) и не более 50 (по PE);
  • коэффициенты вариации (CV) для всех каналов, % – менее 2;
  • размер клеток/частиц, мкм – от 0,5 до 50;
  • габариты, Ш × Г × В, см — 500 х 605 х 305;
  • вес, кг – 35.
-------------------------------

* FSC (Forward Scatter) – прямое светорассеивание.
** SSC (Side Scatter) – боковое светорассеивание.
***MESF (Molecules of Equivalent Soluble Fluorochrome) – число молекул указанного эквивалентного растворимого флуорохрома.


См. также:

Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad

Сортер клеток, до 3 лазеров, до 4 флуоресцентных параметров, S3e, Bio-Rad

Антитела

Центрифуги

Диссоциатор клеточный DSC-400, RWD, Китай

  • Проточный цитофлуориметр, 1 лазер, до 5 флуоресцентных каналов, 7S

См. также:

Проточный цитофлуориметр, до 5 лазеров, до 27 флуоресцентных каналов, ZE5, Bio-Rad

Сортер клеток, до 3 лазеров, до 4 флуоресцентных параметров, S3e, Bio-Rad

Антитела

Определение плоидности клеток растений методом проточной цитометрии. Обзор



Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме:

Раскрыть анкету для отправки запроса

Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!