Ультрафильтрация — фильтрация через полупроницаемые мембраны с размером пор, позволяющим отделять макромолекулы от растворителей по молекулярному весу (от 2 до 1 000 кДа). Мембрана проницаема для солей и растворителей и задерживает макромолекулы. По сравнению с другими методами ультрафильтрация является исключительно мягким способом работы с биологическими молекулами, так как не приводит к их денатурации.
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для фильтрации бактерий и клеток из биологических жидкостей, подготовки образцов к HPLC хроматографии, переноса ДНК из агарозного или акриламидного геля.
Рекомендуемая скорость центрифугирования — 16000 g;
Применяется для концентрирования микроорганизмов, нуклеиновых кислот, выделения макромолекулярных компонентов из тканевых культур или клеточных лизатов.
Максимальный объем исходного образца, мл — 15;
остаточный объем, мкл — 200;
рекомендуемая скорость центрифугирования — 7500 об/мин (угловой ротор);
Применяется для концентрирования микроорганизмов, нуклеиновых кислот, выделения макромолекулярных компонентов из тканевых культур или клеточных лизатов.
Максимальный объем исходного образца, мл — 15;
остаточный объем, мкл — 200;
рекомендуемая скорость центрифугирования — 7500 об/мин (угловой ротор);
запатентованная вертикальная мембрана и тонкая фильтрационная камера;
полиэфирсульфоновые (PES) мембраны с низким связыванием белков для 5-ти молекулярных весов: 5; 10; 30; 50 и 100 кД;
молекулярный вес и градуировка, нанесенные на пробирку.
Концентратор центрифужный Spin-X UF 500
Используются для образцов до 500 мкл;
могут использоваться с любым угловым либо бакет-ротором.
Ультрафильтрация — фильтрация через полупроницаемые мембраны с размером пор, позволяющим отделять макромолекулы от растворителей по молекулярному весу (от 2 до 1 000 кДа). Мембрана проницаема для солей и растворителей и задерживает макромолекулы. По сравнению с другими методами ультрафильтрация является исключительно мягким способом работы с биологическими молекулами, так как не приводит к их денатурации. Это более универсальный способ работы, отличающийся высокой эффективностью.
Области применения ультрафильтрации:
концентрирование белков, ферментов, ДНК, моноклональных антител, иммуноглобулинов, вирусов и наночастиц;
очистка продуктов ПЦР (удаление праймеров и остатков нуклеозидтрифосфатов) перед их дальнейшем использованием;
очистка от антибиотиков, гормонов и активных веществ биологических жидкостей и ферментационных бульонов.
Разновидности устройств ультрафильтрации:
Концентрирование центрифугированием — для проб от 100 мкл до 100 мл. Под действием центробежной силы метод ультрафильтрации может использоваться для очистки и концентрирования белков, макромолекул и наночастиц. Данный процесс отличается мягким воздействием, скоростью подготовки и высокой скоростью фильтрации для большинства используемых растворов. Данные концентраторы центрифугируют в центрифугах с угловым ротором от 4 500 до 12 000 g.
Ультрафильтрация под давлением — для проб от 5 до 250 мл. Под давлением, создаваемым насосом, происходит фильтрация через мембрану.
Существует несколько видов мембран для различных задач:
Полиэфирсульфон (ПЭС) — концентрирование элюата после колоночной хроматографии, супернатантов клеточных культур и т.д.
Триацетат целлюлозы — для данной мембраны характерны высокая гидрофильность и очень низкая неспецифическая адсорбция. Производятся без усиливающих подложек, которые улавливают или связывают микрочастицы раствора. Поэтому данные мембраны предпочтительны для очистки пробы и удаления белка с целью достижения высокой степени извлечения фильтрата раствора.
Регенерированная целлюлоза — концентрирование элюатов в колоночной хроматографии.
Для выбора концентратора необходимо обратить внимание на тип мембраны и порог отсечения по молекулярной массе (MWCO). Порог отсечения по молекулярной массе (Molecular weight cut-off, MWCO) — это молекулярный вес молекулы, которая задерживается мембраной на 90 %. Поэтому выбирайте мембраны с таким порогом отсечения (MWCO), который вполовину меньше молекулярного веса задерживаемых частиц.