Набор для многоцветного флуоресцентного окрашивания с 4 метками и 5 цветами TSAPLus, Servicebio, Китай

Набор TSAPlus представляет собой решение для многоцветного флуоресцентного иммуноокрашивания парафиновых срезов с использованием четырех меток и пяти различных цветов. Он идеально подходит для многократного мечения первичных антител, полученных из одного или разных источников.

Принцип действия реагентов TSAPlus основывается на технология усиления сигнала тирамидом (TSA). Механизм действия включает пероксидазную реакцию: флуоресцентно-меченый тирамид ковалентно связывается под воздействием пероксидазы хрена (HRP) и H₂O₂ с тирозиновыми остатками белков мишени (антигена) и окружающего матрикса. Это обеспечивает значительное усиление сигнала, поскольку большее количество флуорофора осаждается непосредственно в области взаимодействия антигена и антитела.

В состав набора входят тирамин-меченые флуоресцентные красители (iF440, iF488, iF594 и iF647). Эти соединения отличаются высокой яркостью и стабильностью сигнала, что делает возможным проведение множественных циклов иммуноокрашивания для достижения желаемого многоцветного результата.

Пользователи также могут использовать другие подходящие флуоресцентные красители, исходя из характеристик своего оборудования для флуоресцентной визуализации. Для получения дополнительной информации о совместимости красителей обращайтесь в техническую поддержку производителя.

Технические характеристики набора

• Количество тестов — 50;
• срок хранения набора составляет 12 месяцев при соблюдении соответствующих условий;
• срок годности готового раствора — 24 часа.

Ниже приведены параметры флуоресцентного спектра красителей, входящих в состав реагентов серии TSA

Компоненты набора и условия хранения:

• iF440-Tyramide — 25 мкл, хранить при -20 °C;
• iF488-Tyramide — 25 мкл, хранить при -20 °C;
• iF594-Tyramide — 25 мкл, хранить при -20 °C;
• iF647-Tyramide — 25 мкл, хранить при -20 °C;
• разбавитель для тирамида — 100 мл, хранить при +4 °C;
• DAPI (готовый к использованию) — 10 мл, хранить при +4 °C;
• подавитель автоматической флуоресценции (Sudan Black B) — 10 мл, хранить при комнатной температуре;
• антифлуоресцентный закрепитель — 5 мл, хранить при -20 °C;
• инструкция, шт. — 1.

Протокол использования:

• Подготовка перед экспериментом:
• подготовьте раствор для восстановления антигена (рекомендуется использовать цитратный буфер pH 6,0 или Tris-EDTA буфер pH 8,0/9,0);
• подготовьте PBS-буфер, TBST-буфер, 3% H₂O₂ и 0,3% H₂O₂;
• подготовьте антитела (первичные и соответствующие им вторичные), меченные пероксидазой хрена.
• Приготовление рабочего раствора TSA:
• cмешайте компоненты согласно списку:

Способ применения: рабочий раствор TSA рекомендуется готовить непосредственно перед применением. Хранить его следует при +4 °C в защищенном от света месте, срок годности раствора — 24 часа.