ИПТГ (изопропил-бета-галактопиранозид) со склада в Москве по спеццене

ИПТГ, или изопропил-бета-галактопиранозид — реагент, используемый в молекулярной биологии, в первую очередь — в генной инженерии. ИПТГ — это молекулярный аналог аллолактозы, являющейся индуктором транскрипции генов под контролем lac-оперона. Но, в отличие от аллолактозы ИПТГ не гидролизуется бета-галактозидазой, поэтому его концентрация остаётся постоянной. Это важно при культивировании микроорганизмов-продуцентов рекомбинантных белков, поскольку не требуется регулярное внесение индуктора в культуру, достаточно сделать это один раз.

ИПТГ связывается с lac-репрессором (lacI) — белком, блокирующим транскрипцию генов, ответственных за метаболизм лактозы. В бактериальных клетках дикого типа это, в первую очередь, ген бета-галактозидазы (lacZ). В генной инженерии широко применяется метод клонирования, при котором чужеродный ген встраивается в вектор под контроль lac-промотора, а затем эта конструкция трансформируется в клетки E.coli. Таким образом, экспрессия этого гена контролируется lac-репрессором и активируется с помощью ИПТГ. Это важно, например, в тех случаях, когда кодируемый чужеродным геном белок оказывает негативное воздействие на бактериальную клетку и его трансляция на стадии лаг-фазы нежелательна.
Ещё одна особенность ИПТГ заключается в том, что его проникновение в клетку не зависит от активности галактопермеазы — белка-транспортера лактозы, ген которого (lacY) также находится под контролем lac-оперона.

Также ИПТГ используется в генной инженерии при проведении бело-голубой селекции. Метод бело-голубой селекции применяется при трансформации для быстрой идентификации колоний бактерий, содержащих вектор с генно-инженерной конструкцией. Рост трансформантов осуществляется в присутствии ИПТГ и X-gal — аналога лактозы, дающего при расщеплении бета-галактозидазой метаболит синего цвета. Клонирование чужеродного гена в вектор происходит внутрь гена бета-галактозидазы, поэтому бактерии, трансформированные вектором со вставкой, не способны расщеплять X-gal. Таким образом, клоны, содержащие вектор со вставкой, образуют на LB-агаре колонии белого цвета, а клоны без вставки — колонии синего цвета.

Стандартная концентрация ИПТГ для бело-голубой селекции 1 мМ. Для индукции экспрессии рекомбинантных белков используют концентрации от 0,1 до 0,5 мМ, но для штаммов E.coli BL21 и BL21(DE) с повышенной продукцией lac-репрессора, применяемых для препаративного получения рекомбинантных белков, рекомендуется более высокая концентрация.

X-gal, или 5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид — хромогенный субстрат для фермента бета-галактозидазы. При расщеплении бета-галактозидазой от субстрата отщепляется индольная структура, которая спонтанно окисляется и выпадает в виде осадка синего цвета. Это свойство широко используется в молекулярной и клеточной биологии.

В первую очередь, X-gal применяется для анализа активности репортерного гена lacZ, кодирующего бета-галактозидазу, в клетках бактерий, дрожжей и животных. В растениях в качестве репортерного гена, маркером активности которого также является X-gal, используется ген GUS.

Также X-gal используется совместно с конъюгатами гликозидаз в качестве реагента для вторичной детекции при иммуногистохимии и ELISA.

Наконец, поскольку бета-галактозидаза сохраняет свою активность в фиксированных клетках и тканях, X-gal используется для детекции её активности.

ИПТГ.png
Пока нет данных. Перейти в каталог
Цена в валюте производителя / в рублях
R0402
2x1 г
хранение -20°C в темноте
18 046,=
244,= USD
R0404
1 г
транспортировка -20°C
9 867,=
133,= USD
X-gal, или 5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид — хромогенный субстрат для фермента бета-галактозидазы. При расщеплении бета-галактозидазой от субстрата отщепляется индольная структура, которая спонтанно окисляется и выпадает в виде осадка синего цвета. Это свойство широко используется в молекулярной и клеточной биологии.

В первую очередь, X-gal применяется для анализа активности репортерного гена lacZ, кодирующего бета-галактозидазу, в клетках бактерий, дрожжей и животных. В растениях в качестве репортерного гена, маркером активности которого также является X-gal, используется ген GUS.

Также X-gal используется совместно с конъюгатами гликозидаз в качестве реагента для вторичной детекции при иммуногистохимии и ELISA.

Наконец, поскольку бета-галактозидаза сохраняет свою активность в фиксированных клетках и тканях, X-gal используется для детекции её активности.

R0392
Стандартная цена: 132,= USD. Скидка 61%.
Стандартная цена: 9 799,=. Скидка 61%.
5 г
транспортировка +4°C
СПЕЦЦЕНА
3 840,=
52,= USD
R0393
Стандартная цена: 439,= USD. Скидка 41%.
Стандартная цена: 32 523,=. Скидка 41%.
5x5 г
транспортировка +4°C
СПЕЦЦЕНА
19 201,=
259,= USD

ИПТГ (Изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид) - высокостабильный аналог лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и индуцирует синтез бета-галактозидазы, фермента, метаболизирующего лактозу. Используется как индуктор экспрессии генов, клонированных под контроль lac-оперона.

Также используется совместно с X-Gal для бело-голубой селекции клонов.

Рекомендуется приготовление стокового раствора в концентрации 100 мМ. Для бело-голубой селекции используется конечная концентрация 0.1 мМ.

Условия хранения: +4оС


А также:

Пока нет данных. Перейти в каталог
Цена в валюте производителя / в рублях
3406.0001
1 г
384,=
5,= EUR
3406.0100
100 г
33 041,=
409,= EUR
3406.0025
25 г
8 673,=
107,= EUR
3406.0005
5 г
1 822,=
23,= EUR
Фенилметилсульфонил фторид (фенилметансульфонил фторид, PMSF) — ингибитор сериновых протеаз, широко применяемый в биохимии и молекулярной биологии. Он ковалентно связывается с серином активного центра протеазы, тем самым необратимо ингибируя её активность.

Наиболее часто встречающиеся в лабораторной практике мишени для PMSF — это трипсин, тромбин, плазмин. Кроме сериновых протеаз PMSF также ингибирует некоторые цистеиновые протеазы, например, папаин.

В лаборатории PMSF обычно используют при выделении белков из клеточных культур или других биологических образцов, добавляя раствор ингибитора к лизату.

PMSF плохо растворим в воде и быстро разлагается в водном растворе, поэтому в лабораторной практике обычно используют раствор PMSF в ДМСО или изопропаноле, который готовят непосредственно перед использованием. Стандартная рабочая концентрация PMSF — от 0,1 до 1 мМ.

PMSF очень токсичен, поэтому рекомендуется при работе с ним соблюдать меры предосторожности и проводить все манипуляции под вытяжкой.
Ваш заказ будет обработан
в ближайшее время.
Мы пришлем уведомление, как только все будет готово. Спасибо!